| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 縮略词对照表 | 第12-14页 |
| 前言 | 第14-19页 |
| 第一章 人源过氧化氢酶的重组表达和稳定性研究 | 第19-60页 |
| 一 材料 | 第20-28页 |
| 二 方法 | 第28-42页 |
| 三 结果 | 第42-57页 |
| (一) 重组人源过氧化氢酶表达菌株的构建、筛选和稳定性研究 | 第42-49页 |
| 1. 人源过氧化氢酶基因的获取 | 第42页 |
| 2. pMD19-T-CAT克隆的构建和鉴定 | 第42-44页 |
| 3. pPICZα-CAT重组质粒的鉴定 | 第44-46页 |
| 4. 过氧化氢酶活力标准曲线的绘制 | 第46页 |
| 5. 重组酵母菌株的鉴定和高表达菌株的筛选 | 第46-47页 |
| 6. 菌株稳定性研究 | 第47-49页 |
| (二) 重组人源过氧化氢酶的发酵 | 第49-55页 |
| 1. BS培养基发酵条件优化 | 第49-53页 |
| 2. 罐批发酵 | 第53-55页 |
| (三) 重组人源过氧化氢酶的分离纯化和鉴定 | 第55-57页 |
| 1. 蛋白的分离纯化 | 第55-57页 |
| 2. 重组蛋白的检测和鉴定 | 第57页 |
| 四 本章小结和讨论 | 第57-60页 |
| 第二章 重组人源过氧化氢酶的PEG修饰和修饰产物性质研究 | 第60-76页 |
| 一 材料 | 第61-62页 |
| 二 方法 | 第62-64页 |
| 三 结果 | 第64-74页 |
| (一) 人源过氧化氢酶的PEG修饰条件研究 | 第64-70页 |
| 1 反应体系pH值对修饰产物活力的影响 | 第65页 |
| 2 反应温度对修饰产物的影响 | 第65-67页 |
| 3 反应时间对修饰产物的影响 | 第67-68页 |
| 4 人源过氧化氢酶与PEG的配比对修饰产物的影响 | 第68-69页 |
| 5 人源过氧化氢酶浓度对修饰产物的影响 | 第69-70页 |
| (二) PEG主要修饰产物的分离纯化 | 第70-71页 |
| (三) PEG修饰主要产物性质研究 | 第71-74页 |
| 1 修饰前后产物比活力比较 | 第71页 |
| 2 热稳定性比较 | 第71-72页 |
| 3 pH稳定性比较 | 第72-73页 |
| 4 酶动力学常数 | 第73页 |
| 5 血浆半衰期比较 | 第73-74页 |
| 四 小结和讨论 | 第74-76页 |
| 第三章 PEG修饰的人源过氧化氢酶对流感病毒所致小鼠急性肺炎的作用和机制研究 | 第76-110页 |
| 一 材料 | 第77-79页 |
| 二 方法 | 第79-88页 |
| 三 结果 | 第88-105页 |
| (一) 总体药效评价 | 第88-93页 |
| 1 感染和给药后各组小鼠体重和死亡率的变化 | 第88-90页 |
| 2 肺部病理状态评价 | 第90-92页 |
| 3 对肺部病毒滴度的影响 | 第92-93页 |
| (二) 保护机制研究 | 第93-105页 |
| 1 抗氧化状态评价 | 第93-97页 |
| 2 对免疫系统的作用研究 | 第97-102页 |
| 3 对TLR-NF-κB信号通路的影响 | 第102-105页 |
| 四 本章小结和讨论 | 第105-110页 |
| 课题创新性 | 第110-111页 |
| 总结和展望 | 第111-115页 |
| 参考文献 | 第115-121页 |
| 综述：病毒感染和氧化应激 | 第121-135页 |
| 参考文献 | 第130-135页 |
| 论文发表情况 | 第135-136页 |
| 致谢 | 第136-137页 |
| 附录 | 第137-140页 |
