| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6页 |
| 引言 | 第9-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-23页 |
| 1.1 得克隆的相关研究 | 第10-13页 |
| 1.1.1 得克隆的理化性质 | 第10-11页 |
| 1.1.2 得克隆的研究进展 | 第11-13页 |
| 1.1.3 本课题组关于DP毒性效应的研究 | 第13页 |
| 1.2 环境雌激素效应的相关研究 | 第13-22页 |
| 1.2.1 环境雌激素简介 | 第13-14页 |
| 1.2.2 环境雌激素特点 | 第14-15页 |
| 1.2.3 环境雌激素生物学效应 | 第15-17页 |
| 1.2.4 环境雌激素作用的分子机制 | 第17-21页 |
| 1.2.5 环境雌激素的筛选及其检测方法 | 第21-22页 |
| 1.3 本课题的目的及意义 | 第22-23页 |
| 第2章 材料与方法 | 第23-41页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第23页 |
| 2.1.2 得克隆 | 第23页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-40页 |
| 2.2.1 常用试剂 | 第24-26页 |
| 2.2.2 MCF-7细胞复苏、传代、冻存 | 第26-28页 |
| 2.2.3 不同剂量DP暴露对MCF-7细胞增殖的影响 | 第28-29页 |
| 2.2.4 DP及拮抗剂ICI182780对MCF-7细胞增殖的时间-及剂量-效应 | 第29页 |
| 2.2.5 DP暴露对MCF-7细胞周期的影响 | 第29-30页 |
| 2.2.6 目的基因的实时荧光定量PCR检测 | 第30-35页 |
| 2.2.7 ERα和AhR的Western blot检测 | 第35-40页 |
| 2.3 技术路线 | 第40-41页 |
| 第3章 结果与讨论 | 第41-61页 |
| 3.1 DP暴露对MCF-7细胞生物学效应研究 | 第41-46页 |
| 3.1.1 不同剂量DP暴露对MCF-7细胞增殖影响 | 第41-42页 |
| 3.1.2 DP及拮抗剂ICI182780对MCF-7细胞增殖的时间-及剂量-效应 | 第42-45页 |
| 3.1.3 DP暴露对MCF-7细胞周期的影响 | 第45-46页 |
| 3.2 DP类雌激素作用机制的研究 | 第46-61页 |
| 3.2.1 RNA提取、反转录及质量验证 | 第46-50页 |
| 3.2.2 实时荧光定量PCR检测体系的优化 | 第50-52页 |
| 3.2.3 DP暴露MCF-7细胞总蛋白的浓度测定及条件优化 | 第52页 |
| 3.2.4 DP暴露对MCF-7细胞ER及ER介导的基因组途径研究 | 第52-56页 |
| 3.2.5 DP暴露对MCF-7细胞AhR及AhR介导的基因组途径研究 | 第56-58页 |
| 3.2.6 DP类雌激素作用非基因组途径研究 | 第58-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 附录A DP暴露对MCF-7细胞周期的影响 | 第70-75页 |
| 附录B DP暴露及拮抗剂ICI182780对MCF-7细胞的影响 | 第75-77页 |
| 攻读学位期间公开发表论文 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 作者简介 | 第79页 |
