| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 1 绪论 | 第8-13页 |
| 1.1 植物次生生长 | 第8-11页 |
| 1.1.1 植物次生细胞壁功能基因的研究进展 | 第9-10页 |
| 1.1.2 植物次生细胞壁形成转录调控因子的研究进展 | 第10-11页 |
| 1.2 OBP1转录因子的研究 | 第11-12页 |
| 1.3 研究的目的与意义 | 第12-13页 |
| 2 小黑杨PsnOBP1的表达及功能分析 | 第13-24页 |
| 2.1 实验材料 | 第13页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第13页 |
| 2.1.2 菌种与载体 | 第13页 |
| 2.1.3 试剂和药品 | 第13页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第13页 |
| 2.1.5 引物合成及测序 | 第13页 |
| 2.2 实验方法 | 第13-19页 |
| 2.2.1 小黑杨木质部RNA提取 | 第13-14页 |
| 2.2.2 cDNA第一链的合成 | 第14页 |
| 2.2.3 小黑杨OBP1基因的克隆及pEASY~(TM)-Blunt Zero-OBP1的构建 | 第14-16页 |
| 2.2.4 小黑杨OBP1的生物信息学分析 | 第16-17页 |
| 2.2.5 小黑杨OBP1基因的特异性表达分析 | 第17-18页 |
| 2.2.6 小黑杨OBP1基因的特异性表达分析 | 第18-19页 |
| 2.3 结果与分析 | 第19-23页 |
| 2.3.1 小黑杨木质部RNA提取 | 第19页 |
| 2.3.2 小黑杨OBP1基因的克隆及pEASY~(TM)-Blunt Zero-OBP1的构建 | 第19-20页 |
| 2.3.3 小黑杨PsnOBP1的生物信息学分析 | 第20-21页 |
| 2.3.4 小黑杨PsnOBP1组织特异性表达分析 | 第21-22页 |
| 2.3.5 小黑杨PsnOBP1亚细胞定位 | 第22-23页 |
| 2.4 本章小结 | 第23-24页 |
| 3 PsnOBP1转录因子结合域转录激活活性验证 | 第24-32页 |
| 3.1 实验材料 | 第24-25页 |
| 3.1.1 菌种与载体 | 第24页 |
| 3.1.2 试剂和药品 | 第24页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第24页 |
| 3.1.4 培养基配制 | 第24-25页 |
| 3.1.5 溶液配制 | 第25页 |
| 3.2 实验方法 | 第25-29页 |
| 3.2.1 pGADT7-Rec-OBP1效应载体构建 | 第25-26页 |
| 3.2.2 转录因子与功能基因启动子区域元析分析 | 第26-27页 |
| 3.2.3 pHIS2-M报告载体的构建 | 第27-28页 |
| 3.2.4 报告载体与效应载体共转化 | 第28-29页 |
| 3.3 结果与分析 | 第29-31页 |
| 3.3.1 pGADT7-Rec2-PsnOBP1效应载体的获得 | 第29页 |
| 3.3.2 pHIS2-顺式作用元件报告载体的获得 | 第29-30页 |
| 3.3.3 PsnOBP1与顺式作用元件结合域转录激活活性分析 | 第30-31页 |
| 3.4 本章小结 | 第31-32页 |
| 4 PsnOBP1过表达载体构建及烟草遗传转化 | 第32-38页 |
| 4.1 实验材料 | 第32页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第32页 |
| 4.1.2 菌种与载体 | 第32页 |
| 4.1.3 试剂和药品 | 第32页 |
| 4.1.4 主要仪器设备 | 第32页 |
| 4.2 实验方法 | 第32-35页 |
| 4.2.1 植物过表达载体ProkⅡ-PsnOBP1构建 | 第32-33页 |
| 4.2.2 植物过表达载体ProkⅡ-PsnOBP1转化烟草 | 第33-34页 |
| 4.2.3 ProkⅡ-PsnOBP1转基因烟草的验证 | 第34-35页 |
| 4.3 结果与分析 | 第35-37页 |
| 4.3.1 植物过表达载体ProkⅡ-PsnOBP1的构建 | 第35-36页 |
| 4.3.2 PsnOBP1转基因烟草的PCR验证 | 第36-37页 |
| 4.4 本章小结 | 第37-38页 |
| 5 PsnOBP1转基因烟草的次生生长功能分析 | 第38-48页 |
| 5.1 实验材料 | 第38页 |
| 5.1.1 主要试剂 | 第38页 |
| 5.1.2 主要仪器设备 | 第38页 |
| 5.2 实验方法 | 第38-40页 |
| 5.2.1 PsnOBP1转基因烟草表型及生长性状相关分析 | 第38页 |
| 5.2.2 PsnOBP1转基因烟草叶绿素含量测定 | 第38页 |
| 5.2.3 PsnOBP1转基因烟草次生生长性状测定 | 第38-39页 |
| 5.2.4 PsnOBP1转基因烟草与次生细胞壁相关基因的功能分析 | 第39-40页 |
| 5.2.5 数据分析 | 第40页 |
| 5.3 结果与分析 | 第40-47页 |
| 5.3.1 PsnOBP1转基因烟草表型及生长性状相关分析 | 第40-43页 |
| 5.3.2 PsnOBP1转基因烟草次生生长性状测定 | 第43-46页 |
| 5.3.3 PsnOBP1转基因烟草与次生细胞壁相关基因的功能分析 | 第46-47页 |
| 5.4 本章小结 | 第47-48页 |
| 6 拟南芥AtOBP1突变体的次生性状分析 | 第48-53页 |
| 6.1 实验材料 | 第48页 |
| 6.1.1 植物材料 | 第48页 |
| 6.1.2 主要试剂 | 第48页 |
| 6.2 实验方法 | 第48-49页 |
| 6.2.1 拟南芥AtOBP1突变体鉴定与筛选 | 第48页 |
| 6.2.2 拟南芥AtOBP1突变体的表型观察 | 第48页 |
| 6.2.3 拟南芥AtOBP1突变体的组织化学染色 | 第48-49页 |
| 6.3 结果与分析 | 第49-51页 |
| 6.3.1 拟南芥AtOBP1突变体的鉴定与筛选 | 第49-50页 |
| 6.3.2 拟南芥AtOBP1突变体的表型观察 | 第50页 |
| 6.3.3 拟南芥AtOBP1突变体组织化学染色 | 第50-51页 |
| 6.4 本章小结 | 第51-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 附录 | 第59-60页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
