| 中文摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-31页 |
| ·水稻稻瘟病抗性基因研究概况 | 第13-22页 |
| ·水稻-稻瘟病菌作用机理 | 第13-14页 |
| ·水稻稻瘟病抗性基因遗传学分析与定位 | 第14-20页 |
| ·水稻稻瘟病抗性基因克隆及功能研究 | 第20-22页 |
| ·抗病基因结构及抗病的分子基础 | 第22-25页 |
| ·抗病基因结构 | 第22-24页 |
| ·抗病基因作用的分子基础 | 第24-25页 |
| ·分子生物学技术在抗病育种中的应用 | 第25-28页 |
| ·分子标记辅助选择进行抗病育种 | 第25-27页 |
| ·转基因技术进行抗病育种 | 第27-28页 |
| ·生物信息学的发展应用 | 第28-30页 |
| ·本项目研究的目的和意义 | 第30-31页 |
| 第二章 Pi-y43(t)基因的精细定位 | 第31-40页 |
| ·材料与方法 | 第32-34页 |
| ·作图群体 | 第32页 |
| ·主要的仪器设备和试剂 | 第32页 |
| ·主要仪器设备 | 第32页 |
| ·主要的试剂 | 第32页 |
| ·水稻基因组DNA 提取 | 第32-33页 |
| ·Pi-y43(t)基因区域物理重叠群的构建 | 第33页 |
| ·新SSR 标记开发及分析 | 第33-34页 |
| ·新SSR 标记开发 | 第33-34页 |
| ·SSR 分析 | 第34页 |
| ·Pi-y43(t)基因区域精细遗传连锁图及物理图谱的构建 | 第34页 |
| ·结果 | 第34-38页 |
| ·Pi-y43(t)基因精细定位 | 第34-35页 |
| ·Pi-y43(t)基因区域物理重叠群的构建 | 第35-36页 |
| ·新SSR 标记的开发及多态性分析 | 第36-37页 |
| ·Pi-y43(t)基因区域精细遗传连锁图及物理图谱的构建 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| ·与水稻第2 染色体已定位的稻瘟病抗性基因的关系 | 第38页 |
| ·目标基因区域新标记的开发 | 第38-39页 |
| ·抗稻瘟病基因区域的连锁不平衡 | 第39-40页 |
| 第三章 Pi-y43(t)目标区域的生物信息学分析及候选基因的确定 | 第40-52页 |
| ·材料与方法 | 第40-46页 |
| ·实验材料 | 第40-41页 |
| ·主要仪器设备及试剂药品 | 第41页 |
| ·主要仪器设备 | 第41页 |
| ·试剂及药品 | 第41页 |
| ·目标基因区域的基因预测及序列分析 | 第41页 |
| ·候选基因的RT-PCR 分析 | 第41-44页 |
| ·采用Trizol 试剂抽提法提取总RNA | 第41-42页 |
| ·RT-PCR 引物 | 第42页 |
| ·反转录第一条链的合成 | 第42页 |
| ·RT-PCR 反应 | 第42-44页 |
| ·PCR 产物回收、连接及转化鉴定 | 第44-46页 |
| ·PCR 产物回收 | 第44页 |
| ·PCR 回收产物的连接 | 第44页 |
| ·连接产物采用化学法转化E.coli DH5α感受态细胞 | 第44-45页 |
| ·重组质粒的提取与鉴定 | 第45-46页 |
| ·结果 | 第46-50页 |
| ·Pi-y43(t)基因区域的预测 | 第46-47页 |
| ·Pi-y43(t)抗病相关候选基因的确定 | 第47-48页 |
| ·候选基因的RT-PCR 分析 | 第48-49页 |
| ·测序及序列分析 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| 第四章 稻瘟病抗性基因Pi-y43(t)的图位克隆及序列分析 | 第52-67页 |
| ·材料与方法 | 第53-56页 |
| ·植物材料 | 第53页 |
| ·稻瘟病菌培养及接种方法 | 第53页 |
| ·稻瘟病菌培养 | 第53页 |
| ·接种方法 | 第53页 |
| ·主要试剂及仪器设备 | 第53-54页 |
| ·主要试剂 | 第53页 |
| ·仪器设备 | 第53-54页 |
| ·序列分析软件 | 第54页 |
| ·基因的克隆测序 | 第54-56页 |
| ·高质量基因组DNA 提取 | 第54页 |
| ·引物设计 | 第54-55页 |
| ·PCR 扩增 | 第55-56页 |
| ·PCR 产物的回收、连接及转化鉴定 | 第56页 |
| ·结果与分析 | 第56-65页 |
| ·候选基因Piy43-3cDNA 的扩增、克隆及测序 | 第56-57页 |
| ·候选基因Piy43-3 的扩增、克隆及测序 | 第57-60页 |
| ·云引、Pib 单基因系的人工注射接种 | 第60-61页 |
| ·Pib 同源基因Pib2 的扩增、克隆及测序 | 第61-63页 |
| ·云引中Pib 同源基因Pib2 的生物信息学分析 | 第63-65页 |
| ·讨论 | 第65-67页 |
| ·关于云引稻瘟病抗性基因Pi-y43(t) | 第65-66页 |
| ·进一步的研究设想 | 第66-67页 |
| 第五章 结论 | 第67-69页 |
| 附录1 常用试剂、溶液配方 | 第69-70页 |
| 附录2 缩略表 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
