中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略语/符号说明 | 第11-13页 |
前言 | 第13-19页 |
研究现状、成果 | 第13-17页 |
研究目的、方法 | 第17-19页 |
对象和方法 | 第19-37页 |
1. 实验材料 | 第19-24页 |
1.1 实验动物 | 第19页 |
1.2 主要仪器和耗材 | 第19-20页 |
1.3 主要试剂及药品 | 第20-22页 |
1.4 主要液体及其配置 | 第22-24页 |
2. 实验方法 | 第24-37页 |
2.1 大鼠骨髓源性EPCs的分离提取及鉴定 | 第24-26页 |
2.1.1 标本采集 | 第24页 |
2.1.2 Ficoil密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞 | 第24页 |
2.1.3 骨髓单个核细胞的培养 | 第24-25页 |
2.1.4 鉴定 | 第25-26页 |
2.2 大鼠骨髓源性EPCs的分化特征 | 第26页 |
2.2.1 细胞形态学改变 | 第26页 |
2.2.2 流式技术检测EPCs分化过程中表型改变 | 第26页 |
2.2.3 eNOS免疫荧光染色 | 第26页 |
2.3 ZFP580在定向诱导EPCs分化过程中的表达 | 第26-30页 |
2.3.1 实时定量PCR检测 | 第26-28页 |
2.3.2 免疫蛋白印迹 | 第28-30页 |
2.4 ZFP580在EPCs分化过程中的作用 | 第30-32页 |
2.4.1 病毒转染EPCs | 第30-31页 |
2.4.2 QPCR及Western blot检测EPCs分化过程中表型改变 | 第31页 |
2.4.3 流式技术检测EPCs分化过程中表型改变 | 第31-32页 |
2.4.4 体外血管新生实验 | 第32页 |
2.5 ZFP580通过eNOS/NO信号通路调控EPCs分化过程 | 第32-33页 |
2.5.1 病毒转染EPCs | 第32页 |
2.5.2 QPCR和Western blot检测eNOS mRNA和蛋白水平的表达 | 第32页 |
2.5.3 培养液NO含量检测 | 第32页 |
2.5.4 体外血管新生实验 | 第32-33页 |
2.6 ZFP580促进EPCs体内血管形成 | 第33-35页 |
2.6.1 大鼠骨髓源性EPCs的分离提取 | 第33页 |
2.6.2 病毒转染EPCs | 第33页 |
2.6.3 动物模型建立及取材 | 第33-34页 |
2.6.4 H&E染色 | 第34页 |
2.6.5 免疫组化 | 第34-35页 |
2.7 统计学方法 | 第35-37页 |
结果 | 第37-56页 |
1. 大鼠骨髓源性EPCs的鉴定 | 第37页 |
1.1 免疫荧光双染鉴定 | 第37页 |
1.2 VEGFR-2 及CD31免疫荧光染色鉴定 | 第37页 |
1.3 流式技术检测CD34及VEGFR-2 鉴定 | 第37页 |
2. 大鼠骨髓源性EPCs分化过程中的特征 | 第37-38页 |
2.1 细胞形态学改变 | 第37页 |
2.2 EPCs分化过程中表面标志物的动态改变 | 第37-38页 |
2.3 eNOS表达的动态改变 | 第38页 |
3. ZFP580在EPCs定向诱导分化中的表达 | 第38页 |
3.1 ZFP580 mRNA在EPCs分化过程中的表达 | 第38页 |
3.2 ZFP580蛋白在EPCs分化过程中的表达 | 第38页 |
4. ZFP580在EPCs分化过程中的作用 | 第38-40页 |
4.1 Ad-ZFP580转染EPCs可促进EPCs-ECs的分化 | 第38-39页 |
4.1.1 转染结果鉴定 | 第38页 |
4.1.2 成熟内皮表型的改变 | 第38-39页 |
4.1.3 流式检测结果 | 第39页 |
4.1.4 体外血管生成实验结果 | 第39页 |
4.2 Ad-si ZFP580转染EPCs降低EPCs-ECs的分化 | 第39-40页 |
4.2.1 转染结果鉴定 | 第39页 |
4.2.2 成熟内皮表型的改变 | 第39页 |
4.2.3 流式检测结果 | 第39-40页 |
4.2.4 体外血管生成实验结果 | 第40页 |
5. ZFP580通过eNOS/NO信号通路调控EPCs分化 | 第40-41页 |
5.1 转染Ad-ZFP580以及Ad-si ZFP580对eNOS mRNA和蛋白表达的影响 | 第40页 |
5.2 L-NAME对ZFP580调控EPCs-ECs分化的影响 | 第40-41页 |
5.2.1 成熟内皮表型的改变 | 第40页 |
5.2.2 体外血管生成实验结果 | 第40-41页 |
5.2.3 培养液NO含量测定结果 | 第41页 |
6. ZFP580促进EPCs体内血管形成能力 | 第41-42页 |
结果图片 | 第42-56页 |
讨论 | 第56-59页 |
结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-65页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第65-66页 |
综述 内皮祖细胞促进再内皮化及防止再狭窄的研究进展 | 第66-75页 |
综述参考文献 | 第71-75页 |
致谢 | 第75页 |