| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-21页 |
| ·脂代谢的研究进展 | 第13-14页 |
| ·羊奶中脂代谢的研究进展 | 第13页 |
| ·组织或细胞中脂代谢的研究进展 | 第13-14页 |
| ·MicroRNA调控脂代谢的研究进展 | 第14-16页 |
| ·MicroRNA的生成及调控机制 | 第14-15页 |
| ·MicroRNA调控脂代谢的研究进展 | 第15-16页 |
| ·MicroRNA表达谱的研究 | 第16-18页 |
| ·MiR-200家族研究进展 | 第18-20页 |
| ·MiR-200家族的生物学特性 | 第18页 |
| ·MiR-200家族的功能 | 第18-19页 |
| ·MiR-200家族与脂代谢 | 第19-20页 |
| ·MiR-200a与脂代谢的研究进展 | 第20页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| 第二章 MiR-200家族在西农萨能奶山羊乳腺组织中的表达分析 | 第21-29页 |
| ·材料与方法 | 第21-25页 |
| ·试验材料和样品采集 | 第21页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第21页 |
| ·引物设计 | 第21-22页 |
| ·血液基因组DNA的提取 | 第22页 |
| ·MiR-200家族前体(pri-)的克隆 | 第22-23页 |
| ·组织中miRNA的提取 | 第23页 |
| ·MiRNA cDNA第一条链合成 | 第23-24页 |
| ·定量PCR | 第24-25页 |
| ·结果与分析 | 第25-28页 |
| ·血液基因组DNA的提取 | 第25页 |
| ·乳腺组织RNA的提取检测 | 第25页 |
| ·MiR-200家族的克隆及序列分析 | 第25页 |
| ·Pri-miR-200序列的克隆 | 第25-27页 |
| ·MiR-200家族在西农萨能奶山羊泌乳期及干奶期乳腺组织中的表达检测 | 第27-28页 |
| ·讨论 | 第28页 |
| ·山羊miR-200家族及其前体克隆的重要性 | 第28页 |
| ·MiR-200家族的表达规律 | 第28页 |
| ·小结 | 第28-29页 |
| 第三章 MiR-200家族成员表达量及其与乳成分含量的关联分析 | 第29-37页 |
| ·材料与方法 | 第29-31页 |
| ·试验材料和样品采集 | 第29页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第29页 |
| ·血液基因组DNA的提取及引物设计 | 第29-30页 |
| ·MiR-200家族clusters的克隆 | 第30页 |
| ·组织中miRNA的提取、miRNA cDNA第一条链合成及定量 | 第30页 |
| ·乳成分分析 | 第30页 |
| ·靶基因预测及序列分析 | 第30页 |
| ·关联分析 | 第30-31页 |
| ·结果与分析 | 第31-35页 |
| ·MiR-200家族成员之间的关联分析 | 第31-32页 |
| ·MiR-200家族clusters的克隆 | 第32页 |
| ·MiR-200家族成员表达量与10只羊乳成分含量的关联分析 | 第32-33页 |
| ·MiR-200a/miR-141靶基因预测及序列分析 | 第33-34页 |
| ·JAK-STAT信号通路相关基因的检测 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| ·山羊miR-200家族clusters克隆的分析 | 第35页 |
| ·关联分析 | 第35-36页 |
| ·MiR-200a/MiR-141对靶基因的调控 | 第36页 |
| ·小结 | 第36-37页 |
| 第四章 MiR-200a对脂类代谢的调控作用研究 | 第37-48页 |
| ·材料与方法 | 第37-41页 |
| ·细胞培养所需材料 | 第37页 |
| ·仪器及设备 | 第37页 |
| ·乳腺上皮细胞的培养 | 第37-38页 |
| ·细胞转染效率的检测 | 第38页 |
| ·细胞RNA的提取及反转录 | 第38-39页 |
| ·MiR-200家族的定量PCR检测 | 第39页 |
| ·细胞中脂代谢相关基因的检测 | 第39-40页 |
| ·细胞中脂滴含量检测 | 第40-41页 |
| ·细胞中甘油三酯、胆固醇含量检测 | 第41页 |
| ·细胞生长测定 | 第41页 |
| ·结果与分析 | 第41-46页 |
| ·MiR-200a inhibitor转染效率和细胞状态的检测 | 第41-42页 |
| ·细胞中总RNA的提取检测 | 第42页 |
| ·MiR-200a表达抑制对miR-200家族的影响 | 第42-43页 |
| ·MiR-200a表达抑制对脂代谢相关基因的影响 | 第43页 |
| ·MiR-200a表达抑制对脂滴含量的影响 | 第43-44页 |
| ·MiR-200a表达抑制对甘油三酯、总胆固醇含量的影响 | 第44-45页 |
| ·MiR-200a表达抑制对细胞生长的影响 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-47页 |
| ·MiR-200家族成员之间的调控 | 第46页 |
| ·MiR-200a对脂代谢的调控 | 第46-47页 |
| ·MiR-200a对细胞生长的的调控 | 第47页 |
| ·小结 | 第47-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 附录 | 第54-56页 |
| 缩略词 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 作者简介 | 第58页 |
