摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
第一章 前言 | 第9-27页 |
1.1 假单胞菌的分类与用途 | 第9-13页 |
1.1.1 假单胞菌的分类与简介 | 第9页 |
1.1.2 假单胞菌的主要用途 | 第9-11页 |
1.1.3 假单胞菌的代谢产物及控制的基因 | 第11-13页 |
1.2 间苯三酚的主要用途及生产途径 | 第13-15页 |
1.2.1 间苯三酚的主要用途 | 第13-14页 |
1.2.2 间苯三酚的化学合成方法 | 第14-15页 |
1.2.3 间苯三酚的生物资源 | 第15页 |
1.3 产间苯三酚菌株的筛选 | 第15-19页 |
1.3.1 化学筛选 | 第15-16页 |
1.3.2 基因探针筛选 | 第16-19页 |
1.4 筛选后菌株的诱变育种 | 第19-22页 |
1.4.1 物理诱变育种 | 第19-20页 |
1.4.2 化学诱变育种 | 第20-21页 |
1.4.3 复合诱变育种 | 第21-22页 |
1.5 产间苯三酚菌株的培养优化与调控 | 第22-24页 |
1.5.1 间苯三酚在假单胞菌中的生物合成机制 | 第22-23页 |
1.5.2 代谢调节 | 第23-24页 |
1.6 本研究课题来源、立题依据、研究内容 | 第24-27页 |
1.6.1 课题来源 | 第24页 |
1.6.2 立题依据 | 第24-25页 |
1.6.3 研究内容 | 第25-27页 |
第二章 海洋生境假单胞菌的分离与化学初筛 | 第27-35页 |
2.1 材料与方法 | 第27-30页 |
2.1.1 样品来源 | 第27页 |
2.1.2 培养基 | 第27-28页 |
2.1.3 主要仪器与试剂 | 第28-29页 |
2.1.4 菌株的分离 | 第29页 |
2.1.5 分离菌株发酵的培养 | 第29页 |
2.1.6 发酵液的乙酸乙酯粗提物的制备 | 第29页 |
2.1.7 粗提物TLC板的检测 | 第29页 |
2.1.8 化学筛选菌株的HPLC检测条件 | 第29-30页 |
2.2 结果与分析 | 第30-34页 |
2.2.1 不同选择性培养基对假单胞菌的分离 | 第30-31页 |
2.2.2 不同假单胞菌的TLC检测结果 | 第31-32页 |
2.2.3 产间苯三酚假单胞菌的HPLC检测验证 | 第32-34页 |
2.3 结论与讨论 | 第34-35页 |
第三章 产间苯三酚海洋生境假单胞菌的基因筛选与鉴定 | 第35-45页 |
3.1 材料与方法 | 第35-39页 |
3.1.1 菌株与主要试剂的配制 | 第35-36页 |
3.1.2 主要仪器与设备 | 第36页 |
3.1.3 检测产间苯三酚类化合物的菌株的引物设计 | 第36-37页 |
3.1.4 各引物PCR反应程序的设定 | 第37页 |
3.1.5 基因筛选菌株的HPLC验证 | 第37-38页 |
3.1.6 菌株总DNA的提取 | 第38页 |
3.1.7 菌株 16SrRNA基因的PCR扩增 | 第38页 |
3.1.8 目的片段的胶回收 | 第38-39页 |
3.2 结果与分析 | 第39-44页 |
3.2.1 基因筛选结果 | 第39-42页 |
3.2.2 基因探针筛选菌株的HPLC检验 | 第42-44页 |
3.3 结论与讨论 | 第44-45页 |
第四章 产间苯三酚菌株的诱变育种与代谢调节 | 第45-57页 |
4.1 材料与方法 | 第45-48页 |
4.1.1 菌株与培养基 | 第45-46页 |
4.1.2 主要仪器与试剂 | 第46页 |
4.1.3 紫外诱变操作 | 第46页 |
4.1.4 紫外微波复合诱变 | 第46-47页 |
4.1.5 间苯三酚的含量检测 | 第47页 |
4.1.6 突变株的稳定性测试 | 第47页 |
4.1.7 培养基优化 | 第47页 |
4.1.8 突变株YLM96-01间苯三酚产量曲线的测定 | 第47-48页 |
4.1.9 突变株YLM96-01的代谢调节 | 第48页 |
4.2 结果与分析 | 第48-55页 |
4.2.1 紫外诱变时间的确定 | 第48页 |
4.2.2 紫外微波复合诱变 | 第48-49页 |
4.2.3 间苯三酚标准曲线的绘制 | 第49-50页 |
4.2.4 突变株YLM96-01的稳定性测试 | 第50页 |
4.2.5 培养基优化正交实验 | 第50-51页 |
4.2.6 突变株生长与间苯三酚产量曲线 | 第51-53页 |
4.2.7 添加诱导物柠檬酸对间苯三酚产量的影响 | 第53-54页 |
4.2.8 不同时间添加乙醇对间苯三酚产量的影响 | 第54-55页 |
4.3 结论与讨论 | 第55-57页 |
总结 | 第57-59页 |
1 本研究的主要研究成果 | 第57页 |
2 本研究的主要创新点 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-65页 |
致谢 | 第65-67页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第67-69页 |