| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 英文缩略表 | 第10-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-17页 |
| 1.1 研究的目的及意义 | 第11页 |
| 1.2 分子遗传标记的概述 | 第11-13页 |
| 1.2.1 分子遗传标记的种类 | 第11-12页 |
| 1.2.2 RFLP分子标记 | 第12页 |
| 1.2.3 RAPD分子标记 | 第12页 |
| 1.2.4 AFLP分子标记 | 第12页 |
| 1.2.5 SNP分子标记 | 第12页 |
| 1.2.6 SSR分子标记 | 第12-13页 |
| 1.3 主要组织相容性复合体概述 | 第13-14页 |
| 1.3.1 MHC的概述 | 第13页 |
| 1.3.2 鸡MHC的主要组成结构 | 第13-14页 |
| 1.3.3 鸭MHC的主要组成结构 | 第14页 |
| 1.4 TAP基因结构和功能概述 | 第14-17页 |
| 1.4.1 TAP复合体的组成与功能 | 第15页 |
| 1.4.2 TAP在MHC I类分子提呈中的作用 | 第15-16页 |
| 1.4.3 TAP基因的多态性与疾病的关系 | 第16-17页 |
| 第二章 MHC单倍型SPF鸭的遗传学监测 | 第17-27页 |
| 2.1 材料 | 第17页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第17页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第17页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第17页 |
| 2.2 实验方法 | 第17-19页 |
| 2.2.1 鸭TAP基因的RT-PCR扩增 | 第17-19页 |
| 2.2.2 序列分析 | 第19页 |
| 2.2.3 A2TAP基因生物信息学分析 | 第19页 |
| 2.3 结果 | 第19-25页 |
| 2.3.1 DuTAP2基因的扩增 | 第19-20页 |
| 2.3.2 DuTAP2基因遗传纯合性分析 | 第20-22页 |
| 2.3.3 A2TAP基因编码氨基酸序列基本理化性质的分析 | 第22页 |
| 2.3.4 A2TAP基因编码蛋白亲疏水性分析 | 第22-23页 |
| 2.3.5 A2TAP基因编码蛋白跨膜区的分析 | 第23页 |
| 2.3.6 A2TAP基因编码蛋白结构功能域分析 | 第23-24页 |
| 2.3.7 A2TAP基因编码蛋白二级结构预测 | 第24-25页 |
| 2.3.8 A2TAP基因编码蛋白磷酸化位点和糖基化位点分析 | 第25页 |
| 2.3.9 四种单倍型鸭TAP1和TAP2系统发育树的构建 | 第25页 |
| 2.4 讨论 | 第25-27页 |
| 第三章 A2单倍型鸭TAP蛋白的原核表达及鼠多抗血清的制备 | 第27-36页 |
| 3.1 材料 | 第27页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第27页 |
| 3.1.2 菌株和载体 | 第27页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第27页 |
| 3.1.4 仪器设备 | 第27页 |
| 3.2 实验方法 | 第27-32页 |
| 3.2.1 鸭脾脏总RNA的提取及反转录产物的制备 | 第27-28页 |
| 3.2.2 A2TAP1和A2TAP2PBD片段的扩增 | 第28-29页 |
| 3.2.3 A2TAP1和A2TAP2PBD片段在pET-30a载体中的克隆 | 第29-31页 |
| 3.2.4 重组A2TAP1和A2TAP2PBD蛋白在E.coli中的诱导表达 | 第31页 |
| 3.2.5 鼠抗A2TAP1和A2TAP2PBD血清的制备及鉴定 | 第31-32页 |
| 3.3 结果 | 第32-35页 |
| 3.3.1 A2TAP1和A2TAP2PBD基因PCR结果 | 第32页 |
| 3.3.2 重组表达质粒pET-A2TAP1和pET-A2TAP2PBD的鉴定 | 第32-34页 |
| 3.3.3 pET-A2TAP1和pET-A2TAP2PBD重组蛋白的SDS-PAGE检测 | 第34-35页 |
| 3.3.4 鼠抗A2TAP1和A2TAP2PBD多抗血清的Western blot检测 | 第35页 |
| 3.4 讨论 | 第35-36页 |
| 第四章 稳定共表达A2TAP1和A2TAP2蛋白细胞系的建立 | 第36-46页 |
| 4.1 材料 | 第36页 |
| 4.1.1 真核表达载体和细胞 | 第36页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第36页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第36页 |
| 4.2 方法 | 第36-40页 |
| 4.2.1 真核表达载体pIRES-A2TAP1-A2TAP2的构建 | 第36-38页 |
| 4.2.2 新霉素（G418）对RMA-S细胞最小致死浓度的确定 | 第38-39页 |
| 4.2.3 Amaxa Cell Line Nucleofector Kit L转染RMA-S细胞 | 第39页 |
| 4.2.4 稳定共表达A2TAP1和A2TAP2蛋白RMA-S细胞系的筛选 | 第39页 |
| 4.2.5 稳定共表达A2TAP1和A2TAP2蛋白的细胞系的鉴定 | 第39-40页 |
| 4.3 结果 | 第40-44页 |
| 4.3.1 A2TAP1和A2TAP2基因的PCR扩增 | 第40页 |
| 4.3.2 T-A2TAP1和T-A2TAP2质粒的酶切鉴定 | 第40-41页 |
| 4.3.3 重组表达质粒pIRES-A2TAP1和pIRES-A2TAP2的酶切鉴定 | 第41-42页 |
| 4.3.4 重组表达质粒pIRES-A2TAP1-A2TAP2的酶切鉴定 | 第42页 |
| 4.3.5 稳定表达A2TAP1和A2TAP2蛋白细胞系的检测 | 第42-44页 |
| 4.4 讨论 | 第44-46页 |
| 4.4.1 转染细胞的选择 | 第44页 |
| 4.4.2 载体的选择 | 第44页 |
| 4.4.3 转染方法的选择 | 第44-46页 |
| 第五章 全文结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 作者简历 | 第55页 |
