| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 符号说明 | 第11-13页 |
| 文献综述 | 第13-30页 |
| 一、沙门氏菌疫苗研究进展 | 第13-16页 |
| 1.1 沙门氏菌病的危害 | 第13页 |
| 1.2 沙门氏菌病的防治策略 | 第13-14页 |
| 1.3 常规禽用沙门氏菌疫苗 | 第14-16页 |
| 1.3.1 减毒活疫苗 | 第14页 |
| 1.3.2 灭活疫苗 | 第14-15页 |
| 1.3.3 亚单位疫苗 | 第15-16页 |
| 1.3.4 核酸疫苗 | 第16页 |
| 1.4 展望 | 第16页 |
| 二. SG9R研究进展 | 第16-20页 |
| 2.1 SG9R的来源 | 第17页 |
| 2.2 SG9R的减毒机制 | 第17-18页 |
| 2.3 SG9R作为减毒活疫苗的应用 | 第18-19页 |
| 2.4 SG9R作为减毒活疫苗载体的应用 | 第19-20页 |
| 2.5 SG9R作为减毒活疫苗载体的研究意义 | 第20页 |
| 三、SEF14菌毛研究进展 | 第20-22页 |
| 3.1 SEF14菌毛的发现 | 第20-21页 |
| 3.2 SEF14菌毛的形态结构 | 第21页 |
| 3.3 SEF14菌毛的表达 | 第21-22页 |
| 3.4 SEF14菌毛的免疫保护作用 | 第22页 |
| 四、研究的目的与意义 | 第22-23页 |
| 参考文献 | 第23-30页 |
| 研究一 肠炎沙门氏菌SEF14菌毛操纵子的克隆与表达 | 第30-42页 |
| 1. 材料 | 第31-32页 |
| 1.1 菌株 | 第31页 |
| 1.2 主要试剂 | 第31-32页 |
| 1.3 主要仪器 | 第32页 |
| 2. 方法 | 第32-37页 |
| 2.1 sef基因的扩增和克隆 | 第32-36页 |
| 2.2 sef基因的表达鉴定 | 第36-37页 |
| 3. 结果 | 第37-39页 |
| 4. 讨论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-42页 |
| 研究二 肠炎沙门氏菌SEF14菌毛操纵子主要亚单位sefA的克隆、原核表达与多克隆抗体的制备 | 第42-56页 |
| 1. 材料 | 第43-44页 |
| 1.1 菌株 | 第43页 |
| 1.2 培养基和主要试剂 | 第43页 |
| 1.3 主要仪器 | 第43-44页 |
| 1.4 实验动物 | 第44页 |
| 2. 方法 | 第44-50页 |
| 2.1 sefA基因目的片段的扩增 | 第44-45页 |
| 2.2 pMD-19-T-sefA重组质粒的构建 | 第45-46页 |
| 2.3 pET-28a (+)-sefA-BL21重组质粒的构建 | 第46-47页 |
| 2.4 重组蛋白的表达和可溶性分析 | 第47-48页 |
| 2.5 重组蛋白的大量诱导表达和纯化 | 第48-49页 |
| 2.6 多抗血清的制备 | 第49页 |
| 2.7 ELISA测定血清效价 | 第49-50页 |
| 3. 结果 | 第50-55页 |
| 3.1 PCR扩增sefA基因 | 第50页 |
| 3.2 重组质粒pMD-19-T-sefA的酶切鉴定 | 第50页 |
| 3.3 重组质粒pET-28a(+)-sefA的酶切鉴定 | 第50-51页 |
| 3.4 重组蛋白的诱导表达和纯化 | 第51页 |
| 3.5 BCA法测定rSEFA蛋白含量 | 第51-53页 |
| 3.6 重组纯化蛋白的鉴定 | 第53-54页 |
| 3.7 ELISA测定血清效价 | 第54-55页 |
| 4. 讨论 | 第55页 |
| 参考文献 | 第55-56页 |
| 研究三 表达肠炎沙门氏菌SEF14菌毛的重组减毒鸡伤寒沙门氏菌的构建及免疫保护效果研究 | 第56-82页 |
| 1. 材料 | 第58-59页 |
| 1.1 菌株 | 第58页 |
| 1.2 培养基和主要试剂 | 第58-59页 |
| 1.3 主要仪器 | 第59页 |
| 1.4 试验动物 | 第59页 |
| 2. 方法 | 第59-67页 |
| 2.1 重组菌SG9R (pYA3342-sef)与SG9R (pYA3342-sefA)的构建 | 第59-62页 |
| 2.2 重组菌的表达鉴定 | 第62-63页 |
| 2.3 重组菌生长曲线测定 | 第63页 |
| 2.4 鸡巨噬细胞HD11吞噬试验和存活试验 | 第63-64页 |
| 2.5 重组菌SG9R(pYA3342-sef)、SG9R(pYA3342-sefA)体外稳定性试验 | 第64页 |
| 2.6 菌液制备及活菌数测定 | 第64页 |
| 2.7 重组菌对仔鸡的安全性试验 | 第64页 |
| 2.8 重组口服疫苗对鸡的免疫保护试验 | 第64-65页 |
| 2.9 重组口服疫苗对鸡的细胞免疫的影响 | 第65-66页 |
| 2.10 血清中特异性抗体IgG检测 | 第66-67页 |
| 2.11 黏膜特异性抗体sIgA检测 | 第67页 |
| 2.12 攻毒试验 | 第67页 |
| 3. 结果 | 第67-77页 |
| 3.1 SG9R (pYA3342-sef)的构建与鉴定 | 第67页 |
| 3.2 SG9R (pYA3342-sefA)的构建与鉴定 | 第67-69页 |
| 3.3 重组菌的表达鉴定 | 第69-70页 |
| 3.4 生长曲线 | 第70页 |
| 3.5 鸡巨噬细胞HD11吞噬试验和存活试验 | 第70-71页 |
| 3.6 重组菌体外稳定性试验 | 第71-72页 |
| 3.7 重组口服疫苗的安全性试验 | 第72页 |
| 3.8 外周血CD3+、CD8+T淋巴细胞动态变化检测 | 第72-73页 |
| 3.9 免疫鸡血清IgG抗体检测结果 | 第73-74页 |
| 3.10 抗SEFA特异性sIgA抗体检测结果 | 第74-75页 |
| 3.11 免疫鸡体增重结果 | 第75页 |
| 3.12 仔鸡免疫重组口服活疫苗攻毒保护结果 | 第75-77页 |
| 4. 讨论 | 第77-80页 |
| 参考文献 | 第80-82页 |
| 全文小结 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
