| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略词表 | 第9-14页 |
| 第1章 前言 | 第14-40页 |
| 1.1 抑癌基因P53 | 第14-26页 |
| 1.1.1 P53的激活与功能 | 第14-17页 |
| 1.1.2 P53蛋白的结构与修饰 | 第17-21页 |
| 1.1.3 P53异构体与P53蛋白家族 | 第21-26页 |
| 1.2 热中暑 | 第26-33页 |
| 1.2.1 热休克蛋白HSP90 | 第27-29页 |
| 1.2.2 热休克转录因子HSF1 | 第29-32页 |
| 1.2.3 热处理与ATM激活 | 第32-33页 |
| 1.3 分子伴侣介导的自噬(CMA) | 第33-37页 |
| 1.3.1 CMA信号通路 | 第34-35页 |
| 1.3.2 CMA的功能 | 第35-36页 |
| 1.3.3 CMA相关的疾病 | 第36-37页 |
| 1.4 本课题研究的背景、内容和目的 | 第37-40页 |
| 第2章 材料与方法 | 第40-58页 |
| 2.1 斑马鱼体系实验操作 | 第40-41页 |
| 2.1.1 斑马鱼的品系及饲养 | 第40页 |
| 2.1.2 斑马鱼的交配及受精卵的获取 | 第40页 |
| 2.1.3 斑马鱼胚胎的热激处理 | 第40-41页 |
| 2.1.4 斑马鱼胚胎存活率分析 | 第41页 |
| 2.2 人类细胞系实验操作 | 第41-44页 |
| 2.2.1 细胞系的常规培养 | 第41页 |
| 2.2.2 细胞传代 | 第41页 |
| 2.2.3 细胞冻存与复苏 | 第41页 |
| 2.2.4 细胞转染 | 第41-42页 |
| 2.2.5 慢病毒的包装 | 第42-44页 |
| 2.2.6 Annexin V-FITC细胞凋亡检测 | 第44页 |
| 2.2.7 细胞活性测定(MTT) | 第44页 |
| 2.3 DNA实验操作方法 | 第44-48页 |
| 2.3.1 分子克隆 | 第44-46页 |
| 2.3.2 DNA测序反应 | 第46页 |
| 2.3.3 质粒的提取 | 第46-47页 |
| 2.3.4 基因组DNA的提取 | 第47-48页 |
| 2.4 RNA实验操作方法 | 第48-49页 |
| 2.4.1 总RNA的提取 | 第48页 |
| 2.4.2 DNase Ⅰ处理总RNA | 第48页 |
| 2.4.3 RNA逆转录成cDNA | 第48-49页 |
| 2.4.4 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第49页 |
| 2.5 蛋白实验操作方法 | 第49-52页 |
| 2.5.1 总蛋白的提取 | 第49页 |
| 2.5.2 蛋白质印迹 | 第49-52页 |
| 2.6 实验中所用化学试剂及相关溶液配方总述 | 第52-58页 |
| 2.6.1 常规试剂配方列表 | 第52-53页 |
| 2.6.2 不同浓度聚丙烯酰胺凝胶配方 | 第53-54页 |
| 2.6.3 实验中所用抗体列表 | 第54-55页 |
| 2.6.4 实验中所用siRNA列表 | 第55页 |
| 2.6.5 实验中所用qPCR引物列表 | 第55页 |
| 2.6.6 实验中克隆和鉴定引物列表 | 第55-58页 |
| 第3章 过表达HSC70增加结肠癌细胞对外界胁迫的敏感性 | 第58-63页 |
| 3.1 建立HSC70稳定表达细胞系 | 第58页 |
| 3.2 HSC70稳定表达细胞系对于外界胁迫更加敏感 | 第58-60页 |
| 3.3 在HSC70稳定表达细胞系中敲低HSC70降低对于低糖压力的敏感性 | 第60-61页 |
| 3.4 小结和讨论 | 第61-63页 |
| 第4章 P53在40℃和43℃高温条件下不同作用的分子机制 | 第63-76页 |
| 4.1 P53野生型细胞系比P53缺陷细胞系对于43℃高温更敏感 | 第63-64页 |
| 4.2 在43℃条件下P53不影响CMA基因表达而促进凋亡基因表达 | 第64-67页 |
| 4.3 在43℃条件下ATM被激活并伴随P53 ser6的磷酸化 | 第67-69页 |
| 4.4 敲低ATM降低P53野生型细胞系在43℃条件下的细胞凋亡 | 第69-70页 |
| 4.5 在40℃条件下P53促进细胞存活不依赖于ATM | 第70-72页 |
| 4.6 在40℃条件下P53促进细胞存活依赖于HSP90 | 第72-74页 |
| 4.7 小结和讨论 | 第74-76页 |
| 第5章 总结与讨论 | 第76-80页 |
| 5.1 结论 | 第76-77页 |
| 5.2 讨论 | 第77-80页 |
| 参考文献 | 第80-88页 |
| 作者简介 | 第88-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
