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生防酵母(C.laurentii)诱导条件下LePR5基因表达、功能验证及调控方式的探索

致谢第1-12页
中文摘要第12-15页
Abstract第15-19页
简写对照表第19-21页
第一章 文献综述第21-37页
 1. 前言第21-22页
 2. 果蔬采后病害生物防治方法及机理第22-24页
 3. 植物诱导抗性第24-27页
 4. 抗性相关蛋白PRs第27-32页
 5. 抗性相关基因的转录调控第32-34页
 6. 本论文研究的目的意义和总体研究设想第34-37页
第二章 LePR5基因对罗伦隐球酵母诱导的响应表达及LePR5蛋白序列的分析第37-50页
 1. 前言第37-38页
 2. 材料方法第38-43页
   ·材料第38-39页
   ·实验方法第39-43页
 3. 实验结果第43-47页
   ·罗伦隐球酵母对樱桃番茄果实采后黑腐病的抑制效果第43-44页
   ·qRT-PCR分析LePR5 mRNA表达水平第44-45页
   ·LePR5蛋白氨基酸序列分析及3D结构模型分析第45-47页
 4. 讨论第47-50页
第三章 LePR5基因的克隆、表达载体的构建及LePR5蛋白抗菌活性分析第50-71页
 1. 前言第50-51页
 2. 材料方法第51-64页
   ·材料第51-54页
   ·实验方法第54-64页
 3. 实验结果第64-69页
   ·LePR5基因CDS区域序列克隆第64-65页
   ·PMD-LePR5重组载体的构建及鉴定第65-66页
   ·PET-LePR5重组载体的构建及鉴定第66页
   ·LePR5重组蛋白的异源表达及鉴定第66-68页
   ·LePR5重组蛋白的抗菌功能分析in vitro第68-69页
   ·LePR5重组蛋白处理对樱桃番茄果实黑腐病的影响第69页
 4. 讨论第69-71页
第四章 LePR5基因启动子区域序列的同源克隆及启动子区域序列活性鉴定第71-89页
 1. 前言第71-72页
 2. 材料和方法第72-81页
   ·材料第72-74页
   ·实验方法第74-81页
 3. 实验结果第81-87页
   ·LePR5基因5’端上游区域序列同源克隆结果第81-82页
   ·TOPO反应及结果验证第82页
   ·LR反应及结果验证第82-83页
   ·原生质体中瞬时表达GFP融合蛋白检测目的片段启动子活性第83-84页
   ·农杆菌电击转化结果检验第84页
   ·LePR5基因5’端上游序列在樱桃番茄中的启动子功能研究第84-87页
 4. 讨论第87-89页
第五章 LePR5基因启动子区域序列motif、转录因子分析及调控关系研究第89-110页
 1. 前言第89-90页
 2. 材料方法第90-97页
   ·材料第90-91页
   ·实验方法第91-97页
 3. 实验结果第97-106页
   ·LePR5基因启动子序列分析第97-98页
   ·结合基因芯片结果筛选调控LePR5基因表达的转录因子第98页
   ·Pti5在C.laurentii及A.alternata诱导条件下转录水平表达量分析第98-99页
   ·Pti5基因CDS区域序列克隆第99-100页
   ·PMD-Pti5重组载体的构建及鉴定第100页
   ·PET-Pti5重组载体的构建及鉴定第100-102页
   ·Pti5转录因子蛋白的异源表达及鉴定第102-103页
   ·含有GCC box元件LePR5基因启动子片段序列克隆及探针准备第103-104页
   ·EMSA检测Pti5转录因子蛋白与LePR5基因启动子片段序列结合情况第104-105页
   ·Pti5及LePR5在MeJA及MeJA结合C.laurentii诱导条件下转录水平表达量分析第105-106页
 4. 讨论第106-110页
第六章 罗伦隐球酵母和MeJA结合处理对柑橘PR5基因表达与柑橘绿霉病控制效果的影响第110-127页
 1. 前言第110-111页
 2. 材料方法第111-117页
   ·材料第111-113页
   ·实验方法第113-117页
 3. 实验结果第117-123页
   ·不同浓度MeJA对柑橘果实绿霉病的预防性抑制的效果第117页
   ·MeJA对C.laurentii生长的影响in vitro第117页
   ·拮抗酵母单独处理及结合MeJA处理对柑橘果实绿霉病的抑制效果第117-120页
   ·MeJA对C.laurentii在柑橘果实伤口生长的影响第120页
   ·MeJA对P.digitatum孢子萌发的影响(in vitro)第120-121页
   ·MeJA和C.laurentii处理对柑橘果实果皮组织抗性相关酶的影响第121-122页
   ·qRT-PCR分析柑橘果实果皮组织PR5基因mRNA的表达水平第122-123页
 4. 讨论第123-127页
第七章 本论文的主要研究成果及后续设想第127-131页
 1. 本论文的主要研究成果第127-129页
 2. 创新点第129页
 3. 后续研究展望第129-131页
参考文献第131-151页
作者简介第151页
攻读博士期间论文及成果第151页

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