| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 绪论 | 第10-15页 |
| 1.1 PCNA的简介 | 第10页 |
| 1.2 PCNA的结构 | 第10-11页 |
| 1.3 PCNA的表达调控 | 第11页 |
| 1.4 PCNA参与DNA复制 | 第11-12页 |
| 1.5 PCNA参与DNA修复 | 第12-13页 |
| 1.6 PCNA参与细胞周期 | 第13页 |
| 1.7 研究的目的与意义 | 第13-15页 |
| 2 PCNA基因的克隆及序列分析 | 第15-32页 |
| 2.1 材料 | 第15-16页 |
| 2.1.1 主要试验仪器 | 第15页 |
| 2.1.2 主要试验试剂 | 第15-16页 |
| 2.1.3 试验试剂配制 | 第16页 |
| 2.2 方法 | 第16-22页 |
| 2.2.1 柱头总RNA提取 | 第16页 |
| 2.2.2 PCNA基因的RT-PCR | 第16-18页 |
| 2.2.3 RACE克隆 | 第18-22页 |
| 2.2.4 生物信息学分析 | 第22页 |
| 2.3 结果与分析 | 第22-30页 |
| 2.3.1 柱头总RNA的提取 | 第22页 |
| 2.3.2 PCNA基因RT-PCR | 第22-24页 |
| 2.3.3 PCNA的RACE克隆 | 第24-28页 |
| 2.3.4 生物信息学分析 | 第28-30页 |
| 2.4 讨论 | 第30页 |
| 2.5 本章小结 | 第30-32页 |
| 3 PCNA表达载体构建及亚细胞定位 | 第32-41页 |
| 3.1 材料 | 第32-33页 |
| 3.1.1 主要试验试剂 | 第32页 |
| 3.1.2 实验试剂配制 | 第32-33页 |
| 3.2 方法 | 第33-36页 |
| 3.2.1 转基因载体的构建 | 第33-35页 |
| 3.2.2 原生质体亚细胞定位 | 第35-36页 |
| 3.3 结果与分析 | 第36-39页 |
| 3.3.1 转基因载体的构建 | 第36-37页 |
| 3.3.2 原生质亚细胞定位 | 第37-39页 |
| 3.4 讨论 | 第39页 |
| 3.5 本章小结 | 第39-41页 |
| 4 PCNA原核表达载体的构建及蛋白表达纯化 | 第41-50页 |
| 4.1 材料 | 第41-42页 |
| 4.1.1 试验试剂配制 | 第41-42页 |
| 4.2 方法 | 第42-45页 |
| 4.2.1 原核表达纯化 | 第42-45页 |
| 4.3 结果与分析 | 第45-48页 |
| 4.3.1 PCNA原核表达纯化 | 第45-48页 |
| 4.4 讨论 | 第48页 |
| 4.5 本章小结 | 第48-50页 |
| 5 PCNA多克隆抗体制备及蛋白表达分析 | 第50-58页 |
| 5.1 材料 | 第50页 |
| 5.1.1 主要试验试剂及仪器 | 第50页 |
| 5.1.2 试验试剂配制 | 第50页 |
| 5.2 方法 | 第50-52页 |
| 5.2.1 PCNA免疫抗体制备 | 第50-51页 |
| 5.2.2 蛋白样品制备 | 第51-52页 |
| 5.2.3 SDS-PAGE电泳 | 第52页 |
| 5.2.4 转膜 | 第52页 |
| 5.2.5 免疫印迹反应 | 第52页 |
| 5.3 结果与分析 | 第52-56页 |
| 5.3.1 抗体效价检测 | 第52-53页 |
| 5.3.2 蛋白样品制备 | 第53-54页 |
| 5.3.3 PCNA在组织中表达情况检测 | 第54-55页 |
| 5.3.4 PCNA在不同发育时期的柱头表达情况检测 | 第55-56页 |
| 5.4 讨论 | 第56-57页 |
| 5.5 本章小结 | 第57-58页 |
| 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |