| 目录 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 1 前言 | 第10-16页 |
| ·引言 | 第10-11页 |
| ·植物氮素营养吸收和运输 | 第11-12页 |
| ·植物对硝态氮的吸收和运输 | 第11-12页 |
| ·植物对铵态氮的吸收和运输 | 第12页 |
| ·植物氮营养同化 | 第12-13页 |
| ·氮信号调控 | 第13-14页 |
| ·氮营养代谢和其它营养代谢途径的相互关系 | 第14页 |
| ·植物基因工程中常用的启动子 | 第14-15页 |
| ·植物氮代谢相关启动子特异表达相关元件 | 第15页 |
| ·启动子顺式作用元件研究方法 | 第15-16页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-23页 |
| ·水稻材料 | 第16页 |
| ·用于遗传转化的氮诱导表达基因 | 第16页 |
| ·实验菌株、载体和感受态细胞 | 第16-17页 |
| ·引物 | 第17-18页 |
| ·总RNA的提取,反转录成cDNA | 第18页 |
| ·芯片材料制备 | 第18-19页 |
| ·载体构建与水稻遗传转化 | 第19-21页 |
| ·超量表达载体构建 | 第19页 |
| ·Artificial miRNA抑制表达载体构建 | 第19页 |
| ·双链抑制表达载体构建 | 第19-20页 |
| ·基因启动子分析载体的构建 | 第20页 |
| ·Y2、Y5启动子截短融合GUS报告基因表达载体的构建 | 第20-21页 |
| ·水稻遗传转化 | 第21页 |
| ·DNA抽提、转基因植株阳性检测及表达分析 | 第21-22页 |
| ·DNA抽提 | 第21页 |
| ·转基因植株阳性检测 | 第21-22页 |
| ·转基因植株基因表达分析 | 第22页 |
| ·启动子表达载体转化植株GUS定量分析 | 第22-23页 |
| 3 结果与分析 | 第23-40页 |
| ·氮胁迫处理响应基因表达模式 | 第23-25页 |
| ·氮胁迫处理响应基因表达模式验证 | 第25-27页 |
| ·氮胁迫响应基因转化载体的构建及转化 | 第27-29页 |
| ·氮胁迫响应基因载体构建及转化情况概述 | 第27页 |
| ·超量表达载体的构建及转化 | 第27-28页 |
| ·抑制表达载体的构建及转化 | 第28-29页 |
| ·Artificial miRNA抑制表达载体的构建及转化 | 第28页 |
| ·双链抑制表达载体构建和转化 | 第28-29页 |
| ·启动子片段克隆及表达载体构建和转化 | 第29页 |
| ·转基因植株阳性鉴定 | 第29-30页 |
| ·转基因植株表达量检測 | 第30-34页 |
| ·转基因植株表达检测情况概述 | 第30页 |
| ·转基因植株超量表达检测 | 第30页 |
| ·转基因植株抑制表达量检测 | 第30-34页 |
| ·氮胁迫诱导型启动子的分离与鉴定 | 第34-40页 |
| ·候选启动子的筛选 | 第34-35页 |
| ·Y2、Y5启动子截短表达载体的构建和转化 | 第35-36页 |
| ·Y2、Y5启动子截短的GUS报告基因在氮胁迫诱导下的表达量测定 | 第36-37页 |
| ·Y2、Y5启动子截短的报告基因在氮胁迫诱导下的GUS活性测定 | 第37-40页 |
| 4. 讨论 | 第40-42页 |
| ·氮响应相关基因的功能阐述 | 第40-41页 |
| ·氮响应调控元件的初步分析 | 第41-42页 |
| 5. 展望 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 附录A 部分实验的操作步骤 | 第52-58页 |
