摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
1 前言 | 第11-22页 |
1.1 细胞的极性生长 | 第11-12页 |
1.1.1 顶端生长 | 第11-12页 |
1.1.2 扩散性生长 | 第12页 |
1.2 微丝和细胞极性 | 第12-14页 |
1.2.1 微丝骨架(microfilament, MF)动态变化 | 第12-13页 |
1.2.2 微丝的结合蛋白 | 第13-14页 |
1.2.3 微丝和细胞极性 | 第14页 |
1.3 植物微管骨架及细胞极性生长 | 第14-16页 |
1.3.1 微管的结构 | 第14-15页 |
1.3.2 微管与细胞极性生长 | 第15-16页 |
1.4 调控植物细胞极性建立的ROP GTPase信号网络 | 第16-20页 |
1.4.1 Rho族小G蛋白 | 第16-17页 |
1.4.2 ROP蛋白的效应蛋白 | 第17-18页 |
1.4.3 植物ROP信号途径调控花粉管生长 | 第18页 |
1.4.4 植物ROP信号途径调控叶铺板细胞的极性生长 | 第18-20页 |
1.5 本研究的目的与意义 | 第20-22页 |
2 实验材料和方法 | 第22-31页 |
2.1 实验材料 | 第22-23页 |
2.1.1 菌株与质粒 | 第22页 |
2.1.2 植物材料 | 第22页 |
2.1.3 酶及试剂 | 第22页 |
2.1.4 仪器设备 | 第22-23页 |
2.2 试剂的配制 | 第23-24页 |
2.2.1 常用的培养基配制 | 第23-24页 |
2.2.2 常用试剂的配制 | 第24页 |
2.3 实验方法 | 第24-31页 |
2.3.1 筛选EMS诱变突变体 | 第24-25页 |
2.3.2 拟南芥总RNA提取 | 第25页 |
2.3.3 mRNA的反转录实验 | 第25-26页 |
2.3.4 琼脂糖凝胶回收目的DNA片段 | 第26页 |
2.3.5 常规PCR | 第26-27页 |
2.3.6 大肠杆菌感受态的转化及阳性克隆的筛选 | 第27页 |
2.3.7 质粒DNA提取 | 第27页 |
2.3.8 拟南芥植株的培养 | 第27页 |
2.3.9 农杆菌浸花转化 | 第27-28页 |
2.3.10 拟南芥T-DNA插入突变体纯合体的筛选鉴定 | 第28-29页 |
2.3.11 转基因植株的筛选 | 第29页 |
2.3.12 转基因植株的杂交实验 | 第29页 |
2.3.13 琼脂糖凝胶中DNA片段的回收 | 第29-31页 |
3 实验结果与分析 | 第31-48页 |
3.1 突变体的诱变与筛选 | 第31-32页 |
3.2 突变体的单基因分离 | 第32-33页 |
3.3 突变体的性状分析 | 第33-35页 |
3.4 候选基因的筛选与鉴定 | 第35-42页 |
3.4.1 单基因BSA-seq定位的遗传基础 | 第35-36页 |
3.4.2 单基因BSA-seq定位的实验设计 | 第36页 |
3.4.3 单基因BSA-seq定位的实验结果 | 第36-42页 |
3.5 AN的表达部位及功能 | 第42-43页 |
3.6 AN和AN~(E293K)在烟草细胞的表达情况 | 第43-46页 |
3.7 AN参与ROP6信号途径调控的微管有序化过程 | 第46-48页 |
4 结果与讨论 | 第48-50页 |
4.1 AN~(E293K)要表达到一定的水平才能产生突变体性状 | 第48页 |
4.2 AN和ROP6的关系 | 第48页 |
4.3 AN可能通过参与微管的组织动态调节而影响细胞极性建立 | 第48-49页 |
4.4 AN和AN~(E293K)可能通过微管骨架参与细胞质中的物质运输 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-55页 |
附录 | 第55-57页 |
致谢 | 第57页 |