| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第13-19页 |
| 1.1 昆虫抗药性研究概况 | 第13-14页 |
| 1.2 代谢组学在昆虫中的应用概况 | 第14-16页 |
| 1.2.1 GC在昆虫抗药性研究中的应用 | 第15页 |
| 1.2.2 LC-MS在昆虫抗药性中的应用 | 第15-16页 |
| 1.2.3 NMR在昆虫抗药性中的应用 | 第16页 |
| 1.2.4 代谢组应用于昆虫抗药性研究存在的问题 | 第16页 |
| 1.3 谷氨酸代谢与谷氨酸脱羧酶概述 | 第16-17页 |
| 1.4 研究意义及技术路线 | 第17-19页 |
| 1.4.1 研究意义 | 第17-18页 |
| 1.4.2 技术路线 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-29页 |
| 2.1 供试虫源 | 第19页 |
| 2.2 主要试剂与耗材 | 第19页 |
| 2.3 主要仪器 | 第19-20页 |
| 2.4 代谢组检测样品收集与制备 | 第20-21页 |
| 2.4.1 NMR样品的制备 | 第20页 |
| 2.4.2 GC-FID样品的制备 | 第20-21页 |
| 2.4.3 LC-QQQ样品的制备 | 第21页 |
| 2.5 数据采集与处理 | 第21-23页 |
| 2.5.1 数据采集参数 | 第21-22页 |
| 2.5.2 数据处理 | 第22-23页 |
| 2.6 代谢通路分析 | 第23页 |
| 2.7 差异通路与通路关键酶筛选 | 第23页 |
| 2.8 关键酶功能分析 | 第23-29页 |
| 2.8.1 小菜蛾总RNA的提取 | 第23页 |
| 2.8.2 cDNA合成 | 第23-24页 |
| 2.8.3 PCR产物回收、克隆与测序 | 第24-25页 |
| 2.8.4 GAD系统进化树分析 | 第25-26页 |
| 2.8.5 PxGAD表达模式分析 | 第26页 |
| 2.8.6 dsRNA合成 | 第26-27页 |
| 2.8.7 靶基因RNAi及表达量测定 | 第27-28页 |
| 2.8.8 RNAi后的小菜蛾幼虫氟虫腈生物测定 | 第28页 |
| 2.8.9 数据处理与分析 | 第28-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-45页 |
| 3.1 小菜蛾代谢物组成 | 第29-32页 |
| 3.2 小菜蛾差异代谢物分析 | 第32-36页 |
| 3.2.1 代谢轮廓与主要差异代谢物 | 第32-33页 |
| 3.2.2 小菜蛾样品组聚类分析 | 第33-36页 |
| 3.3 差异通路分析 | 第36-39页 |
| 3.4 PxGAD的功能分析 | 第39-45页 |
| 3.4.1 小菜蛾PxGAD克隆与进化树分析 | 第39-41页 |
| 3.4.2 PxGAD表达模式分析 | 第41页 |
| 3.4.3 小菜蛾显微注射dsRNA后不同时间点的表达量变化 | 第41-43页 |
| 3.4.4 RNA介导的PxGAD干扰后氟虫腈生测死亡率变化 | 第43-45页 |
| 4 讨论与展望 | 第45-50页 |
| 4.1 小菜蛾敏感与抗药品系代谢物变化情况 | 第45-47页 |
| 4.1.1 氨基酸代谢变化 | 第45页 |
| 4.1.2 能量代谢变化 | 第45-46页 |
| 4.1.3 脂肪酸和脂质代谢 | 第46页 |
| 4.1.4 对氟虫腈的解毒反应 | 第46-47页 |
| 4.2 小菜蛾氟虫腈处理后代谢通路变化 | 第47页 |
| 4.3 PxGAD序列与表达模式分析 | 第47-48页 |
| 4.4 RNA干扰PxGAD后氟虫腈抗性变化 | 第48页 |
| 4.5 展望 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 致谢 | 第55页 |