致谢 | 第6-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
1 文献综述 | 第14-26页 |
1.1 水稻病毒概述 | 第14-21页 |
1.1.1 水稻黑条矮缩病毒 | 第14-17页 |
1.1.2 南方水稻黑条矮缩病毒 | 第17-21页 |
1.2 植物RNA病毒的昆虫介体传播机制 | 第21-23页 |
1.2.1 非持久型昆虫介体传播机制 | 第21页 |
1.2.2 持久循回型昆虫介体传播机制研究 | 第21-23页 |
1.3 植物病毒沉默抑制子蛋白与寄主因子互作的研究现状 | 第23-24页 |
1.4 酵母双杂交系统 | 第24-26页 |
1.4.1 酵母双杂交技术的原理及应用 | 第24-25页 |
1.4.2 酵母双杂交技术的优点和局限性 | 第25页 |
1.4.3 酵母双杂交技术在植物病毒学中应用的意义 | 第25-26页 |
2 与水稻黑条矮缩病毒P6互作的水稻寄主因子的筛选 | 第26-51页 |
2.1 材料与方法 | 第26-40页 |
2.1.1 植物材料 | 第26页 |
2.1.2 菌株、质粒和cDNA文库 | 第26页 |
2.1.3 主要生化试剂 | 第26页 |
2.1.4 水稻黑条矮缩病毒P6诱饵质粒的构建 | 第26-32页 |
2.1.5 诱饵蛋白在酵母中表达检测 | 第32-33页 |
2.1.6 酵母双杂交实验 | 第33-34页 |
2.1.7 RBSDV P6蛋白互作因子筛选 | 第34-35页 |
2.1.8 酵母质粒的提取 | 第35-36页 |
2.1.9 候选的寄主因子的分离、测序并比对,确定蛋白类型 | 第36页 |
2.1.10 候选的寄主因子基因全长克隆及其酵母双杂交载体的构建 | 第36-37页 |
2.1.11 水稻P6-100同源序列比对 | 第37页 |
2.1.12 将构建好的含全长基因重组质粒转化酵母菌株AH109进行互作验证 | 第37-38页 |
2.1.13 BiFC验证P6蛋白与P6-100在植物体内的互作 | 第38-40页 |
2.2 结果与分析 | 第40-49页 |
2.2.1 诱饵质粒的构建 | 第40页 |
2.2.2 诱饵蛋白对酵母毒性及自激活活性的检测 | 第40-41页 |
2.2.3 与P6蛋白互作的寄主因子筛选 | 第41-44页 |
2.2.4 水稻P6-100基因全长克隆及酵母双杂交载体的构建 | 第44页 |
2.2.5 水稻P6-100蛋白与其他植物同源蛋白的相似性比较 | 第44-45页 |
2.2.6 利用酵母双杂交验证P6-100与RBSDV P6的互作 | 第45-46页 |
2.2.7 利用BIFC验证P6-100与RBSDV P6的互作 | 第46-49页 |
2.3 讨论 | 第49-51页 |
3 与SRBSDV CP互作的白背飞虱介体因子筛选 | 第51-63页 |
3.1 材料与方法 | 第51-57页 |
3.1.1 实验材料 | 第51页 |
3.1.2 菌株、质粒和cDNA文库 | 第51页 |
3.1.3 主要生化试剂 | 第51页 |
3.1.4 南方水稻黑条矮缩病毒CP诱饵质粒的构建 | 第51-55页 |
3.1.5 诱饵蛋白在酵母中的表达检测 | 第55-56页 |
3.1.6 酵母双杂交实验 | 第56-57页 |
3.1.7 与SRBSDV CP蛋白互作的介体因子筛选 | 第57页 |
3.1.8 酵母质粒的提取 | 第57页 |
3.1.9 候选的介体因子的分离、测序并比对,确定蛋白类型 | 第57页 |
3.2 结果与分析 | 第57-61页 |
3.2.1 pGBKT7-CP诱饵载体的构建验证 | 第57-58页 |
3.2.2 诱饵蛋白对酵母毒性及自激活活性的检测 | 第58-59页 |
3.2.3 诱饵蛋白在酵母中的表达检测 | 第59页 |
3.2.4 与CP蛋白互作的介体寄主因子筛选 | 第59-61页 |
3.3 讨论 | 第61-63页 |
参考文献 | 第63-70页 |
附录A 本论文中所用术语缩写词中英文对照 | 第70-72页 |
附录B 本论文所用病毒名缩写及其中英文对照 | 第72-73页 |
附录C 常用缓冲液和培养基配方 | 第73-76页 |