| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-15页 |
| ·基因治疗概述 | 第8-9页 |
| ·基因治疗 | 第8页 |
| ·基因载体 | 第8-9页 |
| ·聚阳离子非病毒基因载体 | 第9-12页 |
| ·聚阳离子非病毒基因载体介导基因传递的一般过程 | 第9页 |
| ·传统聚阳离子非病毒基因载体 | 第9-12页 |
| ·智能聚阳离子非病毒基因载体 | 第12-14页 |
| ·智能聚阳离子非病毒基因载体概述 | 第12-13页 |
| ·pH 敏感聚阳离子非病毒基因载体 | 第13页 |
| ·含原酸酯基团的聚阳离子非病毒基因载体 | 第13-14页 |
| ·选题思路及研究内容 | 第14-15页 |
| ·选题思路 | 第14页 |
| ·研究内容 | 第14-15页 |
| 第二章 甲基丙烯酰胺原酸酯单体(MAOE)及其聚合物(PMAOE)的制备与表征 | 第15-30页 |
| ·引言 | 第15页 |
| ·实验试剂和仪器 | 第15-17页 |
| ·实验试剂 | 第15-16页 |
| ·实验仪器 | 第16-17页 |
| ·实验方法 | 第17-20页 |
| ·试剂纯化 | 第17页 |
| ·2,2,2-三氟-N-(2,3-二羟基丙醇)乙酰胺(中间产物 1)的合成 | 第17页 |
| ·2,2,2-三氟-N-(2-甲氧基-[1,3]二噁烷-4-亚甲基)乙酰胺(中间产物 2)合成 | 第17-18页 |
| ·对甲基苯磺酸二甲氨基乙醇盐的合成 | 第18页 |
| ·4-氨基甲基-2-N,N-二甲基氨基乙氧基-[1,3]-二噁烷(中间产物 3)的合成 | 第18页 |
| ·甲基丙烯酰胺原酸酯单体(MAOE)的合成 | 第18-19页 |
| ·甲基丙烯酰胺原酸酯阳离子聚合物(PMAOE)的合成 | 第19-20页 |
| ·表征 | 第20-21页 |
| ·核磁共振检测 | 第20页 |
| ·质谱检测 | 第20页 |
| ·凝胶渗透色谱(GPC)检测 | 第20页 |
| ·甲基丙烯酰胺原酸酯阳离子聚合物(PMAOE)的 pH 敏感性检测 | 第20-21页 |
| ·结果与分析 | 第21-28页 |
| ·中间产物 1 的1H NMR 图谱分析 | 第21-22页 |
| ·中间产物 2 的1H NMR 图谱分析 | 第22页 |
| ·中间产物 3 的1H NMR 图谱分析 | 第22页 |
| ·甲基丙烯酰胺原酸酯单体(MAOE)的核磁图谱及质谱分析 | 第22-23页 |
| ·甲基丙烯酰胺原酸酯阳离子聚合物(PMAOE)的1H NMR 图谱分析 | 第23-24页 |
| ·甲基丙烯酰胺原酸酯阳离子聚合物(PMAOE)的 GPC 结果分析 | 第24-25页 |
| ·甲基丙烯酰胺原酸酯阳离子聚合物(PMAOE)的 pH 敏感性结果分析 | 第25-28页 |
| ·本章小结 | 第28-30页 |
| 第三章 PMAOE/DNA 复合物的制备与表征 | 第30-42页 |
| ·引言 | 第30页 |
| ·实验材料 | 第30-31页 |
| ·菌种和质粒 | 第30页 |
| ·实验试剂 | 第30-31页 |
| ·实验仪器 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-35页 |
| ·菌体的培养与质粒提取 | 第31-33页 |
| ·复合物的制备 | 第33-34页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第34页 |
| ·DNase I 降解实验 | 第34页 |
| ·肝素置换实验 | 第34页 |
| ·EB 排阻实验 | 第34-35页 |
| ·复合物的粒径和 zeta 电势测量 | 第35页 |
| ·复合物稳定性实验 | 第35页 |
| ·结果与分析 | 第35-41页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳阻滞实验 | 第35-36页 |
| ·DNase I 降解实验 | 第36-37页 |
| ·肝素置换实验 | 第37-38页 |
| ·EB 排阻实验 | 第38-39页 |
| ·复合物的粒径和 zeta 电势测量 | 第39-40页 |
| ·复合物稳定性实验 | 第40-41页 |
| ·本章小结 | 第41-42页 |
| 第四章 PMAOE 聚阳离子载体介导的体外基因传递及细胞毒性评价 | 第42-52页 |
| ·引言 | 第42页 |
| ·实验试剂耗材和仪器 | 第42-44页 |
| ·细胞系 | 第42-43页 |
| ·实验试剂 | 第43页 |
| ·实验仪器 | 第43-44页 |
| ·细胞的培养 | 第44-45页 |
| ·实验所需试剂的配制 | 第44页 |
| ·细胞培养 | 第44-45页 |
| ·实验方法 | 第45-46页 |
| ·细胞毒性实验 | 第45页 |
| ·体外基因传递实验 | 第45-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-51页 |
| ·PMAOE 聚阳离子基因载体的细胞毒性 | 第46-47页 |
| ·PMAOE 聚阳离子载体的基因传递效率 | 第47-51页 |
| ·本章小结 | 第51-52页 |
| 主要结论与展望 | 第52-54页 |
| 主要结论 | 第52页 |
| 展望 | 第52-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第61页 |