| 缩略语表 | 第6-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-12页 |
| 前言 | 第13-14页 |
| 文献回顾 | 第14-31页 |
| 第一部分 克隆及表达载体的构建 | 第31-41页 |
| 1 实验材料 | 第31-34页 |
| 1.1 主要试剂和缓冲液 | 第31-33页 |
| 1.2 实验仪器、耗材 | 第33-34页 |
| 2 实验方法 | 第34-36页 |
| 2.1 克隆及表达载体的构建 | 第34-36页 |
| 2.2 表达载体pCAGSJ-EGFP的构建及鉴定 | 第36页 |
| 3 结果 | 第36-39页 |
| 3.1 通过改造pCAGGS得到表达载体pCAGSJ | 第36-39页 |
| 3.2 表达载体pCAGSJ可以稳定高效的表达外源基因 | 第39页 |
| 4 讨论 | 第39-41页 |
| 第二部分 转录因子编码区序列的克隆及转录因子表达载体的构建 | 第41-57页 |
| 1 实验材料 | 第41-46页 |
| 1.1 实验动物 | 第41页 |
| 1.2 主要试剂和缓冲液 | 第41-42页 |
| 1.3 引物序列 | 第42-45页 |
| 1.4 主要仪器、耗材 | 第45-46页 |
| 2 实验方法 | 第46-52页 |
| 2.1 总RNA的提取 | 第46-47页 |
| 2.2 RNA的反转合成cDNA | 第47页 |
| 2.3 常规PCR扩增转录因子编码区序列 | 第47-48页 |
| 2.4 转录因子编码区序列的回收 | 第48-51页 |
| 2.5 转录因子编码区的测序 | 第51-52页 |
| 3 结果 | 第52-55页 |
| 3.1 提取各组织器官的RNA | 第52页 |
| 3.2 通过常规PCR扩增获得38种转录因子编码区序列 | 第52-55页 |
| 3.3 得到38种转录因子的表达载体 | 第55页 |
| 4 讨论 | 第55-57页 |
| 第三部分 单个转录因子对PC12细胞突起生长作用的评估 | 第57-75页 |
| 1 实验材料 | 第57-59页 |
| 1.1 细胞系 | 第57页 |
| 1.2 主要试剂和缓冲液 | 第57-58页 |
| 1.3 实验仪器和耗材 | 第58-59页 |
| 2 实验方法 | 第59-62页 |
| 2.1 PC12细胞系的复苏、培养、传代和冻存 | 第59-60页 |
| 2.2 无内毒素转录因子的提取 | 第60-61页 |
| 2.3 转录因子转染到细胞 | 第61-62页 |
| 2.4 对转录因子作用后不同时间点的细胞采集图像和定量分析 | 第62页 |
| 3 结果 | 第62-73页 |
| 3.1 多种转录因子可促进PC12细胞突起的生长 | 第62-73页 |
| 3.2 筛选促进突起生长效果最为显著的10种转录因子作为后续工作的研究重点 | 第73页 |
| 4 讨论 | 第73-75页 |
| 第四部分 多种转录因子联合转染对PC12细胞突起生长作用的评估 | 第75-82页 |
| 1 实验材料 | 第75-76页 |
| 1.1 细胞系 | 第75页 |
| 1.2 主要试剂和缓冲液 | 第75页 |
| 1.3 实验仪器和耗材 | 第75-76页 |
| 2 实验方法 | 第76-77页 |
| 2.1 PC12细胞系的复苏、培养、传代和冻存 | 第76页 |
| 2.2 转录因子的联合转染 | 第76页 |
| 2.3 联合转染后细胞突起长度分析 | 第76-77页 |
| 3 结果 | 第77-80页 |
| 3.1 三种转录因子联合转染可以更好的促进PC12细胞突起的生长 | 第77-78页 |
| 3.2 在CREB、Stat3、p50、Klf4四种转录因子中CREB+Stat3为“最优组合”，且N-1 策略在后期实验中可行 | 第78-80页 |
| 4 讨论 | 第80-82页 |
| 第五部分 慢病毒包装及感染原代神经元对其轴突生长作用的评估 | 第82-88页 |
| 1 实验材料 | 第82-84页 |
| 1.1 细胞系 | 第82页 |
| 1.2 主要试剂和缓冲液 | 第82-83页 |
| 1.3 实验仪器和耗材 | 第83页 |
| 1.4 构建病毒载体所需引物 | 第83-84页 |
| 1.5 慢病毒包装 | 第84页 |
| 2 实验方法 | 第84-86页 |
| 2.1 细胞的复苏、培养、传代和冻存 | 第84-85页 |
| 2.2 慢病毒载体的构建 | 第85-86页 |
| 3 结果 | 第86页 |
| 4 讨论 | 第86-88页 |
| 小结 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-98页 |
| 个人简历和研究成果 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99页 |
