| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 英文缩写 | 第10-20页 |
| 第1章 绪论 | 第20-32页 |
| 1.1 家蚕的眠性 | 第20-21页 |
| 1.2 蜕皮激素对家蚕眠性的调节 | 第21-26页 |
| 1.2.1 蜕皮激素 | 第21页 |
| 1.2.2 蜕皮激素的合成 | 第21-23页 |
| 1.2.3 蜕皮激素的信号传导 | 第23-25页 |
| 1.2.4 蜕皮激素的代谢 | 第25-26页 |
| 1.2.5 蜕皮激素对昆虫蜕皮的调节 | 第26页 |
| 1.3 昆虫表皮蛋白 | 第26-29页 |
| 1.3.1 昆虫表皮蛋白的分类 | 第27页 |
| 1.3.2 昆虫表皮蛋白基因的表达 | 第27-28页 |
| 1.3.3 激素对昆虫表皮蛋白基因的调控 | 第28页 |
| 1.3.4 表皮蛋白基因的功能 | 第28-29页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第29-30页 |
| 1.5 本研究的主要内容及方法 | 第30-32页 |
| 第2章 家蚕二龄不眠蚕突变体nm2的发现及遗传特性分析 | 第32-40页 |
| 2.1 试验材料 | 第32页 |
| 2.2 试验主要方法 | 第32-33页 |
| 2.2.1 突变性状的遗传分析方法 | 第32-33页 |
| 2.2.2 BmSDR1基因ORF及第3外显子的克隆 | 第33页 |
| 2.3 结果与分析 | 第33-37页 |
| 2.3.1 nm2突变体的性状表现及分离比 | 第33-35页 |
| 2.3.2 突变体的遗传分析 | 第35-37页 |
| 2.3.3 nm2突变个体中的BmSDR1表达分析 | 第37页 |
| 2.4 讨论 | 第37-40页 |
| 第3章 家蚕二龄不眠蚕突变体nm2基因的连锁及定位分析 | 第40-52页 |
| 3.1 实验材料 | 第40-41页 |
| 3.2 主要试验仪器 | 第41页 |
| 3.2.1 主要试验试剂药品 | 第41页 |
| 3.2.2 主要缓冲液和试剂的配制 | 第41页 |
| 3.3 试验方法 | 第41-44页 |
| 3.3.1 二龄不眠蚕基因组DNA的提取 | 第41-42页 |
| 3.3.2 PCR反应体系的构建 | 第42-43页 |
| 3.3.3 琼脂糖凝胶电泳 | 第43页 |
| 3.3.4 多态性标记的筛选、连锁分析 | 第43页 |
| 3.3.5 新SSR标记的筛选及nm2基因的精细定位和绘制基因连锁图 | 第43-44页 |
| 3.4 试验结果 | 第44-50页 |
| 3.4.1 材料发育情况 | 第44页 |
| 3.4.2 BC_1F及BC_1M群体的配制及其性状表现 | 第44-46页 |
| 3.4.3 确定家蚕突变nm2基因所在的连锁群 | 第46-48页 |
| 3.4.4 筛选与nm2基因连锁的新SSR多态性标记 | 第48-49页 |
| 3.4.5 利用BC1M回交群体构建nm2基因遗传连锁图 | 第49-50页 |
| 3.5 讨论 | 第50-52页 |
| 第4章 nm2候选基因的鉴定 | 第52-68页 |
| 4.1 实验材料 | 第52-55页 |
| 4.1.1 实验材料的准备 | 第52页 |
| 4.1.2 主要实验仪器 | 第52页 |
| 4.1.3 主要实验试剂 | 第52-53页 |
| 4.1.4 引物序列 | 第53-55页 |
| 4.2 主要的实验方法 | 第55-60页 |
| 4.2.1 家蚕总RNA的提取 | 第55页 |
| 4.2.2 DNase I处理总RNA | 第55-56页 |
| 4.2.3 第一链cDNA的合成 | 第56页 |
| 4.2.4 半定量PCR（Semiquantitativereverse transcription，RT-PCR） | 第56-57页 |
| 4.2.5 RACE获取cDNA全长 | 第57页 |
| 4.2.6 DNA片段的回收 | 第57-58页 |
| 4.2.7 DNA片段与PMD18-T载体连接 | 第58页 |
| 4.2.8 质粒DNA的转化及筛选阳性克隆 | 第58-59页 |
| 4.2.9 定量PCR（Quantative real-time PCR，qRT-PCR） | 第59页 |
| 4.2.10 dsRNA的合成 | 第59-60页 |
| 4.2.11 dsRNA注射2龄盛食期家蚕 | 第60页 |
| 4.3 试验结果 | 第60-65页 |
| 4.3.1 候选基因的半定量表达分析 | 第60-61页 |
| 4.3.2 突变位点的确定 | 第61-62页 |
| 4.3.3 BmCPG10全长cDNA的克隆 | 第62-63页 |
| 4.3.4 BmCPG10启动子的克隆 | 第63-64页 |
| 4.3.5 RNA interference (RNAi)试验 | 第64-65页 |
| 4.4 讨论 | 第65-68页 |
| 第5章 BmCPG10基因的表达及功能研究 | 第68-78页 |
| 5.1 试验材料 | 第68-69页 |
| 5.1.1 试验材料 | 第68页 |
| 5.1.2 主要的实验仪器 | 第68页 |
| 5.1.3 主要试验试剂 | 第68页 |
| 5.1.4 引物序列 | 第68-69页 |
| 5.2 主要的试验方法 | 第69-70页 |
| 5.2.1 蜕皮激素滴度测定蛋白的提取 | 第69页 |
| 5.2.2 蜕皮激素滴度的测定 | 第69页 |
| 5.2.3 添食试验 | 第69-70页 |
| 5.2.4 荧光定量PCR | 第70页 |
| 5.3 试验结果 | 第70-75页 |
| 5.3.1 BmCPG10在家蚕不同发育时期的表达谱 | 第70页 |
| 5.3.2 BmCPG10在家蚕不同组织的表达谱 | 第70-71页 |
| 5.3.3 蜕皮激素滴度的测定 | 第71-72页 |
| 5.3.4 蜕皮激素合成途径产物添食试验 | 第72-74页 |
| 5.3.5 蜕皮激素滴度对BmCPG10在转录水平表达的影响 | 第74-75页 |
| 5.4 讨论 | 第75-78页 |
| 第6章 野生型和nm2突变体表皮蛋白质组学分析 | 第78-90页 |
| 6.1 试验材料 | 第78-81页 |
| 6.1.1 试验材料的准备 | 第78页 |
| 6.1.2 主要的试验仪器 | 第78页 |
| 6.1.3 主要试验试剂 | 第78-79页 |
| 6.1.4 试验主要试剂的配制 | 第79-81页 |
| 6.2 主要的试验方法 | 第81-83页 |
| 6.2.1 二龄将眠蚕表皮蛋白的提取 | 第81页 |
| 6.2.2 蛋白浓度的测定 | 第81-82页 |
| 6.2.3 电泳第一向等电聚焦 | 第82页 |
| 6.2.4 胶条的平衡及第二向电泳 | 第82-83页 |
| 6.2.5 凝胶的染色 | 第83页 |
| 6.2.6 凝胶的扫描及分析 | 第83页 |
| 6.3 结果与分析 | 第83-89页 |
| 6.3.1 野生型和nm2家蚕表皮蛋白的差异表达蛋白质点 | 第83-84页 |
| 6.3.2 表达差异蛋白点的质谱鉴定 | 第84-85页 |
| 6.3.3 BmCP-like基因在nm2和野生型家蚕中转录水平的表达差异 | 第85-86页 |
| 6.3.4 BmCP-like基因的发育时期和组织表达谱 | 第86-87页 |
| 6.3.5 BmCP-like基因ORF的克隆 | 第87-88页 |
| 6.3.6 BmCP-like基因RNAi试验 | 第88-89页 |
| 6.4 讨论 | 第89-90页 |
| 结论 | 第90-92页 |
| 参考文献 | 第92-102页 |
| 博士期间学术论文发表情况 | 第102-104页 |
| 致谢 | 第104-106页 |
| 大摘要 | 第106-112页 |
| 撰写学位论文摘要要求 | 第107-108页 |
| 大摘要 | 第108-110页 |
| Abstract | 第110-112页 |
