| 致谢 | 第1-4页 |
| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 前言 | 第9-11页 |
| 1. 课题研究的背景及意义 | 第9页 |
| 2. 本课题拟解决的问题和研究目的 | 第9-10页 |
| 3. 本论文主要研究的内容 | 第10页 |
| 4. 本文的主要创新点 | 第10-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-19页 |
| ·纤维素酶的概念、分类、结构及水解机制 | 第11-13页 |
| ·纤维素酶的概念 | 第11页 |
| ·纤维素酶的分类 | 第11页 |
| ·纤维素的结构及酶的水解机制 | 第11-13页 |
| ·内切型纤维素酶 | 第13-14页 |
| ·内切型纤维素酶概念 | 第13页 |
| ·内切型纤维素酶的结构 | 第13页 |
| ·草菇内切型纤维素酶生物信息学分析 | 第13-14页 |
| ·酶耐热机制 | 第14-15页 |
| ·氨基酸组成与热稳定性 | 第14页 |
| ·氢键 | 第14页 |
| ·二硫键 | 第14页 |
| ·离子对 | 第14-15页 |
| ·分子改造的理性设计 | 第15页 |
| ·添加二硫键 | 第15页 |
| ·推理设计 | 第15页 |
| ·构建融合酶 | 第15页 |
| ·同源序列分析建模 | 第15-17页 |
| ·搜索结构模型的模板 | 第16页 |
| ·序列比对 | 第16页 |
| ·建立骨架，构建目标蛋白质侧链 | 第16页 |
| ·环区的建模 | 第16-17页 |
| ·整体结构模型的优化 | 第17页 |
| ·糖苷水解酶酶分子改造研究进展 | 第17-19页 |
| 第二章 定点突变改造提高内切型纤维素酶的热稳定性 | 第19-43页 |
| ·引言 | 第19页 |
| ·材料 | 第19-21页 |
| ·菌种及载体 | 第19页 |
| ·试剂 | 第19页 |
| ·工具酶及试剂盒 | 第19-20页 |
| ·培养基 | 第20页 |
| ·主要仪器 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-33页 |
| ·EG1 同源建模（homology modeling） | 第21页 |
| ·家族同源分析 | 第21页 |
| ·定点突变的构建 | 第21-28页 |
| ·重组酵母的液体培养及突变体蛋白分泌水平定量检测 | 第28页 |
| ·突变体蛋白的纯化及 SDS-PAGE | 第28-29页 |
| ·突变体蛋白的酶学研究 | 第29-33页 |
| ·结果与讨论 | 第33-42页 |
| ·EG1 同源建模（Homology modeling） | 第33-34页 |
| ·家族同源分析及突变位点的确定 | 第34-35页 |
| ·突变体基因的构建及表达 | 第35-39页 |
| ·原酶及突变体聚丙烯酰胺凝胶电泳的检测 | 第39页 |
| ·纤维素酶 EG1 突变体的酶学特性 | 第39-42页 |
| 本章小结 | 第42-43页 |
| 第三章 针对内切型纤维素酶 EG1 的 C-端定点突变 | 第43-64页 |
| ·引言 | 第43页 |
| ·材料 | 第43页 |
| ·菌种及载体 | 第43页 |
| ·试剂 | 第43页 |
| ·工具酶及试剂盒 | 第43页 |
| ·培养基 | 第43页 |
| ·主要仪器 | 第43页 |
| ·实验方法 | 第43-47页 |
| ·序列比对 | 第43页 |
| ·定点突变的构建 | 第43-46页 |
| ·重组酵母的液体培养 | 第46页 |
| ·突变体蛋白的纯化及 SDS-PAGE | 第46页 |
| ·突变体蛋白的酶学研究 | 第46-47页 |
| ·结果与讨论 | 第47-63页 |
| ·突变位点的确定 | 第47-48页 |
| ·突变体基因的构建及表达 | 第48-55页 |
| ·原酶及突变体聚丙烯酰胺凝胶电泳的检测 | 第55页 |
| ·纤维素酶 EG1 突变体的酶学特性 | 第55-60页 |
| ·EG1 及其 C-端突变体二级结构的研究 | 第60-63页 |
| 本章小结 | 第63-64页 |
| 总结和展望 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-67页 |
