| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-24页 |
| 1.1 水平基因转移 | 第11-16页 |
| 1.1.1 原核生物中的水平基因转移 | 第11-12页 |
| 1.1.2 真核生物中水平基因转移现象 | 第12-14页 |
| 1.1.2.1 原生生物中的水平基因转移 | 第12-13页 |
| 1.1.2.2 真菌中的水平基因转移 | 第13页 |
| 1.1.2.3 动物中的水平基因转移 | 第13-14页 |
| 1.1.2.4 植物中的水平基因转移 | 第14页 |
| 1.1.3 水平基因转移的检测方法 | 第14-16页 |
| 1.1.3.1 系统发育分析方法 | 第14-15页 |
| 1.1.3.2 核苷酸成分分析方法 | 第15页 |
| 1.1.3.3 序列相似性法 | 第15页 |
| 1.1.3.4 同源基因分布法 | 第15-16页 |
| 1.2 酰胺酶的研究进展 | 第16-20页 |
| 1.2.1 酰胺酶的分类 | 第16-17页 |
| 1.2.2 酰胺酶的生物学功能 | 第17-18页 |
| 1.2.3 酰胺酶的催化机理及其在生产生活中的应用 | 第18-19页 |
| 1.2.4 酰胺酶家族的进化关系 | 第19-20页 |
| 1.3 氮是植物最重要的营养元素之一 | 第20-22页 |
| 1.3.1 氮素的营养功能 | 第20-21页 |
| 1.3.2 植物氮素吸收 | 第21页 |
| 1.3.3 植物的氮素利用 | 第21-22页 |
| 1.3.3.1 NO_3~-的还原 | 第21-22页 |
| 1.3.3.2 NH_4~+的同化 | 第22页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第22-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-33页 |
| 2.1 供试材料 | 第24页 |
| 2.2 常用试剂和药品 | 第24-25页 |
| 2.3 实验方法 | 第25-33页 |
| 2.3.1 序列检索 | 第25页 |
| 2.3.2 多序列比对和构建系统进化树 | 第25页 |
| 2.3.3 水稻叶片DNA的提取 | 第25-26页 |
| 2.3.4 PCR反应和电泳分析 | 第26-27页 |
| 2.3.5 琼脂糖凝胶中DNA片段的回收 | 第27页 |
| 2.3.6 水稻组织RNA的提取 | 第27-28页 |
| 2.3.7 RNA的纯化和反转录反应 | 第28-29页 |
| 2.3.8 实时(real-time)荧光定量PCR | 第29页 |
| 2.3.9 转基因水稻植株的鉴定 | 第29-30页 |
| 2.3.9.1 转基因植株G418抗性基因的PCR检测 | 第29-30页 |
| 2.3.9.2 转基因水稻植株中潮霉素抗性的鉴定 | 第30页 |
| 2.3.9.3 转基因植株潮霉素抗性基因的PCR检测 | 第30页 |
| 2.3.9.4 转基因植株基因表达量检测 | 第30页 |
| 2.3.10 田间性状测量 | 第30页 |
| 2.3.11 叶绿素含量测量 | 第30-31页 |
| 2.3.12 水稻材料培养及处理 | 第31-32页 |
| 2.3.13 基因结构域分析预测 | 第32页 |
| 2.3.14 谷氨酰胺酶酶活性测定 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-48页 |
| 3.1 植物AMI10基因的起源分析 | 第33-38页 |
| 3.1.1 植物中的AMI10同源基因 | 第33-37页 |
| 3.1.2 植物AMI10基因的起源 | 第37-38页 |
| 3.2 纯合突变体的鉴定 | 第38-40页 |
| 3.3 T_2代转基因植株的鉴定 | 第40-41页 |
| 3.3.1 潮霉素抗性检测 | 第40页 |
| 3.3.2 T_2代转基因植株潮霉素抗性基因的PCR检测 | 第40页 |
| 3.3.3 转基因植株表达量分析 | 第40-41页 |
| 3.4 不同材料农艺性状差异显著性比较 | 第41-43页 |
| 3.5 叶绿素含量分析 | 第43-44页 |
| 3.6 缺氮胁迫表达分析 | 第44页 |
| 3.7 谷氨酰胺酶活性分析 | 第44-48页 |
| 3.7.1 OsAMI10蛋白的结构域预测 | 第44-45页 |
| 3.7.2 野生型植株各部位谷氨酰胺酶活性 | 第45-46页 |
| 3.7.3 野生型和转基因植株谷氨酰胺酶活性分析 | 第46-48页 |
| 4 小结与讨论 | 第48-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
