摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第12-22页 |
引言 | 第12-13页 |
1.1 AMPK的结构与功能特点 | 第13-15页 |
1.2 AMPK在动物模型中的功能研究 | 第15页 |
1.3 AMPK对全身能量代谢及胰岛素敏感性的作用 | 第15-16页 |
1.4 AMPK在骨骼肌中的作用 | 第16-19页 |
1.5 AMPK与分泌因子的关系 | 第19-21页 |
1.6 总结 | 第21-22页 |
第二章 骨骼肌特异敲除AMPKΑ2 转基因小鼠的培育及鉴定 | 第22-29页 |
2.1 前言 | 第22页 |
2.2 实验材料 | 第22-23页 |
2.2.1 转基因小鼠 | 第22页 |
2.2.2 试剂 | 第22-23页 |
2.2.3 主要仪器设备 | 第23页 |
2.3 实验方法 | 第23-24页 |
2.3.1 引物设计 | 第23页 |
2.3.2 PCR扩增与鉴定 | 第23页 |
2.3.3 蛋白印记检测 | 第23-24页 |
2.4 实验结果 | 第24-27页 |
2.4.1 敲除小鼠的培育 | 第24页 |
2.4.2 PCR鉴定 | 第24-25页 |
2.4.4 蛋白印记鉴定 | 第25-27页 |
2.5 讨论 | 第27页 |
2.6 小结 | 第27-29页 |
第三章 小鼠骨骼肌特异敲除AMPKΑ2 对机体代谢指标的影响 | 第29-44页 |
3.1 前言 | 第29-30页 |
3.2 实验材料 | 第30页 |
3.2.1 试剂 | 第30页 |
3.2.2 仪器 | 第30页 |
3.3 实验方法 | 第30-31页 |
3.3.1 体重及饮食测定 | 第30页 |
3.3.2 胰岛素、葡萄糖耐受型测试 | 第30页 |
3.3.3 甘油三脂、游离脂肪酸的测定 | 第30页 |
3.3.4 代谢指标测定 | 第30-31页 |
3.3.5 数据分析 | 第31页 |
3.4 实验结果 | 第31-41页 |
3.4.1 体重与采食 | 第31-33页 |
3.4.2 各组织重 | 第33-34页 |
3.4.3 GTT和ITT | 第34-36页 |
3.4.4 组织甘油三脂含量测定 | 第36-38页 |
3.4.5 肌肉游离脂肪酸测定 | 第38-39页 |
3.4.6 肝/肌糖元测定 | 第39-40页 |
3.4.7 血液指标 | 第40页 |
3.4.8 毛发甘油三酯含量 | 第40-41页 |
3.5 讨论 | 第41-42页 |
3.6 小结 | 第42-44页 |
第四章 高脂饲喂后敲除小鼠肌肉中脂相关基因的表达变化 | 第44-48页 |
4.1 前言 | 第44页 |
4.2 实验材料 | 第44页 |
4.2.1 试剂 | 第44页 |
4.2.2 仪器 | 第44页 |
4.3 实验方法 | 第44-46页 |
4.3.1 样品制备 | 第44页 |
4.3.2 RNA的提取 | 第44-45页 |
4.3.3 合成cDNA | 第45页 |
4.3.4 RT-PCR测定 | 第45页 |
4.3.5 数据分析 | 第45-46页 |
4.4 实验结果 | 第46页 |
4.4.1 肌肉组织中脂代谢相关基因的表达 | 第46页 |
4.5 讨论 | 第46-47页 |
4.6 小结 | 第47-48页 |
第五章 高脂饲喂后敲除小鼠肌肉分泌因子的表达变化 | 第48-53页 |
5.1 前言 | 第48页 |
5.2 实验材料 | 第48页 |
5.2.1 试剂 | 第48页 |
5.2.2 仪器 | 第48页 |
5.3 实验方法 | 第48-49页 |
5.3.1 样品制备 | 第48页 |
5.3.2 mRNA检测 | 第48-49页 |
5.3.3 ELISA检测 | 第49页 |
5.3.4 数据分析 | 第49页 |
5.4 实验结果 | 第49-51页 |
5.4.1 肌肉中肌肉分泌因子的mRNA表达 | 第49-50页 |
5.4.2 IL-6 的分泌量测定 | 第50-51页 |
5.5 结论 | 第51-52页 |
5.6 小结 | 第52-53页 |
结论 | 第53-54页 |
创新之处 | 第54-55页 |
进一步研究内容 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
作者简介 | 第62页 |