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基于星状阳离子聚合物载体的基因输送研究

中文摘要第7-9页
Abstract第9-11页
List of Abbreviations第21-23页
第一章 前言第23-80页
    1.1 阳离子聚合物基因载体材料第24-32页
        1.1.1 阳离子聚合物/DNA复合物的细胞内输送机制第25-29页
            1.1.1.1 细胞摄取第25-26页
            1.1.1.2 溶酶体逃逸第26-27页
            1.1.1.3 Polyplex的基因释放第27-29页
        1.1.2 自由聚合物在基因转染中的作用第29-32页
    1.2 生物可降解载体材料聚天冬酰胺及其衍生物第32-43页
        1.2.1 聚天冬酰胺及其衍生物的合成方法第33-35页
            1.2.1.1 N-羰基环内酰胺开环聚合-胺解法第33-34页
            1.2.1.2 聚琥珀酰亚胺胺解法第34-35页
        1.2.2 聚天冬酰胺及其衍生物的功能性修饰及应用第35-43页
            1.2.2.1 亲水性修饰及应用第36-37页
            1.2.2.2 pH响应性修饰及应用第37-39页
            1.2.2.3 氧化还原响应性修饰及应用第39-41页
            1.2.2.4 靶向性修饰及应用第41-43页
    1.3 共轭聚电解质材料第43-60页
        1.3.1 基于聚噻吩的共轭聚电解质材料第44-52页
            1.3.1.1 聚噻吩的制备方法第45-48页
            1.3.1.2 基于聚噻吩的共轭聚电解质材料在生物领域的应用第48-52页
        1.3.2 基于聚苯撑乙炔的共轭聚电解质材料第52-60页
            1.3.2.1 聚苯撑乙炔的合成第53-54页
            1.3.2.2 基于PPE的CPEs在生物领域的应用第54-60页
    1.4 论文立题依据第60-62页
    参考文献第62-80页
第二章 生物可降解星形聚合物用于靶向巨噬细胞的基因输送第80-108页
    2.1 引论第80-82页
    2.2 实验与方法第82-90页
        2.2.1 实验仪器与试剂第82-83页
            2.2.1.1 实验仪器第82-83页
            2.2.1.2 试剂第83页
        2.2.2 目标分子的设计与合成第83-87页
            2.2.2.1 合成路线第83-84页
            2.2.2.2 BLA-NCA的合成第84-85页
            2.2.2.3 载体材料的合成第85-87页
        2.2.3 实验操作步骤第87-90页
            2.2.3.1 感受态细胞的制备和质粒提取第87-88页
            2.2.3.2 载体材料经配体修饰后的氨基浓度校正第88页
            2.2.3.3 Polyplex制备与表征第88-89页
            2.2.3.4 细胞培养第89页
            2.2.3.5 细胞转染实验第89-90页
    2.3 结果与讨论第90-104页
        2.3.1 聚合物的结构性质第90-92页
        2.3.2 polyplex的结构与稳定性第92-94页
        2.3.3 In vitro基因转染第94-96页
        2.3.4 In vitro基因转染优化第96-104页
    2.4 小结第104-105页
    参考文献第105-108页
第三章 阳离子聚噻吩增强基因输送第108-150页
    3.1 引论第108-110页
    3.2 实验与方法第110-121页
        3.2.1 实验仪器与试剂第110-111页
            3.2.1.1 实验仪器第110页
            3.2.1.2 试剂第110-111页
        3.2.2 目标分子的设计与合成第111-114页
            3.2.2.1 合成路线第111页
            3.2.2.2 3-噻吩乙酸乙酯和3-噻吩丙二酸乙酯的合成第111-112页
            3.2.2.3 2-噻吩乙酸活性酯的合成第112页
            3.2.2.4 T3的合成第112-113页
            3.2.2.5 脂溶性聚噻吩的合成第113页
            3.2.2.6 阳离子聚噻吩的合成第113-114页
        3.2.3 实验操作步骤第114-121页
            3.2.3.1 紫外-可见光光谱和荧光光谱测量第114页
            3.2.3.2 单线态氧量子产率测定第114-115页
            3.2.3.3 Polyplex制备与表征第115-116页
            3.2.3.4 EB竞争实验第116页
            3.2.3.5 细胞培养第116-117页
            3.2.3.6 MTT毒性试验第117页
            3.2.3.7 细胞转染实验第117-118页
            3.2.3.8 细胞内ROS水平检测第118-119页
            3.2.3.9 纳米复合物在细胞内的分布第119-120页
            3.2.3.10 细胞内溶酶体完整性测试第120-121页
    3.3 结果与讨论第121-146页
        3.3.1 聚噻吩结构表征第121-123页
        3.3.2 聚噻吩光学性质第123-126页
        3.3.3 纳米复合物结构表征第126-127页
        3.3.4 纳米复合物的稳定性第127-129页
        3.3.5 MTT实验第129-131页
        3.3.6 细胞内ROS水平第131-135页
        3.3.7 In vitro细胞转染第135-140页
        3.3.8 cPT在基因转运中的作用第140-143页
        3.3.9 cPT对溶酶体膜的作用第143-146页
    3.4 小结第146页
    参考文献第146-150页
第四章 阳离子聚苯撑乙炔增强基因输送第150-174页
    4.1 引论第150-152页
    4.2 实验与方法第152-156页
        4.2.1 实验仪器与试剂第152-153页
            4.2.1.1 实验仪器第152页
            4.2.1.2 所用试剂第152-153页
        4.2.2 实验操作步骤第153-156页
            4.2.2.1 Polyplex制备与表征第153-154页
            4.2.2.2 细胞培养条件第154页
            4.2.2.3 MTT毒性试验第154页
            4.2.2.4 细胞转染实验第154-155页
            4.2.2.5 激光共聚焦观察细胞内荧光分布第155-156页
    4.3 结果与讨论第156-171页
        4.3.1 Polyplex的性质表征第156-158页
        4.3.2 MTT实验第158-159页
        4.3.3 四种cPPE材料在细胞内基因输送的研究第159-167页
        4.3.4 多组份纳米复合物in vitro基因输送研究第167-171页
    4.4 小结第171-172页
    参考文献第172-174页
总结与展望第174-176页
博士期间已发表和待发表论文第176-177页
致谢第177-179页

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