| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 前言 | 第9-16页 |
| ·香蕉枯萎病的生物学特性 | 第9-10页 |
| ·香蕉枯萎病的危害 | 第10-11页 |
| ·香蕉枯萎病菌的研究进展 | 第11-12页 |
| ·基因敲除技术 | 第12-13页 |
| ·Foste12基因研究背景 | 第13-16页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-50页 |
| ·材料、试剂和仪器 | 第16-19页 |
| ·材料 | 第16-17页 |
| ·试剂 | 第17-19页 |
| ·仪器 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-50页 |
| ·Foste12基因的PCR和RT-PCR扩增 | 第19-21页 |
| ·Foste12基因同源臂的克隆 | 第21-26页 |
| ·Foste12基因敲除载体的构建 | 第26-33页 |
| ·香蕉枯萎病原生质体转化 | 第33-34页 |
| ·转化子的鉴定 | 第34-39页 |
| ·Foste12基因突变体的表型观察 | 第39-43页 |
| ·Foste12基因突变体致病力测定 | 第43-45页 |
| ·根部附着试验 | 第45页 |
| ·根部侵染试验 | 第45页 |
| ·Foste12基因突变体粗毒素测定试验 | 第45页 |
| ·Foste12基因突变体中致病相关因子转录水平检测 | 第45-46页 |
| ·Foste12基因功能回复验证 | 第46-50页 |
| 3 结果与分析 | 第50-70页 |
| ·目的基因的PCR和RT-PCR扩增 | 第50页 |
| ·同源臂的PCR扩增 | 第50-51页 |
| ·同源臂的PCR克隆 | 第51页 |
| ·FOC4-Foste12-A-pCT74载体的酶切鉴定 | 第51-52页 |
| ·FOC4-Foste12-A-pCT74-B载体的酶切鉴定 | 第52-53页 |
| ·原生质体的制备 | 第53页 |
| ·转化子的分离纯化及鉴定 | 第53-57页 |
| ·转化子的分离纯化 | 第53-54页 |
| ·转化子的PCR初筛 | 第54-56页 |
| ·Southern检测 | 第56页 |
| ·RT-PCR检测 | 第56-57页 |
| ·△Foste12的表型分析 | 第57-61页 |
| ·荧光显微镜下观察Foste12基因缺失突变体 | 第57-58页 |
| ·菌落形态观察和生长速率测定 | 第58-59页 |
| ·产孢率测定 | 第59页 |
| ·萌发试验 | 第59-60页 |
| ·纤维素酶活力平板测定试验 | 第60页 |
| ·果胶酶活力平板测定试验 | 第60-61页 |
| ·细胞壁降解酶活力测定 | 第61-63页 |
| ·葡糖糖标准曲线 | 第61页 |
| ·麦芽糖标准曲线 | 第61-62页 |
| ·半乳糖醛酸标准曲线 | 第62页 |
| ·细胞壁降解酶活力比较 | 第62-63页 |
| ·致病性试验 | 第63-65页 |
| ·叶片的致病性试验 | 第63-64页 |
| ·离体香蕉假茎侵染试验 | 第64页 |
| ·香蕉苗浸根致病性试验 | 第64-65页 |
| ·盆栽致病性试验 | 第65页 |
| ·△Foste12根部附着和侵染试验 | 第65-67页 |
| ·△Foste12根部附着试验 | 第65-66页 |
| ·根部侵染试验 | 第66-67页 |
| ·Foste12基因突变体粗毒素测定试验 | 第67-68页 |
| ·Foste12基因突变体中致病相关因子转录水平检测 | 第68页 |
| ·G418抗性筛选试验 | 第68-69页 |
| ·互补载体的构建 | 第69-70页 |
| ·补片段的PCR扩增 | 第69-70页 |
| ·互补载体酶切验证 | 第70页 |
| 4 讨论 | 第70-75页 |
| ·敲除片段的获得 | 第70-71页 |
| ·原生质体制备 | 第71页 |
| ·转化子的分离纯化 | 第71-72页 |
| ·转化子的验证 | 第72页 |
| ·Foste12基因缺失对香蕉枯萎病菌表型的影响 | 第72-73页 |
| ·Foste12基因缺失对香蕉枯萎病菌致病力的影响 | 第73-74页 |
| ·Foste12基因缺失对对几种细胞壁降解酶的影响 | 第74页 |
| ·Foste12基因缺失对粗毒素的影响 | 第74页 |
| ·Foste12基因突变体中致病相关因子转录水平检测 | 第74-75页 |
| ·转化子的互补实验 | 第75页 |
| 5 结论 | 第75-77页 |
| 6 参考文献 | 第77-84页 |
| 附件 | 第84-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
