| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 1. 引言 | 第13-17页 |
| 2. 材料和方法 | 第17-24页 |
| 2.1 材料 | 第17-19页 |
| 2.1.1 标本来源 | 第17页 |
| 2.1.3 样本处理 | 第17页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第17-18页 |
| 2.1.5 主要仪器及耗材 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-21页 |
| 2.2.1 microRNA-21引物设计及合成 | 第19页 |
| 2.2.2 microRNA - 21逆转录及PCR扩增步骤 | 第19-20页 |
| 2.2.2.1 逆转录体系及反应条件 | 第19-20页 |
| 2.2.2.1.1 样本及标准品逆转录体系 | 第20页 |
| 2.2.2.1.2 逆转录条件 | 第20页 |
| 2.2.3 qRT-PCR扩增体系、反应条件及溶解曲线分析 | 第20-21页 |
| 2.2.3.1 qRT-PCR扩增体系 | 第20-21页 |
| 2.2.3.2 qRT-PCR扩增条件及溶解曲线分析条件 | 第21页 |
| 2.3 总RNA/microRNA提取 | 第21-22页 |
| 2.4 RNA浓度鉴定 | 第22-23页 |
| 2.4.1 紫外光测定 | 第22页 |
| 2.4.2 凝胶制备及电泳测定 | 第22-23页 |
| 2.5 标准曲线绘制 | 第23页 |
| 2.7 统计学分析 | 第23-24页 |
| 3. 结果 | 第24-33页 |
| 3.1 紫外分光光度计检测总RNA浓度 | 第24页 |
| 3.2 总RNA完整性初步鉴定 | 第24-25页 |
| 3.3 micro RNA-21及各引物扩增产物的电泳结果 | 第25页 |
| 3.4 microRNA-21溶解曲线 | 第25-26页 |
| 3.5 microRNA-21扩增曲线检测限 | 第26-27页 |
| 3.6 microRNA-21标准浓度线性分析 | 第27-28页 |
| 3.7 各梯度标准品qRT-PCR Ct值重复性验证 | 第28页 |
| 3.8 三组样本血清中microRNA-21的PCR曲线 | 第28-30页 |
| 3.8.1 乳腺癌患者血清中的microRNA-21 | 第28-29页 |
| 3.8.2 乳腺良性肿瘤患者血清中microRNA-21 | 第29页 |
| 3.8.3 正常对照组血清microRNA-21表达水平 | 第29-30页 |
| 3.9 三组间microRNA-21的表达水平 | 第30页 |
| 3.10不同病理参数与乳腺癌患者microRNA-21的含量关系 | 第30-31页 |
| 3.11 microRNA-21变量与乳腺癌分期关系 | 第31页 |
| 3.12 建立正常人群microRNA-21医学参考区间 | 第31-32页 |
| 3.13 MicroRNA-21在诊断乳腺癌中的应用评价 | 第32-33页 |
| 4. 讨论 | 第33-37页 |
| 4.1 microRNA-21与乳腺癌 | 第33-34页 |
| 4.2 实时荧光定量PCR与microRNA-21的检测 | 第34-35页 |
| 4.3 microRNA-21与乳腺癌临床病理特征 | 第35页 |
| 4.4 microRNA-21检测限及生物参考区间 | 第35-37页 |
| 5. 结论 | 第37-39页 |
| 参考文献 | 第39-45页 |
| 综述 | 第45-57页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 英文缩写对照表 | 第57-59页 |
| 读研期间发表的论文及参与的课题 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 附表 | 第61-66页 |
