| 中文摘要 | 第6-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 缩略词 | 第13-17页 |
| 前言 | 第17-31页 |
| 1. 绪论 | 第17-18页 |
| 2. 肿瘤相关成纤维细胞(TAFs) | 第18-19页 |
| 3. 成纤维激活蛋白α (FAPα)及其生物学活性 | 第19-23页 |
| 3.1 FAPα的发现与结构特点 | 第19-20页 |
| 3.2 FAPα酶切活性的特征 | 第20-21页 |
| 3.3 FAPα与肿瘤的发生发展 | 第21-23页 |
| 4. 针对FAPα的靶向治疗策略 | 第23-27页 |
| 4.1 免疫治疗 | 第23-24页 |
| 4.2 小分子抑制剂 | 第24页 |
| 4.3 FAPα激活式前药的药物设计 | 第24-27页 |
| 5. BF211简介 | 第27-30页 |
| 6. 本实验研究目的及意义 | 第30-31页 |
| 第二章: FAPα激活式系列前药的筛选 | 第31-44页 |
| 1. 材料与仪器 | 第31-35页 |
| 1.1 实验材料 | 第31-32页 |
| 1.2 实验试剂 | 第32-33页 |
| 1.3 实验耗材 | 第33页 |
| 1.4 实验仪器 | 第33-34页 |
| 1.5 主要溶液的配置 | 第34-35页 |
| 2. 实验方法 | 第35-38页 |
| 2.1 HPLC法检测rhFAPα对BF211系列前药的酶切效率 | 第35-36页 |
| 2.2 HPLC法检测FAPα高低表达组织匀浆对BF211系列前药的酶切作用 | 第36-38页 |
| 2.2.1 免疫印迹法检测组织中FAPα含量 | 第36-38页 |
| 2.2.2 HPLC法检测BF211前药系列化合物在肿瘤和心脏匀浆中的酶切效率 | 第38页 |
| 2.2.3 HPLC法考察BF211-03在正常组织匀浆中的稳定性 | 第38页 |
| 3. 实验结果 | 第38-43页 |
| 3.1 rhFAPα对BF211前药系列化合物的酶切活化作用 | 第38-40页 |
| 3.1.1 rhFAPα对BF211前药系列化合物的酶切作用 | 第38-39页 |
| 3.1.2 rhFAPα特异性酶解BF211-03释放BF211 | 第39-40页 |
| 3.2 FAPα高低表达组织匀浆对BF211系列前药的筛选 | 第40-43页 |
| 3.2.1 肿瘤组织高表达FAPα,正常组织几乎不表达FAPα | 第40-41页 |
| 3.2.2 肿瘤组织匀浆液和心脏组织匀浆液对BF211系列前药的酶切作用 | 第41-42页 |
| 3.2.3 BF211-03在正常组织匀浆液(肝脏除外)中呈现较好的稳定性 | 第42-43页 |
| 4. 讨论与小结 | 第43-44页 |
| 第三章: BF211/BF211-03细胞毒性差异考察 | 第44-52页 |
| 1. 实验材料 | 第44-46页 |
| 1.1 化合物与试剂 | 第44-45页 |
| 1.2 细胞株及培养条件 | 第45页 |
| 1.3 实验耗材 | 第45页 |
| 1.4 实验仪器 | 第45-46页 |
| 2. 实验方法 | 第46-48页 |
| 2.1 免疫印迹法验证实验细胞株的FAPα表达情况 | 第46页 |
| 2.2 HPLC法考察细胞培养体系中BF211-03裂解释放 | 第46-47页 |
| 2.3 MTT法考察BF211/BF211-03对肿瘤细胞和心肌细胞生长抑制作用 | 第47-48页 |
| 3. 实验结果 | 第48-51页 |
| 3.1 MDA-MB-435高表达FAPα,MGC-803/HCT-116/H9C2几乎不表达FAPα | 第48页 |
| 3.2 BF211-03在FAPα高表达、低表达细胞株培养体系内的裂解程度不一 | 第48-49页 |
| 3.3 FAPα高表达细胞株上的IC_(50)(BF211-03)/IC_(50)(BF211)比FAPα低表达细胞株小 | 第49-51页 |
| 4. 讨论与小结 | 第51-52页 |
| 第四章: rhFAP、FAPα高表达细胞株或肿瘤匀浆对BF211-03潜在毒性的影响 | 第52-64页 |
| 1. 实验材料 | 第52-53页 |
| 2. 实验方法 | 第53-59页 |
| 2.1 MTT法考察BF211-03与rhFAPα孵育后细胞毒性的变化 | 第53页 |
| 2.2 MTT法考察BF211-03与FAPα阳性细胞株HEK293/FAPα+株孵育后细胞毒性变化 | 第53-58页 |
| 2.2.1 FAPα高表达细胞株的构建 | 第53-58页 |
| 2.2.2 MTT法检测BF211-03与HEK293/FAPα+孵育后细胞毒性变化 | 第58页 |
| 2.3 MTT法考察BF211-03与肿瘤匀浆孵育后细胞毒性变化 | 第58-59页 |
| 3. 实验结果 | 第59-63页 |
| 3.1 rhFAP酶解恢复BF211-03的潜在细胞毒性 | 第59页 |
| 3.2 HEK293/FAPα~+孵育恢复BF211-03的潜在细胞毒性 | 第59-61页 |
| 3.3 肿瘤匀浆液孵育恢复BF211-03的潜在毒性 | 第61-63页 |
| 4. 讨论与小结 | 第63-64页 |
| 第五章: BF211/BF211-03抑制HCT-116移植瘤生长的研究 | 第64-71页 |
| 1. 实验材料 | 第64-65页 |
| 2. 实验方法 | 第65-67页 |
| 2.1 细胞的培养与收集 | 第65页 |
| 2.2 HCT-116移植瘤模型的建立 | 第65页 |
| 2.3 小鼠标记和分组 | 第65页 |
| 2.4 给药与指标监测 | 第65-66页 |
| 2.5 结果评价 | 第66页 |
| 2.6 统计方法 | 第66-67页 |
| 3. 实验结果 | 第67-70页 |
| 3.1 药物对HCT-116移植瘤生长的影响 | 第67-68页 |
| 3.2 药物对体重的影响 | 第68-70页 |
| 4. 讨论与小结 | 第70-71页 |
| 第六章; 讨论与展望 | 第71-73页 |
| 附录 | 第73-76页 |
| 参考文献 | 第76-82页 |
| 硕士期间科研成果 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
