| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-20页 |
| 1 蜜蜂球囊菌的增殖及传播 | 第12-13页 |
| 2 蜜蜂球囊菌侵染蜜蜂幼虫时发生的生理特性 | 第13页 |
| 3 蜜蜂球囊菌分子研究及药物防治 | 第13-14页 |
| 4 蜜蜂微孢子虫分类地位的研究 | 第14-16页 |
| 5 侵染方面的研究 | 第16-18页 |
| 6 药物防治 | 第18页 |
| 7 诊断方法的研究 | 第18-20页 |
| 第二章 LAMP检测A.apis的体系优化及与PCR灵敏度的对比 | 第20-39页 |
| 1 材料与方法 | 第20-27页 |
| ·试验材料 | 第20-22页 |
| ·材料 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20-21页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| ·试验方法 | 第22-27页 |
| ·LMAP引物设计与合成 | 第22-23页 |
| ·球囊菌(A.apis)病原的获取及其基因组DNA的提取 | 第23-24页 |
| ·球囊菌(A.apis)培养及PCR验证 | 第23页 |
| ·球囊菌(A.apis)基因组DNA的提取 | 第23-24页 |
| ·LAMP法检测球囊菌(A.apis)体系的建立 | 第24-25页 |
| ·LAMP法检测球囊菌(A.apis)体系的优化 | 第25页 |
| ·LAMP法检测A.apis体系的优化 | 第25页 |
| ·LAMP特异性验证 | 第25页 |
| ·LAMP产物酶切验证 | 第25页 |
| ·引物必要性试验 | 第25-26页 |
| ·LMAP与PCR灵敏度验证 | 第26页 |
| ·临床验证 | 第26-27页 |
| 2 试验结果与分析 | 第27-38页 |
| ·蜜蜂球囊菌基因组DNA的提取与验证 | 第27页 |
| ·反应体系的优化 | 第27-38页 |
| ·镁离子浓度优化 | 第28页 |
| ·dNTPs浓度优化试验 | 第28-29页 |
| ·内引物FIB/BIF浓度优化 | 第29-30页 |
| ·甜菜碱浓度优化 | 第30-31页 |
| ·温度优化 | 第31-32页 |
| ·时间优化 | 第32-33页 |
| ·特异性和酶切试验 | 第33-34页 |
| ·引物必要性试验 | 第34-35页 |
| ·灵敏度和临床检测试验 | 第35-38页 |
| 3 结论与讨论 | 第38-39页 |
| 第三章 LAMP检测N.ceranae的体系优化及与PCR灵敏度的对比 | 第39-55页 |
| 1 材料和方法 | 第39-43页 |
| ·试验材料 | 第39页 |
| ·材料 | 第39页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·主要仪器 | 第39页 |
| ·试验方法 | 第39-43页 |
| ·LMAP引物设计与合成 | 第39-40页 |
| ·蜜蜂微孢子虫(Nosema spp.)的获取及基因组DNA的提取 | 第40-41页 |
| ·蜜蜂微孢子虫(Nosema spp.)获取及PCR验证 | 第40-41页 |
| ·蜜蜂微孢子虫(Nosema spp.)基因组DNA的提取 | 第41页 |
| ·LAMP法检测微孢子虫(Nosema spp.)体系的建立 | 第41页 |
| ·LAMP法检测东方蜜蜂微孢子虫(N.ceranae)体系的优化 | 第41页 |
| ·LAMP法检测N.ceranae体系优化 | 第41页 |
| ·LAMP特异性验证 | 第41-42页 |
| ·LAMP产物酶切验证 | 第42页 |
| ·引物必要性试验 | 第42页 |
| ·LMAP与PCR灵敏度验证 | 第42页 |
| ·临床验证 | 第42-43页 |
| 2 试验结果与分析 | 第43-54页 |
| ·N.cerana和N.apis的确定 | 第43-54页 |
| ·镁离子浓度优化 | 第43-44页 |
| ·甜菜碱浓度优化 | 第44-45页 |
| ·dNTPs浓度优化 | 第45-46页 |
| ·内引物FIB/BIF浓度优化 | 第46-47页 |
| ·温度优化 | 第47-48页 |
| ·时间优化 | 第48-49页 |
| ·特异性和酶切试验 | 第49-50页 |
| ·引物必要性试验 | 第50-51页 |
| ·灵敏度试验 | 第51-52页 |
| ·临床检测 | 第52-54页 |
| 3 结论与讨论 | 第54-55页 |
| 第四章 总结与研究展望 | 第55-60页 |
| 1 讨论 | 第55-58页 |
| ·引物设计和建立的LAMP体系的特点 | 第55-57页 |
| ·A.apis引物设计问题 | 第55页 |
| ·N.ceranae引物设计问题 | 第55-56页 |
| ·LAMP检测技术特点 | 第56-57页 |
| ·LAMP检测中应特别注意的问题 | 第57页 |
| ·特异性 | 第57-58页 |
| ·试验中的污染问题 | 第58页 |
| ·成本和环引物问题 | 第58页 |
| 2 展望 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
