| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 第一章 储存蛋白hexamerin的研究进展 | 第13-20页 |
| 1 蜜蜂储存蛋白 | 第13-16页 |
| ·hexamerin分子特征概况 | 第13-14页 |
| ·HEX110 | 第13-14页 |
| ·HEX70a | 第14页 |
| ·HEX70b | 第14页 |
| ·HEX70c | 第14页 |
| ·表达特征及功能 | 第14-15页 |
| ·HEX110 | 第14-15页 |
| ·HEX70a | 第15页 |
| ·HEX70b | 第15页 |
| ·HEX70c | 第15页 |
| ·调控机制 | 第15-16页 |
| ·其他生物学功能 | 第16页 |
| 2 RNA干扰技术 | 第16-18页 |
| ·RNA干扰的作用机理 | 第16-17页 |
| ·蜜蜂的RNAi | 第17-18页 |
| 3 研究的目的意义及主要研究内容 | 第18-20页 |
| 第二章 不同发育时期三型蜂储存蛋白的比较分析 | 第20-33页 |
| 1 材料与方法 | 第20-24页 |
| ·供试昆虫 | 第20页 |
| ·试剂和仪器 | 第20-23页 |
| ·样本制备 | 第23-24页 |
| ·蛋白提取 | 第23-24页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第24页 |
| ·基因表达谱层面的分析 | 第24页 |
| 2 结果与分析 | 第24-30页 |
| ·工蜂 | 第24-25页 |
| ·蜂王 | 第25-26页 |
| ·雄蜂 | 第26-27页 |
| ·三型蜂变态前后 | 第27-28页 |
| ·基因表达谱层面的分析 | 第28-30页 |
| 3 结论与讨论 | 第30-33页 |
| 第三章 dsRNA合成体系构建 | 第33-49页 |
| 1 材料和方法 | 第33-42页 |
| ·供试昆虫 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33-34页 |
| ·主要仪器 | 第34-35页 |
| ·试验方法 | 第35-42页 |
| ·RNA提取与cDNA合成 | 第35-36页 |
| ·目的基因的克隆 | 第36-38页 |
| ·引物的设计与合成 | 第36页 |
| ·PCR产物的纯化回收 | 第36-37页 |
| ·连接反应 | 第37页 |
| ·感受态细胞制备 | 第37-38页 |
| ·阳性质粒筛选 | 第38页 |
| ·试剂盒合成dsRNA | 第38-40页 |
| ·HT115细菌株和L4440质粒表达dsRNA | 第40-42页 |
| ·dsRNA表达载体的构建 | 第40-42页 |
| ·表达载体转化大肠杆菌HT115 | 第42页 |
| ·诱导表达dsRNA | 第42页 |
| ·提取诱导表达的RNA | 第42页 |
| 2 结果与分析 | 第42-47页 |
| ·PCR产物琼脂糖凝胶电泳 | 第42-43页 |
| ·酶切产物琼脂糖凝胶电泳 | 第43-44页 |
| ·试剂盒合成dsRNA | 第44-45页 |
| ·细菌诱导合成dsRNA | 第45-47页 |
| 3 结论与讨论 | 第47-49页 |
| 第四章 RNAi饲喂试验 | 第49-58页 |
| 1 材料与方法 | 第49-52页 |
| ·供试昆虫 | 第49页 |
| ·试剂和仪器 | 第49-50页 |
| ·试验方法 | 第50-52页 |
| ·意大利蜜蜂幼虫的人工培养 | 第50页 |
| ·用hex110 dsRNA(试剂盒)饲喂工蜂幼虫(实验室) | 第50-51页 |
| ·用hex70b dsRNA(试剂盒)饲喂雄蜂(实验室) | 第51页 |
| ·用hex70b dsRNA(试剂盒)饲喂雄蜂(蜂箱内) | 第51页 |
| ·用hex70b dsRNA(试剂盒)饲喂蜂王(蜂箱内) | 第51-52页 |
| ·数据统计与分析 | 第52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-56页 |
| ·用hex110 dsRNA(试剂盒)饲喂工蜂幼虫(实验室) | 第52-53页 |
| ·用hex70b dsRNA(试剂盒)饲喂雄蜂(实验室) | 第53-54页 |
| ·用hex70b dsRNA(试剂盒)饲喂雄蜂(蜂箱内) | 第54-55页 |
| ·用hex70b dsRNA(试剂盒)饲喂蜂王(蜂箱内) | 第55-56页 |
| 3 结论与讨论 | 第56-58页 |
| 第五章 总结与展望 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 附录 | 第66-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
