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耐辐射奇球菌pprM与pprI基因修饰对真核293T细胞辐射抗性的影响

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
主要英文缩略词第9-13页
第1章 引言第13-19页
第2章 耐辐射奇球菌ppr M、ppr I基因在 293T细胞中的表达第19-41页
    2.1 实验材料及仪器第19-24页
        2.1.1 实验菌株、细胞及其培养条件第19-20页
        2.1.2 主要试剂第20-21页
        2.1.3 主要仪器第21-22页
        2.1.4 培养基及主要试剂的配制第22-24页
    2.2 实验方法第24-35页
        2.2.1 大肠杆菌JM109菌种复苏第24页
        2.2.2 质粒DNA的提取第24-25页
        2.2.3 DNA片段的回收和纯化第25-26页
        2.2.4 大肠杆菌感受态的制备第26页
        2.2.5 大肠杆菌感受态细胞的转化第26-27页
        2.2.6 p EGFP-C1-ppr M重组载体的构建第27-30页
        2.2.7 细胞的复苏培养、传代及冻存第30-31页
        2.2.8 无内毒素质粒提取试剂盒小提质粒第31-32页
        2.2.9 LipofectamineTM 2000 脂质体介导质粒转染细胞第32-33页
        2.2.10 Ppr M、Ppr I融合蛋白在 293T细胞中的共定位第33页
        2.2.11 Western Blot验证Ppr M、Ppr I融合蛋白表达第33-35页
    2.3 结果和分析第35-40页
        2.3.1 p EGFP-C1-ppr M重组载体的构建第35-37页
        2.3.2 ppr M、ppr I基因转染 293T细胞第37-39页
        2.3.3 Ppr M、Ppr I融合蛋白在 293T细胞中的共定位第39-40页
        2.3.4 Western blot验证Ppr M、Ppr I融合蛋白的表达第40页
    2.4 本章小结第40-41页
第3章 pprM与pprI基因修饰 293T细胞对其辐射抗性的影响第41-51页
    3.1 实验材料及仪器第41-43页
        3.1.1 实验菌株、细胞及其培养条件第41-42页
        3.1.2 主要试剂第42页
        3.1.3 主要仪器设备第42页
        3.1.4 培养基及主要试剂的配制第42-43页
    3.2 实验方法第43-46页
        3.2.1 实验分组第43页
        3.2.2 MTT法检测细胞存活率第43页
        3.2.3 细胞内活性氧(ROS)检测第43-44页
        3.2.4 细胞内丙二醛(MDA)含量检测第44-45页
        3.2.5 细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活力检测第45页
        3.2.6 细胞内谷胱甘肽(GSH)活力检测第45-46页
    3.3 实验结果第46-50页
        3.3.1 pprM、pprI基因转染对 293T细胞生存率的影响第46-47页
        3.3.2 pprM、pprI基因转染对细胞内ROS、MDA含量的影响第47-48页
        3.3.3 pprM、pprI基因转染对细胞内 SOD、GSH活力的影响第48-50页
    3.4 本章小结第50-51页
第4章 讨论第51-55页
第5章 结论第55-57页
参考文献第57-63页
文献综述第63-75页
    参考文献第70-75页
攻读学位期间的科研成果第75-77页
致谢第77页

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