| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-35页 |
| ·蛋白质内含子的发现 | 第15-16页 |
| ·蛋白质内含子的分类及结构特征 | 第16-19页 |
| ·标准型蛋白质内含子 | 第16-17页 |
| ·微小型蛋白质内含子 | 第17页 |
| ·断裂型蛋白质内含子 | 第17-19页 |
| ·蛋白质内含子催化蛋白质剪接的机制 | 第19-23页 |
| ·蛋白质顺式剪接的催化反应机制 | 第19-22页 |
| ·蛋白质反式剪接的催化反应机制 | 第22-23页 |
| ·蛋白质内含子的应用 | 第23-30页 |
| ·蛋白质的纯化 | 第23-26页 |
| ·蛋白质内含子应用于蛋白质的环化 | 第26页 |
| ·毒性蛋白的生产 | 第26-27页 |
| ·蛋白质反式剪接在基因治疗中的应用 | 第27-28页 |
| ·蛋白质内含子用于目的蛋白的活性控制 | 第28页 |
| ·蛋白质内含子介导的表达蛋白质连接 | 第28页 |
| ·蛋白质内含子用于蛋白质同位素标记 | 第28-30页 |
| ·总结 | 第30-31页 |
| 参考文献 | 第31-35页 |
| 第二章 材料和方法 | 第35-51页 |
| ·实验材料 | 第35-40页 |
| ·蛋白质内含子 | 第35页 |
| ·实验菌株 | 第35-36页 |
| ·实验试剂 | 第36-37页 |
| ·常用试剂的配方与配制方法 | 第37-40页 |
| ·实验技术 | 第40-51页 |
| ·大肠杆菌DH5α或BL21(DE3)感受态细胞的制备 | 第40-42页 |
| ·质粒的转化方法 | 第42页 |
| ·质粒的提取 | 第42-43页 |
| ·聚合酶链式反应 | 第43-45页 |
| ·DNA凝胶回收 | 第45-46页 |
| ·DNA酶切与连接 | 第46页 |
| ·重组蛋白质的诱导表达 | 第46-47页 |
| ·蛋白质的纯化 | 第47-48页 |
| ·蛋白质内含子的体外剪接 | 第48页 |
| ·蛋白质变性凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第48-49页 |
| ·蛋白印迹实验 | 第49-51页 |
| 第三章 新型断裂蛋白质内含子SspDnaX的蛋白质反式剪接与交叉反应 | 第51-65页 |
| ·引言 | 第51-53页 |
| ·材料与方法 | 第53-54页 |
| ·表达质粒的构建 | 第53页 |
| ·蛋白质的表达与纯化、体内或体外反应 | 第53-54页 |
| ·蛋白质内含子结构的计算机模拟 | 第54页 |
| ·结果 | 第54-58页 |
| ·讨论 | 第58-62页 |
| 参考文献 | 第62-65页 |
| 第四章 断裂型蛋白质内含子Ssp GyrB的蛋白质反式剪接研究 | 第65-75页 |
| ·引言 | 第65-67页 |
| ·材料与方法 | 第67-68页 |
| ·表达质粒的构建 | 第67页 |
| ·蛋白质的表达与纯化、体内或体外反应及检测 | 第67-68页 |
| ·结果 | 第68-71页 |
| ·讨论 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-75页 |
| 第五章 多种S1型断裂蛋白质内含子之间的体内交叉反应 | 第75-83页 |
| ·引言 | 第75-76页 |
| ·材料与方法 | 第76-77页 |
| ·表达质粒的构建 | 第76页 |
| ·大肠杆菌体内蛋白质的表达及反应产物检测 | 第76-77页 |
| ·结果 | 第77-79页 |
| ·讨论 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-83页 |
| 第六章 应用多种新型断裂蛋白质内含子的体外蛋白质反式归接系统及应用 | 第83-100页 |
| ·引言 | 第83-84页 |
| ·材料与方法 | 第84-85页 |
| ·质粒的构建 | 第84-85页 |
| ·蛋白质的表达、纯化与体外反应 | 第85页 |
| ·结果 | 第85-95页 |
| ·讨论 | 第95-98页 |
| 参考文献 | 第98-100页 |
| 第七章 结论和展望 | 第100-103页 |
| ·结论 | 第100-102页 |
| ·展望 | 第102-103页 |
| 博士期间发表论文和参加科研情况说明 | 第103-104页 |
| 已发表论文 | 第103页 |
| 参与的科研项目 | 第103-104页 |
| 致谢 | 第104-106页 |
| 附录：符号说明 | 第106页 |
