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拟南芥ROP6信号通路调控细胞极性发育的突变体筛选和突变基因克隆

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
1 前言第11-22页
    1.1 细胞的极性生长第11-12页
        1.1.1 顶端生长第11-12页
        1.1.2 扩散性生长第12页
    1.2 微丝和细胞极性第12-14页
        1.2.1 微丝骨架(microfilament, MF)动态变化第12-13页
        1.2.2 微丝的结合蛋白第13-14页
        1.2.3 微丝和细胞极性第14页
    1.3 植物微管骨架及细胞极性生长第14-16页
        1.3.1 微管的结构第14-15页
        1.3.2 微管与细胞极性生长第15-16页
    1.4 调控植物细胞极性建立的ROP GTPase信号网络第16-20页
        1.4.1 Rho族小G蛋白第16-17页
        1.4.2 ROP蛋白的效应蛋白第17-18页
        1.4.3 植物ROP信号途径调控花粉管生长第18页
        1.4.4 植物ROP信号途径调控叶铺板细胞的极性生长第18-20页
    1.5 本研究的目的与意义第20-22页
2 实验材料和方法第22-31页
    2.1 实验材料第22-23页
        2.1.1 菌株与质粒第22页
        2.1.2 植物材料第22页
        2.1.3 酶及试剂第22页
        2.1.4 仪器设备第22-23页
    2.2 试剂的配制第23-24页
        2.2.1 常用的培养基配制第23-24页
        2.2.2 常用试剂的配制第24页
    2.3 实验方法第24-31页
        2.3.1 筛选EMS诱变突变体第24-25页
        2.3.2 拟南芥总RNA提取第25页
        2.3.3 mRNA的反转录实验第25-26页
        2.3.4 琼脂糖凝胶回收目的DNA片段第26页
        2.3.5 常规PCR第26-27页
        2.3.6 大肠杆菌感受态的转化及阳性克隆的筛选第27页
        2.3.7 质粒DNA提取第27页
        2.3.8 拟南芥植株的培养第27页
        2.3.9 农杆菌浸花转化第27-28页
        2.3.10 拟南芥T-DNA插入突变体纯合体的筛选鉴定第28-29页
        2.3.11 转基因植株的筛选第29页
        2.3.12 转基因植株的杂交实验第29页
        2.3.13 琼脂糖凝胶中DNA片段的回收第29-31页
3 实验结果与分析第31-48页
    3.1 突变体的诱变与筛选第31-32页
    3.2 突变体的单基因分离第32-33页
    3.3 突变体的性状分析第33-35页
    3.4 候选基因的筛选与鉴定第35-42页
        3.4.1 单基因BSA-seq定位的遗传基础第35-36页
        3.4.2 单基因BSA-seq定位的实验设计第36页
        3.4.3 单基因BSA-seq定位的实验结果第36-42页
    3.5 AN的表达部位及功能第42-43页
    3.6 AN和AN~(E293K)在烟草细胞的表达情况第43-46页
    3.7 AN参与ROP6信号途径调控的微管有序化过程第46-48页
4 结果与讨论第48-50页
    4.1 AN~(E293K)要表达到一定的水平才能产生突变体性状第48页
    4.2 AN和ROP6的关系第48页
    4.3 AN可能通过参与微管的组织动态调节而影响细胞极性建立第48-49页
    4.4 AN和AN~(E293K)可能通过微管骨架参与细胞质中的物质运输第49-50页
参考文献第50-55页
附录第55-57页
致谢第57页

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