| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 个人简介 | 第9-10页 |
| 致谢 | 第10-20页 |
| 缩咯词表 | 第20-21页 |
| 第一章 文献综述 | 第21-37页 |
| 第一节 瞬时表达系统的研究 | 第21-29页 |
| 一、瞬时表达的受体 | 第21-22页 |
| (一) 第一代瞬时表达系统 | 第21页 |
| (二) 第二代瞬时表达系统 | 第21-22页 |
| (三) 第三代瞬时表达系统 | 第22页 |
| 二、瞬时表达载体的转化 | 第22-25页 |
| (一) 原生质体转化法 | 第22-23页 |
| (二) 农杆菌介导法 | 第23页 |
| (三)基因枪介导法 | 第23-24页 |
| (四) 病毒介导法 | 第24-25页 |
| 三、瞬时表达系统的应用 | 第25-29页 |
| (一) 基因功能分析 | 第25页 |
| (二) 亚细胞定位 | 第25-26页 |
| (三) 蛋白质互作 | 第26页 |
| (四) 抑制子功能鉴定 | 第26-27页 |
| (五) 可变剪接调控 | 第27-28页 |
| (六) 转录元件和转录因子的功能分析 | 第28-29页 |
| 第二节 病毒诱导的基因沉默(VIGS)的研究 | 第29-37页 |
| 一、VIGS技术的概述 | 第29-31页 |
| (一) VIGS的作用机制 | 第29-30页 |
| (二) VIGS载体来源 | 第30-31页 |
| (三) VIGS标记选择 | 第31页 |
| 二、VIGS技术的发展 | 第31-33页 |
| (一) 可遗传的VIGS | 第31-32页 |
| (二) 小RNA诱导的基因沉默 | 第32页 |
| (三) 寄主诱导的基因沉默 | 第32-33页 |
| 三、影响VIGS效率的因素 | 第33-34页 |
| (一) 靶基因片段的选择 | 第33页 |
| (二) 环境因素 | 第33页 |
| (三) 接种技术 | 第33-34页 |
| 四、VIGS技术的应用 | 第34-37页 |
| (一) 生长发育 | 第34页 |
| (二) 代谢途径 | 第34-35页 |
| (三) 抗病虫反应 | 第35页 |
| (四) 非生物胁迫 | 第35-37页 |
| 第二章 小麦叶片瞬时表达体系的优化 | 第37-47页 |
| 引言 | 第37-38页 |
| 材料和方法 | 第38-41页 |
| 一、植物材料与白粉菌 | 第38页 |
| 二、载体 | 第38-39页 |
| 三、叶片的预处理 | 第39页 |
| 四、质粒的包裹 | 第39-40页 |
| 五、基因枪轰击参数 | 第40页 |
| 六、接种与观察 | 第40页 |
| 七、统计方法 | 第40-41页 |
| 结果与讨论 | 第41-47页 |
| 一、基因枪介导的瞬时表达体系的优化 | 第41-44页 |
| (一) 叶片处理方式 | 第41页 |
| (二) 质粒用量 | 第41-42页 |
| (三) 质粒包裹方法 | 第42-43页 |
| (四) 轰击距离 | 第43-44页 |
| 二、小麦叶片瞬时表达优化体系的应用 | 第44-47页 |
| 第三章 三个抗病基因类似物的VIGS分析 | 第47-55页 |
| 引言 | 第47页 |
| 材料和方法 | 第47-50页 |
| 一、植物材料与白粉菌 | 第47-48页 |
| 二、BSMV沉默载体构建 | 第48-49页 |
| 三、BSMV体外转录与涂抹 | 第49页 |
| (一) 体外转录物的合成 | 第49页 |
| (二) 体外涂抹 | 第49页 |
| 四、RNA的提取和反转录 | 第49-50页 |
| 五、半定量RT-PCR分析 | 第50页 |
| 结果与分析 | 第50-53页 |
| 一、BSMV重组载体的构建 | 第50-51页 |
| 二、BSMV载体的线性化与体外转录 | 第51页 |
| 三、RGA2185、RGA3和RGA11的沉默水平检测 | 第51-52页 |
| 四、RGA2185、RGA3和RGA11的沉默对白粉病抗性的影响 | 第52-53页 |
| 讨论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-69页 |
| 全文总结 | 第69-71页 |
| 发表论文 | 第71页 |