| 中文摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第14-21页 |
| 1.1 ALV-J概述 | 第14-15页 |
| 1.1.1 ALV-J的发现 | 第14页 |
| 1.1.2 ALV-J的结构特征 | 第14-15页 |
| 1.1.3 ALV-J的流行性、致病性及其对生产的影响 | 第15页 |
| 1.2 MDV概述 | 第15-19页 |
| 1.2.1 MDV的发现 | 第15-16页 |
| 1.2.2 MDV的结构特征 | 第16-18页 |
| 1.2.3 MDV的流行性、致病性及其对生产的影响 | 第18-19页 |
| 1.3 禽类免疫抑制病与MDV、ALV-J共感染 | 第19-20页 |
| 1.3.1 禽类免疫系统和免疫抑制 | 第19-20页 |
| 1.3.2 MDV与ALV-J共感染研究概况 | 第20页 |
| 1.4 本课题的研究目的和意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 细胞、病毒和实验动物 | 第21页 |
| 2.1.2 抗体 | 第21页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.4 试验仪器 | 第22页 |
| 2.1.5 实验地点 | 第22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-33页 |
| 2.2.1 CEF细胞培养及病毒的分离鉴定 | 第22-24页 |
| 2.2.1.1 原代CEF细胞制备 | 第22-23页 |
| 2.2.1.2 ALV-J TCID50的测定 | 第23页 |
| 2.2.1.3 MDV的分离鉴定 | 第23页 |
| 2.2.1.4 MDV的毒力鉴定 | 第23页 |
| 2.2.1.5 病毒感做及细胞培养 | 第23-24页 |
| 2.2.2 病毒感染情况检测 | 第24-26页 |
| 2.2.2.1 CEF细胞总DNA提取 | 第24页 |
| 2.2.2.2 ALV-J gp85和MDV Meq序列目的片段扩增 | 第24-25页 |
| 2.2.2.3 1％琼脂糖凝胶电泳 | 第25页 |
| 2.2.2.4 目的片段的回收纯化 | 第25页 |
| 2.2.2.5 间接免疫荧光反应 | 第25-26页 |
| 2.2.2.6 细胞上清p27检测 | 第26页 |
| 2.2.3 Real-time PCR检测ALV-J和MDV的相对表达量 | 第26-29页 |
| 2.2.3.1 细胞总RNA提取 | 第26-27页 |
| 2.2.3.2 RNA逆转录为cDNA | 第27-28页 |
| 2.2.3.3 Real-time PCR | 第28-29页 |
| 2.2.4 Western-blot验证 | 第29-30页 |
| 2.2.4.1 蛋白浓度检测 | 第29页 |
| 2.2.4.2 Western Blot实验 | 第29-30页 |
| 2.2.5 激光扫描共聚焦检测ALV-J和MDV蛋白表达 | 第30页 |
| 2.2.6 ELISA检测IL-6、IL-10、TGF-β的分泌情况 | 第30-32页 |
| 2.2.7 体内实验验证共感染 | 第32-33页 |
| 2.2.7.1 体内分组及接毒设计 | 第32页 |
| 2.2.7.2 动态病理学观察 | 第32页 |
| 2.2.7.3 病料采集 | 第32页 |
| 2.2.7.4 制作常规石蜡切及病理组织学观察 | 第32-33页 |
| 3 结果 | 第33-50页 |
| 3.1 病毒感作实验结果 | 第33-36页 |
| 3.1.1 TCID50测定ALV-J毒力 | 第33-34页 |
| 3.1.2 MDV的分离鉴定 | 第34页 |
| 3.1.3 PCR检测ALV-J、MDV感染情况 | 第34页 |
| 3.1.4 IFA 检测 ALV-J、MDV 感染情况 | 第34-35页 |
| 3.1.5 p27检测ALV-J感染情况 | 第35页 |
| 3.1.6 MDV毒力检测结果 | 第35-36页 |
| 3.2 Real-time PCR检测ALV-J和MDV的细胞内转录水平 | 第36-37页 |
| 3.2.1 ALV-J细胞内转录水平 | 第36-37页 |
| 3.2.2 MDV细胞内转录水平 | 第37页 |
| 3.3 Western Blot检测标志性蛋白 | 第37-38页 |
| 3.3.1 BCA法测定蛋白浓度 | 第37-38页 |
| 3.3.2 Western Blot检测标志性蛋白 | 第38页 |
| 3.4 共感染的两种病毒复制加快，细胞致病性增强 | 第38-39页 |
| 3.5 IL-6、IL-10、TGF-β分泌情况 | 第39-40页 |
| 3.6 体内实验结果 | 第40-50页 |
| 3.6.1 动物接毒后的死亡率 | 第40页 |
| 3.6.2 动态病理学观察结果 | 第40-43页 |
| 3.6.3 血液学 | 第43-44页 |
| 3.6.4 病理组织学 | 第44-50页 |
| 3.6.4.1 神经系统 | 第44-45页 |
| 3.6.4.2 消化系统 | 第45页 |
| 3.6.4.3 免疫系统 | 第45页 |
| 3.6.4.4 其它 | 第45-50页 |
| 4 讨论 | 第50-54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 6.参考文献 | 第55-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
