中文摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
英文缩略词 | 第13-15页 |
前言 | 第15-17页 |
第1章 文献综述 | 第17-31页 |
1.1 肾癌治疗研究进展 | 第17-26页 |
1.1.1 手术疗法 | 第17-18页 |
1.1.2 化学疗法 | 第18页 |
1.1.3 基于细胞因子的治疗 | 第18-19页 |
1.1.4 抗体疗法 | 第19-21页 |
1.1.5 基于免疫细胞的治疗 | 第21-23页 |
1.1.6 肿瘤疫苗 | 第23-24页 |
1.1.7 基因治疗 | 第24页 |
1.1.8 放射疗法 | 第24-25页 |
1.1.9 介入疗法 | 第25页 |
1.1.10 中医药疗法 | 第25-26页 |
1.2 miRNA研究进展 | 第26-31页 |
1.2.1 miRNA的发现 | 第26页 |
1.2.2 miRNA的合成及调控机制 | 第26-27页 |
1.2.3 miRNA与肿瘤的关系 | 第27页 |
1.2.4 miRNA与肾癌的关系 | 第27-28页 |
1.2.5 miR-137与PI3K /AKT信号通路 | 第28-31页 |
第2章 实验材料与方法 | 第31-47页 |
2.1 实验材料 | 第31-35页 |
2.1.1 实验样品 | 第31-32页 |
2.1.2 实验设备 | 第32页 |
2.1.3 实验试剂 | 第32-34页 |
2.1.4 溶液配制 | 第34-35页 |
2.1.5 引物设计 | 第35页 |
2.1.6 实验动物 | 第35页 |
2.2 实验方法 | 第35-45页 |
2.2.1 细胞培养 | 第35-36页 |
2.2.2 RNA提取 | 第36-37页 |
2.2.3 RNA逆转录 | 第37-38页 |
2.2.4 RT-qPCR | 第38-39页 |
2.2.5 细胞转染 | 第39页 |
2.2.6 MTT测定细胞活性 | 第39-40页 |
2.2.7 细胞周期检测 | 第40页 |
2.2.8 细胞凋亡检测 | 第40-41页 |
2.2.9 细胞侵袭实验 | 第41页 |
2.2.10 细胞划痕实验 | 第41-42页 |
2.2.11 小鼠荷瘤实验 | 第42页 |
2.2.12 miR-137靶基因推断 | 第42页 |
2.2.13 荧光素酶报告基因检测 | 第42-43页 |
2.2.14 PIK3R3功能的研究 | 第43页 |
2.2.15 蛋白提取 | 第43页 |
2.2.16 BCA测定蛋白浓度 | 第43页 |
2.2.17 SDS-PAGE电泳凝胶配制 | 第43-44页 |
2.2.18 SDS-PAGE分析 | 第44页 |
2.2.19 Western blot | 第44-45页 |
2.3 数据分析 | 第45-47页 |
第3章 实验结果 | 第47-67页 |
3.1 miR-137在肾癌细胞表达情况研究 | 第47-49页 |
3.1.1 miR-137在肾癌细胞系A498、786-O中特异性表达 | 第47页 |
3.1.2 miR-137在肾癌组织与癌旁组织中特异性表达 | 第47-48页 |
3.1.3 miR-137与患者临床指标的关系 | 第48-49页 |
3.2 miR-137的表达对肾癌细胞生物学行为影响 | 第49-57页 |
3.2.1 miR-137转染 786-O细胞 | 第49-50页 |
3.2.2 细胞活力检测 | 第50-51页 |
3.2.3 miR-137对细胞周期和细胞凋亡的影响 | 第51-53页 |
3.2.4 过表达miR-137对细胞侵袭和迁移的影响 | 第53-55页 |
3.2.5 小鼠荷瘤实验结果 | 第55-57页 |
3.3 miR-137抑制肾癌细胞侵袭、迁移能力的分子机制 | 第57-67页 |
3.3.1 miR-137靶序列的确定 | 第57-58页 |
3.3.2 miR-137与PIK3R3基因的结合 | 第58-60页 |
3.3.3 沉默PIK3R3抑制肾癌细胞侵袭迁移 | 第60-62页 |
3.3.4 PIK3R3过表达反转miR-137对肾癌的抑制影响 | 第62-64页 |
3.3.5 PIK3R3在肾癌组织中表达与miR-137表达负相关 | 第64-67页 |
讨论 | 第67-71页 |
结论 | 第71-73页 |
研究创新点 | 第73-75页 |
研究不足及未来研究方向 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-95页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第95-96页 |
致谢 | 第96页 |