摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
序言 | 第11-15页 |
第一章 黄芪甲苷促进糖尿病伤口愈合的作用研究 | 第15-30页 |
1.1 前言 | 第15页 |
1.2 实验材料 | 第15-18页 |
1.2.1 主要实验动物 | 第15页 |
1.2.2 主要试剂 | 第15-16页 |
1.2.3 主要仪器设备 | 第16-17页 |
1.2.4 主要溶液配制方法 | 第17-18页 |
1.3 实验方法 | 第18-23页 |
1.3.1 糖尿病小鼠模型的构建 | 第18页 |
1.3.2 糖尿病小鼠难愈性伤口制作和给药 | 第18页 |
1.3.3 伤口组织病理切片制作 | 第18-19页 |
1.3.4 组织切片脱蜡 | 第19页 |
1.3.5 HE染色 | 第19页 |
1.3.6 MASSON染色 | 第19-20页 |
1.3.7 免疫荧光染色(IF) | 第20页 |
1.3.8 PCR检测伤口组织修复相关基因的表达情况 | 第20-23页 |
1.3.9 统计分析 | 第23页 |
1.4 实验结果 | 第23-29页 |
1.4.1 AS-IV促进糖尿病小鼠难愈性伤口愈合 | 第23-24页 |
1.4.2 AS-IV调节皮肤组织的重塑 | 第24-25页 |
1.4.3 AS-IV促进伤口组织ECM的沉积 | 第25-26页 |
1.4.4 AS-IV有助于新生血管的形成 | 第26-27页 |
1.4.5 AS-IV有助于替代性激活的巨噬细胞的产生 | 第27-28页 |
1.4.6 AS-IV促进伤口组织IL-13的表达 | 第28-29页 |
1.5 讨论 | 第29-30页 |
第二章 黄芪甲苷对成纤维细胞(NIH3T3)功能的影响 | 第30-41页 |
2.1 前言 | 第30页 |
2.2 实验材料 | 第30-31页 |
2.2.1 主要实验材料 | 第30页 |
2.2.2 主要试剂 | 第30-31页 |
2.2.3 主要仪器设备 | 第31页 |
2.2.4 主要溶液配制方法 | 第31页 |
2.3 实验方法 | 第31-36页 |
2.3.1 MTT法 | 第31-32页 |
2.3.2 PCR检测基因的表达情况 | 第32页 |
2.3.3 划痕实验 | 第32-33页 |
2.3.4 趋化实验 | 第33-34页 |
2.3.5 细胞免疫荧光 | 第34页 |
2.3.6 BRDU掺入法 | 第34-35页 |
2.3.7 KI67检测法 | 第35-36页 |
2.4 实验结果 | 第36-40页 |
2.4.1 AS-IV促进NIH3T3细胞增殖 | 第36-37页 |
2.4.2 AS-IV促进NIH3T3细胞的迁移 | 第37页 |
2.4.3 AS-IV促进NIH3T3细胞ECM相关基因的产生 | 第37-38页 |
2.4.4 AS-IV促进NIH3T3细胞α-SMA表达 | 第38-39页 |
2.4.5 AS-IV促进NIH3T3细胞划痕创伤愈合 | 第39-40页 |
2.5 讨论 | 第40-41页 |
第三章 黄芪甲苷对小鼠骨髓来源巨噬细胞极化的影响 | 第41-49页 |
3.1 前言 | 第41页 |
3.2 材料和方法 | 第41-42页 |
3.2.1 主要实验动物 | 第41页 |
3.2.2 主要试剂 | 第41-42页 |
3.2.3 主要仪器设备 | 第42页 |
3.2.4 主要溶液配制方法 | 第42页 |
3.3 实验方法 | 第42-44页 |
3.3.1 小鼠骨髓来源原代巨噬细胞培养 | 第42页 |
3.3.2 巨噬细胞极化实验 | 第42-43页 |
3.3.3 流式测定巨噬细胞表面标志 | 第43页 |
3.3.4 PCR检测相关基因的表达情况 | 第43页 |
3.3.5 ELISA检测相关细胞因子表达情况 | 第43-44页 |
3.4 实验结果 | 第44-48页 |
3.4.1 小鼠骨髓来源原代巨噬细胞培养结果 | 第44-45页 |
3.4.2 AS-IV与IL-13联用对巨噬细胞细胞形态学的影响 | 第45页 |
3.4.3 巨噬细胞极化后表面标志的表达情况 | 第45-46页 |
3.4.4 巨噬细胞极化后基因的表达情况 | 第46-47页 |
3.4.5 巨噬细胞极化后细胞因子的表达情况 | 第47-48页 |
3.5 讨论 | 第48-49页 |
第四章 巨噬细胞极化对NIH3T3细胞功能的影响 | 第49-59页 |
4.1 前言 | 第49页 |
4.2 实验材料 | 第49-51页 |
4.2.1 主要实验材料 | 第49页 |
4.2.2 主要试剂 | 第49-50页 |
4.2.3 主要仪器设备 | 第50页 |
4.2.4 主要溶液配制方法 | 第50-51页 |
4.3 实验方法 | 第51页 |
4.3.1 流式测胞内蛋白表达 | 第51页 |
4.4 实验结果 | 第51-58页 |
4.4.1 CM M2 Mφ促进NIH3T3细胞增殖 | 第51-52页 |
4.4.2 CM M2 Mφ促进NIH3T3细胞的迁移 | 第52-53页 |
4.4.3 CM M2 Mφ促进NIH3T3细胞ECM相关基因产生 | 第53-54页 |
4.4.4 CM M2 Mφ促进NIH3T3细胞α-SMA表达 | 第54-55页 |
4.4.5 CM M2 Mφ促进NIH3T3细胞划痕创伤愈合 | 第55-56页 |
4.4.6 CM M2 Mφ促进Hacat细胞划痕创伤愈合 | 第56页 |
4.4.7 初步研究巨噬细胞极化对NIH3T3作用机制 | 第56-58页 |
4.4.7.1 AS-IV+IL13Mφ高表达TGF-β | 第57页 |
4.4.7.2 TGF-β受体抑制剂降低CM M2 Mφ的作用效果 | 第57-58页 |
4.5 讨论 | 第58-59页 |
全文总结 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-67页 |
附录1 英文缩写语中文对照 | 第67-69页 |
附录2 攻读学位期间发表的论文 | 第69-70页 |
致谢 | 第70页 |