中文摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
List of Abbreviations | 第21-23页 |
第一章 前言 | 第23-80页 |
1.1 阳离子聚合物基因载体材料 | 第24-32页 |
1.1.1 阳离子聚合物/DNA复合物的细胞内输送机制 | 第25-29页 |
1.1.1.1 细胞摄取 | 第25-26页 |
1.1.1.2 溶酶体逃逸 | 第26-27页 |
1.1.1.3 Polyplex的基因释放 | 第27-29页 |
1.1.2 自由聚合物在基因转染中的作用 | 第29-32页 |
1.2 生物可降解载体材料聚天冬酰胺及其衍生物 | 第32-43页 |
1.2.1 聚天冬酰胺及其衍生物的合成方法 | 第33-35页 |
1.2.1.1 N-羰基环内酰胺开环聚合-胺解法 | 第33-34页 |
1.2.1.2 聚琥珀酰亚胺胺解法 | 第34-35页 |
1.2.2 聚天冬酰胺及其衍生物的功能性修饰及应用 | 第35-43页 |
1.2.2.1 亲水性修饰及应用 | 第36-37页 |
1.2.2.2 pH响应性修饰及应用 | 第37-39页 |
1.2.2.3 氧化还原响应性修饰及应用 | 第39-41页 |
1.2.2.4 靶向性修饰及应用 | 第41-43页 |
1.3 共轭聚电解质材料 | 第43-60页 |
1.3.1 基于聚噻吩的共轭聚电解质材料 | 第44-52页 |
1.3.1.1 聚噻吩的制备方法 | 第45-48页 |
1.3.1.2 基于聚噻吩的共轭聚电解质材料在生物领域的应用 | 第48-52页 |
1.3.2 基于聚苯撑乙炔的共轭聚电解质材料 | 第52-60页 |
1.3.2.1 聚苯撑乙炔的合成 | 第53-54页 |
1.3.2.2 基于PPE的CPEs在生物领域的应用 | 第54-60页 |
1.4 论文立题依据 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-80页 |
第二章 生物可降解星形聚合物用于靶向巨噬细胞的基因输送 | 第80-108页 |
2.1 引论 | 第80-82页 |
2.2 实验与方法 | 第82-90页 |
2.2.1 实验仪器与试剂 | 第82-83页 |
2.2.1.1 实验仪器 | 第82-83页 |
2.2.1.2 试剂 | 第83页 |
2.2.2 目标分子的设计与合成 | 第83-87页 |
2.2.2.1 合成路线 | 第83-84页 |
2.2.2.2 BLA-NCA的合成 | 第84-85页 |
2.2.2.3 载体材料的合成 | 第85-87页 |
2.2.3 实验操作步骤 | 第87-90页 |
2.2.3.1 感受态细胞的制备和质粒提取 | 第87-88页 |
2.2.3.2 载体材料经配体修饰后的氨基浓度校正 | 第88页 |
2.2.3.3 Polyplex制备与表征 | 第88-89页 |
2.2.3.4 细胞培养 | 第89页 |
2.2.3.5 细胞转染实验 | 第89-90页 |
2.3 结果与讨论 | 第90-104页 |
2.3.1 聚合物的结构性质 | 第90-92页 |
2.3.2 polyplex的结构与稳定性 | 第92-94页 |
2.3.3 In vitro基因转染 | 第94-96页 |
2.3.4 In vitro基因转染优化 | 第96-104页 |
2.4 小结 | 第104-105页 |
参考文献 | 第105-108页 |
第三章 阳离子聚噻吩增强基因输送 | 第108-150页 |
3.1 引论 | 第108-110页 |
3.2 实验与方法 | 第110-121页 |
3.2.1 实验仪器与试剂 | 第110-111页 |
3.2.1.1 实验仪器 | 第110页 |
3.2.1.2 试剂 | 第110-111页 |
3.2.2 目标分子的设计与合成 | 第111-114页 |
3.2.2.1 合成路线 | 第111页 |
3.2.2.2 3-噻吩乙酸乙酯和3-噻吩丙二酸乙酯的合成 | 第111-112页 |
3.2.2.3 2-噻吩乙酸活性酯的合成 | 第112页 |
3.2.2.4 T3的合成 | 第112-113页 |
3.2.2.5 脂溶性聚噻吩的合成 | 第113页 |
3.2.2.6 阳离子聚噻吩的合成 | 第113-114页 |
3.2.3 实验操作步骤 | 第114-121页 |
3.2.3.1 紫外-可见光光谱和荧光光谱测量 | 第114页 |
3.2.3.2 单线态氧量子产率测定 | 第114-115页 |
3.2.3.3 Polyplex制备与表征 | 第115-116页 |
3.2.3.4 EB竞争实验 | 第116页 |
3.2.3.5 细胞培养 | 第116-117页 |
3.2.3.6 MTT毒性试验 | 第117页 |
3.2.3.7 细胞转染实验 | 第117-118页 |
3.2.3.8 细胞内ROS水平检测 | 第118-119页 |
3.2.3.9 纳米复合物在细胞内的分布 | 第119-120页 |
3.2.3.10 细胞内溶酶体完整性测试 | 第120-121页 |
3.3 结果与讨论 | 第121-146页 |
3.3.1 聚噻吩结构表征 | 第121-123页 |
3.3.2 聚噻吩光学性质 | 第123-126页 |
3.3.3 纳米复合物结构表征 | 第126-127页 |
3.3.4 纳米复合物的稳定性 | 第127-129页 |
3.3.5 MTT实验 | 第129-131页 |
3.3.6 细胞内ROS水平 | 第131-135页 |
3.3.7 In vitro细胞转染 | 第135-140页 |
3.3.8 cPT在基因转运中的作用 | 第140-143页 |
3.3.9 cPT对溶酶体膜的作用 | 第143-146页 |
3.4 小结 | 第146页 |
参考文献 | 第146-150页 |
第四章 阳离子聚苯撑乙炔增强基因输送 | 第150-174页 |
4.1 引论 | 第150-152页 |
4.2 实验与方法 | 第152-156页 |
4.2.1 实验仪器与试剂 | 第152-153页 |
4.2.1.1 实验仪器 | 第152页 |
4.2.1.2 所用试剂 | 第152-153页 |
4.2.2 实验操作步骤 | 第153-156页 |
4.2.2.1 Polyplex制备与表征 | 第153-154页 |
4.2.2.2 细胞培养条件 | 第154页 |
4.2.2.3 MTT毒性试验 | 第154页 |
4.2.2.4 细胞转染实验 | 第154-155页 |
4.2.2.5 激光共聚焦观察细胞内荧光分布 | 第155-156页 |
4.3 结果与讨论 | 第156-171页 |
4.3.1 Polyplex的性质表征 | 第156-158页 |
4.3.2 MTT实验 | 第158-159页 |
4.3.3 四种cPPE材料在细胞内基因输送的研究 | 第159-167页 |
4.3.4 多组份纳米复合物in vitro基因输送研究 | 第167-171页 |
4.4 小结 | 第171-172页 |
参考文献 | 第172-174页 |
总结与展望 | 第174-176页 |
博士期间已发表和待发表论文 | 第176-177页 |
致谢 | 第177-179页 |