| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 前言 | 第13-16页 |
| 第一章 基于环境敏感与淬灭机制的SNAP-tag探针及其细胞内蛋白的标记 | 第16-41页 |
| 第一部分 荧光探针的合成 | 第16-19页 |
| 1. 材料 | 第16-17页 |
| 1.1 主要试剂 | 第16页 |
| 1.2 实验仪器 | 第16-17页 |
| 2. 实验方法 | 第17-19页 |
| 第二部分 SNAP-tag蛋白的表达、纯化与表征 | 第19-27页 |
| 1. 材料 | 第19-21页 |
| 1.1 主要试剂 | 第19-20页 |
| 1.2 菌株和质粒 | 第20页 |
| 1.3 实验仪器 | 第20页 |
| 1.4 溶液配制 | 第20-21页 |
| 2. 实验方法 | 第21-25页 |
| 2.1 含有目的基因的pET-22b载体的构建 | 第21-23页 |
| 2.2 SNAP-tag蛋白的表达 | 第23页 |
| 2.3 SNAP-tag蛋白的纯化[42] | 第23-24页 |
| 2.4 SNAP-tag蛋白的表征 | 第24-25页 |
| 3. 实验结果 | 第25-27页 |
| 3.1 含有目的基因的pET-22b载体的构建 | 第25-26页 |
| 3.2 SNAP-tag蛋白的表达、纯化和表征 | 第26-27页 |
| 4. 讨论 | 第27页 |
| 第三部分 SNAP-tag蛋白的体外标记与光谱测定 | 第27-36页 |
| 1. 材料 | 第27-28页 |
| 1.1 主要试剂 | 第27页 |
| 1.2 实验仪器 | 第27-28页 |
| 2. 实验方法 | 第28-29页 |
| 2.1 BGAN-R与SNAP-tag蛋白标记前后荧光光谱测定 | 第28页 |
| 2.2 荧光探针BGAN-R的溶剂化效应及量子产率测定 | 第28页 |
| 2.3 由BGAN-R标记的SNAP-tag蛋白的SDS-PAGE分析 | 第28-29页 |
| 2.4 BGAN-R标记的SNAP-tag蛋白的动力学研究 | 第29页 |
| 3. 实验结果 | 第29-36页 |
| 3.1 BGAN-R与SNAP-tag蛋白标记前后荧光光谱测定 | 第29-30页 |
| 3.2 荧光探针BGAN-R的溶剂化效应及量子产率测定 | 第30-32页 |
| 3.3 由BGAN-R标记的SNAP-tag蛋白的SDS-PAGE分析 | 第32-34页 |
| 3.4 BGAN-R标记的SNAP-tag蛋白的动力学研究 | 第34-36页 |
| 4. 讨论 | 第36页 |
| 第四部分 荧光标记的SNAP-tag蛋白在生物学方面的应用 | 第36-41页 |
| 1. 材料 | 第36-37页 |
| 1.1 细胞 | 第36-37页 |
| 1.2 实验试剂 | 第37页 |
| 1.3 实验仪器 | 第37页 |
| 2. 实验方法 | 第37-39页 |
| 2.1 MTT法测定细胞活力 | 第37-38页 |
| 2.2 细胞成像 | 第38-39页 |
| 3. 实验结果 | 第39-41页 |
| 3.1 MTT法测定细胞活力 | 第39页 |
| 3.2 细胞成像 | 第39-41页 |
| 4. 讨论 | 第41页 |
| 第二章 光诱导电子转移型SNAP-tag探针与细胞内铜离子的检测 | 第41-52页 |
| 第一部分 荧光探针的合成 | 第41-43页 |
| 1. 材料 | 第41-42页 |
| 1.1 主要试剂 | 第41页 |
| 1.2 实验仪器 | 第41-42页 |
| 2. 实验方法 | 第42-43页 |
| 第二部分 SNAP-tag蛋白的表达、纯化与表征 | 第43页 |
| 第三部分 SNAP-tag蛋白的体外标记与光谱测定 | 第43-49页 |
| 1. 材料 | 第43-44页 |
| 1.1 主要试剂 | 第43-44页 |
| 1.2 实验仪器 | 第44页 |
| 2. 实验方法 | 第44-45页 |
| 2.1 BGAN-DPA与SNAP-tag蛋白标记前后荧光光谱测定 | 第44页 |
| 2.2 BGAN-DPA与SNAP-tag蛋白标记前后的量子产率测定 | 第44页 |
| 2.3 BGAN-DPA标记的SNAP-tag蛋白的动力学研究 | 第44-45页 |
| 2.4 由BGAN-DPA标记的SNAP-tag对金属离子及阴离子的检测 | 第45页 |
| 2.5 由BGAN-DPA标记的SNAP-tag的铜离子滴定实验 | 第45页 |
| 3. 实验结果 | 第45-49页 |
| 3.1 BGAN-DPA与SNAP-tag蛋白标记前后荧光光谱测定 | 第45-46页 |
| 3.2 BGAN-DPA与SNAP-tag蛋白标记前后的量子产率测定 | 第46页 |
| 3.3 BGAN-DPA标记的SNAP-tag蛋白的动力学研究 | 第46-47页 |
| 3.4 由BGAN-DPA标记的SNAP-tag对金属离子及阴离子的检测 | 第47-48页 |
| 3.5 由BGAN-DPA标记的SNAP-tag的铜离子滴定实验 | 第48-49页 |
| 4. 讨论 | 第49页 |
| 第四部分 荧光标记的SNAP-tag蛋白在生物学方面的应用 | 第49-52页 |
| 1. 材料 | 第49页 |
| 2. 实验方法 | 第49-50页 |
| 2.1 MTT法测定细胞活力 | 第49页 |
| 2.2 细胞成像 | 第49-50页 |
| 3. 实验结果 | 第50-51页 |
| 3.1 MTT法测定细胞活力 | 第50页 |
| 3.2 细胞实验 | 第50-51页 |
| 4. 讨论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 综述 SNAP-tag荧光探针用于免洗蛋白标记的研究进展 | 第57-70页 |
| 参考文献 | 第66-70页 |
| 附录（化合物的核磁谱图） | 第70-75页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
