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白藜芦醇和总Caspase抑制剂对猪囊胚冷冻后凋亡和发育能力的影响

中文摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
第一章 引言第11-15页
第二章 玻璃化冷冻对猪孤雌激活囊胚中细胞凋亡的影响第15-31页
    1. 材料第15-20页
        1.1 试剂和仪器第15-18页
        1.2 溶液配制第18-20页
    2. 方法第20-23页
        2.1 卵母细胞的采集和体外成熟第20页
        2.2 卵母细胞的孤雌激活和体外培养第20页
        2.3 囊胚的玻璃化冷冻和解冻第20-21页
        2.4 线粒体膜电位(ΔΨm)的JC-1 检测第21页
        2.5 TUNEL凋亡染色第21页
        2.6 Caspase染色第21-22页
        2.7 凋亡相关基因的表达检测第22-23页
        2.8 数据分析第23页
    3. 结果第23-28页
        3.1 冷冻对猪孤雌激活囊胚体外发育的影响第23-24页
        3.2 冷冻对猪孤雌激活囊胚线粒体功能和凋亡水平的影响第24-26页
        3.3 冷冻对猪孤雌激活囊胚多种Caspase活性的影响第26-27页
        3.4 冷冻对猪孤雌激活囊胚不同凋亡途径中相关功能基因表达的影响第27-28页
    4. 讨论第28-31页
第三章 白藜芦醇(RES)处理对猪孤雌激活囊胚抗冻能力的影响第31-41页
    1. 材料第31-32页
        1.1 试剂和仪器第31-32页
    2. 方法第32页
        2.1 卵母细胞的采集和体外成熟第32页
        2.2 卵母细胞的孤雌激活和体外培养第32页
        2.3 囊胚的玻璃化冷冻和解冻第32页
        2.4 线粒体膜电位(ΔΨm)的JC-1 检测第32页
        2.5 TUNEL凋亡染色第32页
        2.6 Caspase染色第32页
        2.7 凋亡相关基因的表达检测第32页
        2.8 数据分析第32页
    3. 结果第32-37页
        3.1 RES添加对猪卵母细胞孤雌激活胚胎体外发育能力的影响第32-33页
        3.2 RES添加对猪孤雌激活囊胚冻后存活与发育的影响第33-34页
        3.3 RES添加对猪孤雌激活囊胚冻后线粒体功能和凋亡水平的影响第34-35页
        3.4 RES添加对冷冻后猪孤雌激活囊胚Pan-Caspase、Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3 活性的影响第35-37页
        3.5 RES添加对猪孤雌激活囊胚冻后基因表达的影响第37页
    4. 讨论第37-41页
第四章 Z-VAD-FMK对冷冻解冻后的猪孤雌激活囊胚发育和凋亡水平的影响第41-49页
    1. 材料第41-42页
        1.1 试剂和仪器第41页
            1.1.1 主要试剂第41页
            1.1.2 设备与耗材第41页
        1.2 溶液配制第41-42页
    2. 方法第42页
        2.1 卵母细胞的采集和体外成熟第42页
        2.2 卵母细胞的孤雌激活和体外培养第42页
        2.3 囊胚的玻璃化冷冻和解冻第42页
        2.4 线粒体膜电位(ΔΨm)的JC-1 检测第42页
        2.5 TUNEL凋亡染色第42页
        2.6 Caspase染色第42页
        2.7 凋亡相关基因的表达检测第42页
        2.8 数据分析第42页
    3. 结果第42-47页
        3.1 Z-VAD-FMK添加对猪孤雌激活囊胚冻后存活与发育的影响第42-43页
        3.2 Z-VAD-FMK添加对猪孤雌激活囊胚冻后线粒体功能和凋亡水平的影响第43-44页
        3.5 Z-VAD-FMK添加对冻后猪孤雌激活囊胚Pan-Caspase、Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3 活力的影响第44-46页
        3.6 冻后Z-VAD-FMK添加对猪孤雌激活囊胚冻后基因表达的影响第46-47页
    4. 讨论第47-49页
全文总结第49-50页
参考文献第50-56页
附录第56-57页
硕士期间主要科研成果第57-58页
致谢第58页

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