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与水稻黑条矮缩病毒P6互作的水稻寄主因子及与南方水稻黑条矮缩病毒CP互作的白背飞虱介体因子筛选

致谢第6-7页
摘要第7-9页
Abstract第9-10页
1 文献综述第14-26页
    1.1 水稻病毒概述第14-21页
        1.1.1 水稻黑条矮缩病毒第14-17页
        1.1.2 南方水稻黑条矮缩病毒第17-21页
    1.2 植物RNA病毒的昆虫介体传播机制第21-23页
        1.2.1 非持久型昆虫介体传播机制第21页
        1.2.2 持久循回型昆虫介体传播机制研究第21-23页
    1.3 植物病毒沉默抑制子蛋白与寄主因子互作的研究现状第23-24页
    1.4 酵母双杂交系统第24-26页
        1.4.1 酵母双杂交技术的原理及应用第24-25页
        1.4.2 酵母双杂交技术的优点和局限性第25页
        1.4.3 酵母双杂交技术在植物病毒学中应用的意义第25-26页
2 与水稻黑条矮缩病毒P6互作的水稻寄主因子的筛选第26-51页
    2.1 材料与方法第26-40页
        2.1.1 植物材料第26页
        2.1.2 菌株、质粒和cDNA文库第26页
        2.1.3 主要生化试剂第26页
        2.1.4 水稻黑条矮缩病毒P6诱饵质粒的构建第26-32页
        2.1.5 诱饵蛋白在酵母中表达检测第32-33页
        2.1.6 酵母双杂交实验第33-34页
        2.1.7 RBSDV P6蛋白互作因子筛选第34-35页
        2.1.8 酵母质粒的提取第35-36页
        2.1.9 候选的寄主因子的分离、测序并比对,确定蛋白类型第36页
        2.1.10 候选的寄主因子基因全长克隆及其酵母双杂交载体的构建第36-37页
        2.1.11 水稻P6-100同源序列比对第37页
        2.1.12 将构建好的含全长基因重组质粒转化酵母菌株AH109进行互作验证第37-38页
        2.1.13 BiFC验证P6蛋白与P6-100在植物体内的互作第38-40页
    2.2 结果与分析第40-49页
        2.2.1 诱饵质粒的构建第40页
        2.2.2 诱饵蛋白对酵母毒性及自激活活性的检测第40-41页
        2.2.3 与P6蛋白互作的寄主因子筛选第41-44页
        2.2.4 水稻P6-100基因全长克隆及酵母双杂交载体的构建第44页
        2.2.5 水稻P6-100蛋白与其他植物同源蛋白的相似性比较第44-45页
        2.2.6 利用酵母双杂交验证P6-100与RBSDV P6的互作第45-46页
        2.2.7 利用BIFC验证P6-100与RBSDV P6的互作第46-49页
    2.3 讨论第49-51页
3 与SRBSDV CP互作的白背飞虱介体因子筛选第51-63页
    3.1 材料与方法第51-57页
        3.1.1 实验材料第51页
        3.1.2 菌株、质粒和cDNA文库第51页
        3.1.3 主要生化试剂第51页
        3.1.4 南方水稻黑条矮缩病毒CP诱饵质粒的构建第51-55页
        3.1.5 诱饵蛋白在酵母中的表达检测第55-56页
        3.1.6 酵母双杂交实验第56-57页
        3.1.7 与SRBSDV CP蛋白互作的介体因子筛选第57页
        3.1.8 酵母质粒的提取第57页
        3.1.9 候选的介体因子的分离、测序并比对,确定蛋白类型第57页
    3.2 结果与分析第57-61页
        3.2.1 pGBKT7-CP诱饵载体的构建验证第57-58页
        3.2.2 诱饵蛋白对酵母毒性及自激活活性的检测第58-59页
        3.2.3 诱饵蛋白在酵母中的表达检测第59页
        3.2.4 与CP蛋白互作的介体寄主因子筛选第59-61页
    3.3 讨论第61-63页
参考文献第63-70页
附录A 本论文中所用术语缩写词中英文对照第70-72页
附录B 本论文所用病毒名缩写及其中英文对照第72-73页
附录C 常用缓冲液和培养基配方第73-76页

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