位点特异性重组系统在甘蓝型油菜中的建立
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 综述 | 第9-15页 |
| ·我国油菜产业发展现状 | 第9页 |
| ·植物基因工程研究进展 | 第9-12页 |
| ·植物转基因方法 | 第9-11页 |
| ·植物转基因基本流程 | 第11-12页 |
| ·植物转基因发展现状 | 第12页 |
| ·植物转基因安全评价 | 第12页 |
| ·位点特异性重组系统在植物中的研究进展 | 第12-15页 |
| ·位点特异性重组系统的定义 | 第13页 |
| ·位点特异性重组系统的作用原理 | 第13-14页 |
| ·位点特异性重组系统在植物中的应用及研究意义 | 第14-15页 |
| 2 实验材料和方法 | 第15-26页 |
| ·实验材料 | 第15页 |
| ·试验方法 | 第15-26页 |
| ·载体构建方法策略 | 第15-18页 |
| ·Cre40载体具体构建策略 | 第16页 |
| ·Z1载体的构建 | 第16-18页 |
| ·目的基因导入甘蓝型汕菜 | 第18-22页 |
| ·农杆菌介导转化法的技术路线 | 第19页 |
| ·无菌苗的获得 | 第19-20页 |
| ·转基因菌株的活化 | 第20页 |
| ·浸染与共培培养 | 第20页 |
| ·延迟培养 | 第20页 |
| ·筛选培养 | 第20-21页 |
| ·生根培养 | 第21页 |
| ·扩繁培养 | 第21页 |
| ·移栽驯化 | 第21-22页 |
| ·成苗分子生物学检测 | 第22-26页 |
| ·普通PCR检测 | 第22页 |
| ·PCR-southern blot检测 | 第22-24页 |
| ·RNA水平检测表达量 | 第24-26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-33页 |
| ·目的基因导入甘蓝型油菜结果 | 第26-28页 |
| ·无菌苗获得结果 | 第26页 |
| ·筛选压力确定结果 | 第26-27页 |
| ·筛选培养结果 | 第27页 |
| ·生根培养结果 | 第27页 |
| ·扩繁及移栽驯化结果 | 第27-28页 |
| ·转基因筛选成苗结果 | 第28-29页 |
| ·成苗分子生物学检测 | 第29-33页 |
| ·普通PCR检测 | 第29页 |
| ·PCR-southern blot检测 | 第29-30页 |
| ·半定量法检测RNA水平表达量 | 第30-33页 |
| 4 讨论 | 第33-36页 |
| ·载体构建 | 第33页 |
| ·甘蓝型汕菜农杆菌浸染转基因体系 | 第33-34页 |
| ·阳性苗检测 | 第34-35页 |
| ·实验未来发展与后期工作 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-42页 |
| 附录 | 第42-50页 |
| 致谢 | 第50页 |
