| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Summary | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-19页 |
| 第二章 大鼠Neurod2基因的克隆、真核表达载体的构建及其在小鼠MSCs细胞中的表达 | 第19-34页 |
| 1 实验材料 | 第19-20页 |
| 1.1 实验试剂 | 第19-20页 |
| 1.2 实验动物 | 第20页 |
| 1.3 主要仪器 | 第20页 |
| 2 实验方法 | 第20-25页 |
| 2.1 引物设计与合成 | 第20-21页 |
| 2.2 Neurod2基因cDNA制备及PCR扩增 | 第21页 |
| 2.3 大鼠Neurod2基因的克隆 | 第21-22页 |
| 2.4 大鼠Neurod2基因的生物信息学分析 | 第22页 |
| 2.5 真核表达载体pIRES2-AcGFP1-ND2的构建 | 第22-23页 |
| 2.6 小鼠MSCs的培养及转染 | 第23页 |
| 2.7 Real-time PCR检测重组质粒在小鼠MSCs中的表达 | 第23-24页 |
| 2.8 重组质粒在小鼠MSCs中的蛋白表达 | 第24页 |
| 2.9 结果统计分析 | 第24-25页 |
| 3 实验结果 | 第25-32页 |
| 3.1 Neurod2基因的扩增 | 第25页 |
| 3.2 Neurod2基因的克隆 | 第25-26页 |
| 3.3 pIRES2-AcGFP1-ND2表达载体的构建 | 第26-27页 |
| 3.4 生物信息学分析 | 第27-30页 |
| 3.5 转染后MSCs中绿色荧光表达 | 第30-31页 |
| 3.6 Neurod2基因在小鼠MSC s中的表达 | 第31页 |
| 3.7 NeuroD2蛋白在小鼠MSCs中的表达 | 第31-32页 |
| 4 讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 hHsp70-ND2载体的构建及其在小鼠MSCs中的表达 | 第34-47页 |
| 1 实验材料 | 第34-35页 |
| 1.1 主要试剂 | 第34页 |
| 1.2 其他试剂 | 第34-35页 |
| 1.3 实验动物 | 第35页 |
| 1.4 主要仪器 | 第35页 |
| 2 实验方法 | 第35-38页 |
| 2.1 hHsp70-AcGFP1载体的构建 | 第35页 |
| 2.2 hHsp70-AcGFP1的转染 | 第35-36页 |
| 2.3 Neurod2基因热诱导型表达载体的构建 | 第36-37页 |
| 2.4 细胞转染及热诱导 | 第37页 |
| 2.5 Real-time PCR检测转染小鼠MSCs后的Neurod2基因表达 | 第37页 |
| 2.6 Westen blotting检测转染小鼠MSCs中NeuroD2蛋白的表达 | 第37-38页 |
| 2.7 免疫荧光检测 | 第38页 |
| 2.8 统计学处理 | 第38页 |
| 3 结果 | 第38-45页 |
| 3.1 hHsp70-AcGFP1载体的构建及表达 | 第38-39页 |
| 3.2 Neurod2基因的克隆及鉴定 | 第39-41页 |
| 3.3 重组质粒h Hsp70-ND2的鉴定 | 第41-42页 |
| 3.4 转染后不同时间热诱导AcGFP1蛋白表达 | 第42-43页 |
| 3.5 不同时间热诱导Neurod2 mRNA表达 | 第43页 |
| 3.6 不同热诱导时间Neuro D2蛋白表达量差异 | 第43-44页 |
| 3.7 细胞Neuro D2免疫荧光染色 | 第44-45页 |
| 4 讨论 | 第45-47页 |
| 第四章 Neurod2基因表达诱导小鼠MSCs的分化 | 第47-58页 |
| 1 实验材料 | 第47-48页 |
| 1.1 实验试剂 | 第47-48页 |
| 1.2 主要仪器 | 第48页 |
| 2 实验方法 | 第48-51页 |
| 2.1 hHsp70-ND2质粒扩增 | 第48-49页 |
| 2.2 hHsp70-ND2质粒提取 | 第49页 |
| 2.3 hHsp70-ND2质粒转染 | 第49页 |
| 2.4 转染细胞热诱导 | 第49-50页 |
| 2.5 Real-time PCR检测 | 第50页 |
| 2.6 Western blotting检测 | 第50-51页 |
| 2.7 免疫荧光检测 | 第51页 |
| 2.8 细胞爬片的HE染色 | 第51页 |
| 3 结果 | 第51-55页 |
| 3.1 热诱导结果 | 第51-52页 |
| 3.2 Real-time PCR结果 | 第52-53页 |
| 3.3 Western blotting结果 | 第53-54页 |
| 3.4 免疫荧光及HE染色结果 | 第54-55页 |
| 4 讨论 | 第55-58页 |
| 全文结论及展望 | 第58-59页 |
| 附录一 | 第59-62页 |
| 附录二 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 作者简介 | 第71-72页 |
| 导师简介 | 第72-73页 |
