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ZFP580调控eNOS/NO信号通路促进EPCs分化的分子机制研究

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
缩略语/符号说明第11-13页
前言第13-19页
    研究现状、成果第13-17页
    研究目的、方法第17-19页
对象和方法第19-37页
    1. 实验材料第19-24页
        1.1 实验动物第19页
        1.2 主要仪器和耗材第19-20页
        1.3 主要试剂及药品第20-22页
        1.4 主要液体及其配置第22-24页
    2. 实验方法第24-37页
        2.1 大鼠骨髓源性EPCs的分离提取及鉴定第24-26页
            2.1.1 标本采集第24页
            2.1.2 Ficoil密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞第24页
            2.1.3 骨髓单个核细胞的培养第24-25页
            2.1.4 鉴定第25-26页
        2.2 大鼠骨髓源性EPCs的分化特征第26页
            2.2.1 细胞形态学改变第26页
            2.2.2 流式技术检测EPCs分化过程中表型改变第26页
            2.2.3 eNOS免疫荧光染色第26页
        2.3 ZFP580在定向诱导EPCs分化过程中的表达第26-30页
            2.3.1 实时定量PCR检测第26-28页
            2.3.2 免疫蛋白印迹第28-30页
        2.4 ZFP580在EPCs分化过程中的作用第30-32页
            2.4.1 病毒转染EPCs第30-31页
            2.4.2 QPCR及Western blot检测EPCs分化过程中表型改变第31页
            2.4.3 流式技术检测EPCs分化过程中表型改变第31-32页
            2.4.4 体外血管新生实验第32页
        2.5 ZFP580通过eNOS/NO信号通路调控EPCs分化过程第32-33页
            2.5.1 病毒转染EPCs第32页
            2.5.2 QPCR和Western blot检测eNOS mRNA和蛋白水平的表达第32页
            2.5.3 培养液NO含量检测第32页
            2.5.4 体外血管新生实验第32-33页
        2.6 ZFP580促进EPCs体内血管形成第33-35页
            2.6.1 大鼠骨髓源性EPCs的分离提取第33页
            2.6.2 病毒转染EPCs第33页
            2.6.3 动物模型建立及取材第33-34页
            2.6.4 H&E染色第34页
            2.6.5 免疫组化第34-35页
        2.7 统计学方法第35-37页
结果第37-56页
    1. 大鼠骨髓源性EPCs的鉴定第37页
        1.1 免疫荧光双染鉴定第37页
        1.2 VEGFR-2 及CD31免疫荧光染色鉴定第37页
        1.3 流式技术检测CD34及VEGFR-2 鉴定第37页
    2. 大鼠骨髓源性EPCs分化过程中的特征第37-38页
        2.1 细胞形态学改变第37页
        2.2 EPCs分化过程中表面标志物的动态改变第37-38页
        2.3 eNOS表达的动态改变第38页
    3. ZFP580在EPCs定向诱导分化中的表达第38页
        3.1 ZFP580 mRNA在EPCs分化过程中的表达第38页
        3.2 ZFP580蛋白在EPCs分化过程中的表达第38页
    4. ZFP580在EPCs分化过程中的作用第38-40页
        4.1 Ad-ZFP580转染EPCs可促进EPCs-ECs的分化第38-39页
            4.1.1 转染结果鉴定第38页
            4.1.2 成熟内皮表型的改变第38-39页
            4.1.3 流式检测结果第39页
            4.1.4 体外血管生成实验结果第39页
        4.2 Ad-si ZFP580转染EPCs降低EPCs-ECs的分化第39-40页
            4.2.1 转染结果鉴定第39页
            4.2.2 成熟内皮表型的改变第39页
            4.2.3 流式检测结果第39-40页
            4.2.4 体外血管生成实验结果第40页
    5. ZFP580通过eNOS/NO信号通路调控EPCs分化第40-41页
        5.1 转染Ad-ZFP580以及Ad-si ZFP580对eNOS mRNA和蛋白表达的影响第40页
        5.2 L-NAME对ZFP580调控EPCs-ECs分化的影响第40-41页
            5.2.1 成熟内皮表型的改变第40页
            5.2.2 体外血管生成实验结果第40-41页
            5.2.3 培养液NO含量测定结果第41页
    6. ZFP580促进EPCs体内血管形成能力第41-42页
    结果图片第42-56页
讨论第56-59页
结论第59-60页
参考文献第60-65页
发表论文和参加科研情况说明第65-66页
综述 内皮祖细胞促进再内皮化及防止再狭窄的研究进展第66-75页
    综述参考文献第71-75页
致谢第75页

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