| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第10-19页 |
| 1.1 香料的概况 | 第10页 |
| 1.2 醛类香料的应用及市场状况 | 第10-11页 |
| 1.3 香料的分类 | 第11-12页 |
| 1.4 醛类香料化合物生产技术 | 第12-15页 |
| 1.4.1 化学合成法 | 第12-13页 |
| 1.4.2 生物技术法 | 第13-15页 |
| 1.5 本论文的研究意义及原理 | 第15-17页 |
| 1.6 本论文研究的主要内容 | 第17-18页 |
| 1.6.1 羟肟酸铁比色法测定有机酸的含量 | 第17-18页 |
| 1.6.2 酵母菌FAO1 基因在大肠杆菌中的表达及其催化性能研究 | 第18页 |
| 1.6.3 微生物法催化阿魏酸制备香草醛的研究 | 第18页 |
| 1.7 本论文研究的创新之处 | 第18-19页 |
| 第二章 羟肟酸铁比色法测定有机酸的含量 | 第19-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第20页 |
| 2.1.1 菌种 | 第20页 |
| 2.1.2 培养基 | 第20页 |
| 2.1.3 主要试剂及仪器 | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-25页 |
| 2.2.1 生长条件及转化反应 | 第20-21页 |
| 2.2.2 羟肟酸铁比色法检测有机酸的含量全过程 | 第21页 |
| 2.2.3 细胞量的测定 | 第21页 |
| 2.2.4 细胞干重曲线的测定 | 第21-22页 |
| 2.2.5 紫外吸收的扫描 | 第22页 |
| 2.2.6 羟肟酸铁比色法检测有机酸的含量体系优化 | 第22页 |
| 2.2.7 抗干扰因素的研究 | 第22-23页 |
| 2.2.8 1-氰基-环己基-乙酸的线性范围的研究 | 第23页 |
| 2.2.9 RSD的研究 | 第23页 |
| 2.2.10 加标回收率的研究 | 第23-24页 |
| 2.2.11 动力学常数的研究 | 第24页 |
| 2.2.12 羟肟酸铁比色法和HPLC法监测反应进程的比较 | 第24页 |
| 2.2.13 底物谱的研究 | 第24页 |
| 2.2.14 分析方法 | 第24-25页 |
| 2.2.15 标准曲线的绘制 | 第25页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第25-37页 |
| 2.3.1 紫外光谱的扫描 | 第25-26页 |
| 2.3.2 反应体系的优化 | 第26-30页 |
| 2.3.3 抗干扰因素的研究 | 第30-33页 |
| 2.3.4 1-氰基-环己基-乙酸的线性范围的研究 | 第33页 |
| 2.3.5 RSD及回收率的研究 | 第33-34页 |
| 2.3.6 动力学常数的研究 | 第34-36页 |
| 2.3.7 羟肟酸铁比色法和HPLC法监测反应过程变化的比较 | 第36页 |
| 2.3.8 含腈水解酶基因的pET-21a(+)大肠杆菌静息细胞底物谱的研究 | 第36-37页 |
| 2.4 本章小结 | 第37-38页 |
| 第三章 酵母菌FAO1 基因在大肠杆菌中的表达及催化性能研究 | 第38-58页 |
| 3.1 实验材料 | 第38-39页 |
| 3.1.1 菌种 | 第38页 |
| 3.1.2 培养基 | 第38-39页 |
| 3.1.3 主要试剂及仪器 | 第39页 |
| 3.2 实验方法 | 第39-43页 |
| 3.2.1 重组大肠杆菌的构建 | 第39页 |
| 3.2.2 质粒的相关实验 | 第39-40页 |
| 3.2.3 蛋白纯化实验 | 第40页 |
| 3.2.4 牛血清白蛋白建标曲及Rosetta. BL21(DE3)破碎条件优化 | 第40-41页 |
| 3.2.5 Rosetta. BL21(DE3)的酶活性测定 | 第41页 |
| 3.2.6 培养条件及转化过程 | 第41页 |
| 3.2.7 Rosetta. BL21(DE3)的通透实验及底物谱的研究 | 第41页 |
| 3.2.8 分析方法 | 第41-42页 |
| 3.2.9 萃取标准直线的绘制 | 第42-43页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第43-57页 |
| 3.3.1 质粒的相关实验 | 第43页 |
| 3.3.2 蛋白纯化电泳 | 第43-44页 |
| 3.3.3 破碎条件的优化 | 第44-46页 |
| 3.3.4 醇氧化酶活性大小测定及其体系条件优化 | 第46-48页 |
| 3.3.5 发酵及转化反应的研究 | 第48-55页 |
| 3.3.6 通透实验及底物谱的研究 | 第55-57页 |
| 3.4 本章小结 | 第57-58页 |
| 第四章 微生物法催化阿魏酸制备香草醛的研究 | 第58-73页 |
| 4.1 实验材料 | 第59-60页 |
| 4.1.1 菌种 | 第59页 |
| 4.1.2 培养基的组成成分及配制 | 第59页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第59-60页 |
| 4.1.4 主要仪器 | 第60页 |
| 4.2 实验方法 | 第60-62页 |
| 4.2.1 筛选高产菌种的方法 | 第60-61页 |
| 4.2.2 菌种的鉴定 | 第61页 |
| 4.2.3 筛选野生菌种子及转化反应优化 | 第61页 |
| 4.2.4 分析方法 | 第61-62页 |
| 4.2.5 香草醛标准直线的绘制 | 第62页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第62-72页 |
| 4.3.1 菌种初筛 | 第62-63页 |
| 4.3.2 菌种复筛 | 第63-64页 |
| 4.3.3 菌种形态观察 | 第64页 |
| 4.3.4 生理生化特征 | 第64-65页 |
| 4.3.5 16S rDNA鉴定 | 第65-67页 |
| 4.3.6 碳源及其浓度的优化 | 第67-68页 |
| 4.3.7 氮源及其浓度的优化 | 第68-70页 |
| 4.3.8 摇瓶装液量的优化 | 第70-71页 |
| 4.3.9 起始pH的优化 | 第71页 |
| 4.3.10 温度的优化 | 第71-72页 |
| 4.4 本章小结 | 第72-73页 |
| 第五章 总结与展望 | 第73-75页 |
| 5.1 总结 | 第73-74页 |
| 5.2 进一步工作的方向 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-80页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81-83页 |
| 附件 | 第83页 |
