| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 水稻白叶枯病(Bacterial blight,BB)简介 | 第12-15页 |
| 1.1.1 水稻抗白叶枯病基因的鉴定和克隆 | 第13-14页 |
| 1.1.2 水稻抗白叶枯病基因在培育抗病品种中的应用 | 第14-15页 |
| 1.2 植物的抗病机制 | 第15-17页 |
| 1.2.1 水杨酸(SA)介导的抗病途径 | 第15页 |
| 1.2.2 脱落酸(ABA)介导的抗病途径 | 第15-16页 |
| 1.2.3 赤霉素(GA)介导的抗病途径 | 第16页 |
| 1.2.4 其它激素介导的抗病途径 | 第16-17页 |
| 1.3 植物转录因子研究进展 | 第17页 |
| 1.3.1 转录因子的结构与功能 | 第17页 |
| 1.3.2 转录因子分类及功能 | 第17页 |
| 1.4 WRKY转录因子研究进展 | 第17-22页 |
| 1.4.1 WRKY转录因子的结构及分类 | 第17-18页 |
| 1.4.2 WRKY转录因子的生物学功能 | 第18-22页 |
| 1.4.2.1 WRKY转录因子参与调控植物的抗病 | 第18-19页 |
| 1.4.2.2 WRKY转录因子参与调控植物的抗逆途径 | 第19-20页 |
| 1.4.2.3 WRKY转录因子与植物的生长发育 | 第20-22页 |
| 第二章 基因克隆 | 第22-30页 |
| 2.1 试剂的与材料 | 第22页 |
| 2.1.1 试剂 | 第22页 |
| 2.1.2 材料 | 第22页 |
| 2.2 方法 | 第22-26页 |
| 2.2.1 水稻栽培 | 第22-23页 |
| 2.2.2 水稻总RNA的提取 | 第23页 |
| 2.2.3 RNA的逆转录 | 第23页 |
| 2.2.4 引物设计 | 第23-24页 |
| 2.2.5 切胶纯化 | 第24页 |
| 2.2.6 T-A连接 | 第24页 |
| 2.2.7 大肠杆菌感受态细胞制备 | 第24-25页 |
| 2.2.8 转化大肠杆菌 | 第25页 |
| 2.2.9 重组质粒的筛选与鉴定 | 第25页 |
| 2.2.10 测序及序列分析 | 第25-26页 |
| 2.2.11 质粒提取 | 第26页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第26-27页 |
| 2.3.1 PCR扩增结果 | 第26页 |
| 2.3.2 序列测定和分析 | 第26-27页 |
| 2.4. 讨论 | 第27-30页 |
| 第三章 OsWRKY7和OmWRKY7基因的表达分析 | 第30-42页 |
| 3.1 试剂与材料 | 第30-31页 |
| 3.1.1 试剂 | 第30页 |
| 3.1.2 材料 | 第30-31页 |
| 3.2 实验方法 | 第31-35页 |
| 3.2.1 亚细胞定位载体的构建 | 第31-32页 |
| 3.2.1.1 电击转化 | 第31页 |
| 3.2.1.2 农杆菌感受态细胞的制备 | 第31-32页 |
| 3.2.2 OmWRKY7和OsWRKY7的自激活转录活性分析 | 第32-33页 |
| 3.2.2.1 OmWRKY7和OsWRKY7的的诱饵载体的构建 | 第32页 |
| 3.2.2.2 酵母感受态制备 | 第32-33页 |
| 3.2.2.3 转化酵母菌株Y2HGold | 第33页 |
| 3.2.3 瞬时转染 | 第33-34页 |
| 3.2.3.1 水稻原生质体瞬时表达 | 第33页 |
| 3.2.3.2 原生体转化 | 第33-34页 |
| 3.2.4 OsWRKY7和OmWRKY7的组织性表达 | 第34页 |
| 3.2.5 OsWRKY7和OmWRKY7对于激素处理和环境胁迫处理的响应 | 第34-35页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第35-39页 |
| 3.3.1 OsWRKY7和OmWRKY7的自激活转录活性验证 | 第35-36页 |
| 3.3.2 OsWRKY7和OmWRKY7的亚细胞定位 | 第36-38页 |
| 3.3.3 OsWRKY7基因在水稻不同组织中的表达 | 第38页 |
| 3.3.4 OsWRKY7对激素和环境胁迫的响应 | 第38-39页 |
| 3.4 讨论 | 第39-42页 |
| 第四章 OsWRKY7启动子表达特性的分析 | 第42-52页 |
| 4.1 实验材料与试剂 | 第42页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第42页 |
| 4.1.2 试剂与载体 | 第42页 |
| 4.2 实验方法 | 第42-45页 |
| 4.2.1 启动子的克隆和载体构建 | 第42-43页 |
| 4.2.2 质粒提取 | 第43页 |
| 4.2.3 农杆菌介导的水稻转化 | 第43-44页 |
| 4.2.4 用GUS组织染色法进行转基因的阳性鉴定 | 第44页 |
| 4.2.5 激素处理和接菌实验 | 第44-45页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第45-48页 |
| 4.3.1 启动子表达载体的构建 | 第45页 |
| 4.3.2 启动子序列分析 | 第45-46页 |
| 4.3.4 转基因植株的获得 | 第46页 |
| 4.3.5 OsWRKY7的表达特性 | 第46-47页 |
| 4.3.6 OsWRKY7的诱导表达特性 | 第47-48页 |
| 4.4 讨论 | 第48-52页 |
| 第五章 OsWRKY7和OmWRKY7的抗病性鉴定 | 第52-62页 |
| 5.1 材料与方法 | 第52-53页 |
| 5.1.1 材料 | 第52页 |
| 5.1.2 菌株和载体 | 第52-53页 |
| 5.2 实验方法 | 第53-55页 |
| 5.2.1 过表达载体的构建 | 第53页 |
| 5.2.2 遗传转化 | 第53页 |
| 5.2.3 转基因阳性苗鉴定 | 第53-54页 |
| 5.2.3.1 简易法提取水稻DNA | 第53-54页 |
| 5.2.3.2 PCR鉴定 | 第54页 |
| 5.2.4 转基因植株的超表达量检测 | 第54-55页 |
| 5.2.5 转基因植株的抗病性分析 | 第55页 |
| 5.3 实验结果与分析 | 第55-60页 |
| 5.3.1 超表达载体构建 | 第55-56页 |
| 5.3.2 转基因植株的阳性鉴定 | 第56-58页 |
| 5.3.3 转基因植株的超表达量检测 | 第58-59页 |
| 5.3.4 转基因植株的抗病性分析 | 第59-60页 |
| 5.4 讨论 | 第60-62页 |
| 第六章 全文总结 | 第62-64页 |
| 6.1 结论 | 第62-63页 |
| 6.2 下一步工作展望 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-74页 |
| 附录 | 第74-78页 |
| 学术论文发表情况 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
