| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 引言 | 第13-24页 |
| 1 甲状腺激素受体研究概述 | 第13-17页 |
| 2 Drosha研究概述 | 第17-22页 |
| 3 研究目的及意义 | 第22-24页 |
| 第一章 甲状腺激素受体与Drosha两者之间关系分析 | 第24-44页 |
| 1.1 实验材料与试剂 | 第24-25页 |
| 1.1.1 实验材料 | 第24页 |
| 1.1.2 实验试剂 | 第24-25页 |
| 1.2 实验仪器 | 第25-26页 |
| 1.3 实验方法 | 第26-30页 |
| 1.3.1 总蛋白提取 | 第26页 |
| 1.3.2 蛋白含量的测定 | 第26页 |
| 1.3.3 免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP） | 第26-27页 |
| 1.3.4 Western blot检测Co-IP复合物 | 第27-28页 |
| 1.3.5 质谱检测 | 第28-30页 |
| 1.4 实验结果 | 第30-42页 |
| 1.4.1 Western blot检测Co-IP复合物 | 第30-31页 |
| 1.4.2 质谱分析结果 | 第31-42页 |
| 1.5 讨论 | 第42-44页 |
| 第二章 甲状腺激素受体过表达或沉默对microRNA表达的分析 | 第44-67页 |
| 2.1 实验试剂及仪器 | 第44-46页 |
| 2.1.1 实验试剂 | 第44-45页 |
| 2.1.2 实验设备 | 第45-46页 |
| 2.2 实验方法 | 第46-55页 |
| 2.2.1 引物和siRNA靶点的选择、设计及合成 | 第46-47页 |
| 2.2.2 THRα和THRβ基因的CDS区扩增 | 第47-51页 |
| 2.2.3 THRα/β真核表达载体及siRNA的转染及观察 | 第51-52页 |
| 2.2.4 Western blot检测蛋白的表达 | 第52页 |
| 2.2.5 实时荧光定量RT-PCR检测THRα/β基因和Drosha基因的表达 | 第52-54页 |
| 2.2.6 THRα/β-siRNA和Drosha-siRNA最佳作用时间、浓度的筛选 | 第54-55页 |
| 2.2.7 RT-PCR检测pre-miRNA的表达 | 第55页 |
| 2.2.8 免疫细胞荧光分析 | 第55页 |
| 2.3 结果 | 第55-65页 |
| 2.3.1 甲状腺激素受体的细胞定位 | 第55-56页 |
| 2.3.2 THRα和THRβ基因真核表达载体的构建 | 第56-57页 |
| 2.3.3 THRα/β真核表达载体检测 | 第57-59页 |
| 2.3.4 siRNA效率检测及筛选 | 第59-62页 |
| 2.3.5 THRα/β和Drosha对pre-miRNA表达的影响 | 第62-65页 |
| 2.4 讨论 | 第65-67页 |
| 小结 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 发表文章 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
