| 摘要 | 第6-7页 |
| 英文摘要 | 第7页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-16页 |
| 1.1 小麦条锈病及小麦条锈菌 | 第10-11页 |
| 1.1.1 小麦条锈病的危害 | 第10页 |
| 1.1.2 小麦条锈病的研究现状 | 第10-11页 |
| 1.2 MADS box转录因子的研究进展 | 第11-13页 |
| 1.3 基因沉默技术 | 第13-14页 |
| 1.4 实验目的及意义和研究方法 | 第14-16页 |
| 1.4.1 研究目的及意义 | 第14页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第14-15页 |
| 1.4.3 技术路线 | 第15-16页 |
| 第二章 小麦条锈菌PsMcm1基因的克隆与功能分析 | 第16-48页 |
| 2.1 实验材料 | 第16页 |
| 2.1.1 材料 | 第16页 |
| 2.1.2 试剂及仪器 | 第16页 |
| 2.2 实验方法 | 第16-35页 |
| 2.2.1 实验材料准备 | 第16-17页 |
| 2.2.2 小麦条锈菌总RNA的提取及纯化 | 第17-18页 |
| 2.2.2.1 用Biozol法提取RNA | 第17页 |
| 2.2.2.2 纯化RNA | 第17-18页 |
| 2.2.3 反转录cDNA第一链的合成 | 第18页 |
| 2.2.4 大肠杆菌JM109超级感受态细胞制备 | 第18-19页 |
| 2.2.5 小麦条锈菌MADS box转录因子PsMcm1基因的克隆 | 第19-22页 |
| 2.2.6 序列的生物信息学分析 | 第22页 |
| 2.2.7 Real-time PCR分析表达趋势 | 第22-23页 |
| 2.2.8 酵母双杂交分析 | 第23-24页 |
| 2.2.8.1 酵母双杂交载体的构建 | 第23页 |
| 2.2.8.2 酵母转化及蛋白互作分析 | 第23-24页 |
| 2.2.9 PsMcm1和PsSte12在小麦中的定位试验 | 第24-25页 |
| 2.2.9.1 引物设计 | 第24页 |
| 2.2.9.2 小麦原生质体定位载体的构建 | 第24页 |
| 2.2.9.3 小麦原生质体的制备 | 第24-25页 |
| 2.2.9.4 小麦原生质体的转化 | 第25页 |
| 2.2.10 互补稻瘟菌突变体Mgmcm1试验 | 第25-30页 |
| 2.2.10.1 引物设计 | 第25-26页 |
| 2.2.10.2 共转化插入DNA和载体的制备 | 第26-28页 |
| 2.2.10.3 稻瘟菌原生质体制备 | 第28页 |
| 2.2.10.4 稻瘟菌原生质体转化 | 第28-29页 |
| 2.2.10.5 瘟菌互补转化子的鉴定 | 第29页 |
| 2.2.10.6 稻瘟菌附着孢形成实验 | 第29-30页 |
| 2.2.10.7 大麦接种试验 | 第30页 |
| 2.2.11 酵母突变体Scmcm1和Scste12的互补试验 | 第30-32页 |
| 2.2.11.1 引物设计 | 第30页 |
| 2.2.11.2 互补载体的构建 | 第30页 |
| 2.2.11.3 酵母的感受态制备及转化 | 第30-31页 |
| 2.2.11.4 酵母子囊孢子的培养和观察 | 第31-32页 |
| 2.2.12 BSMV-HIGS介导的PsMcm1和PsSte12基因沉默 | 第32-35页 |
| 2.3 结果与分析 | 第35-46页 |
| 2.3.1 条锈菌总RNA的提取 | 第35页 |
| 2.3.2 PsMcm1基因的克隆 | 第35页 |
| 2.3.3 小麦条锈菌PsMcm1基因的序列分析 | 第35-36页 |
| 2.3.4 PsMCM1序列系统发育树构建 | 第36-37页 |
| 2.3.5 PsMcm1基因的实时定量PCR分析 | 第37页 |
| 2.3.6 小麦条锈菌PsMcm1蛋白与PsSte12蛋白的互作分析 | 第37-38页 |
| 2.3.7 PsMcm1和PsSte12在小麦原生质体中的定位试验 | 第38-39页 |
| 2.3.8 互补稻瘟菌突变体Momcm1 | 第39-41页 |
| 2.3.8.1 互补转化子的PCR检测 | 第39页 |
| 2.3.8.2 稻瘟菌附着孢形成实验 | 第39-40页 |
| 2.3.8.3 大麦接种试验 | 第40-41页 |
| 2.3.9 互补酵母突变体Scmcm1和Scste12试验 | 第41-42页 |
| 2.3.9.1 互补转化子的PCR检测 | 第41页 |
| 2.3.9.2 酵母子囊孢子的培养和观察 | 第41-42页 |
| 2.3.10 PsMcm1和PsSte12的基因沉默分析 | 第42-46页 |
| 2.4 结论与讨论 | 第46-48页 |
| 第三章 全文结论 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 作者简介 | 第56页 |
