| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-17页 |
| 縮略符号表 | 第17-18页 |
| 目录 | 第18-24页 |
| 引言 | 第24-25页 |
| 第一章 文献综述 | 第25-33页 |
| 1. 红细胞的主要功能 | 第25页 |
| 2. 动物红细胞的凋亡途径 | 第25-26页 |
| 3. 谷氨酰胺的代谢 | 第26页 |
| 4. 谷氨酰胺及其代谢产物抗凋亡作用 | 第26页 |
| 5. 谷氨酰胺及其代谢产物抗氧化与抗凋亡作用之间的关系 | 第26-27页 |
| 6. 谷氨酰胺的机体抗氧化作用 | 第27页 |
| 7. 谷氨酰胺机体抗氧化作用机制 | 第27-31页 |
| ·作为能源物质 | 第27-28页 |
| ·作为GSH生物合成的原料 | 第28页 |
| ·抑制一氧化氮合酶(NOS)活性 | 第28页 |
| ·诱导热应激蛋白(heat shock protein,HSP)的表达 | 第28-29页 |
| ·谷氨酰胺代谢产物的抗氧化作用 | 第29-31页 |
| ·丙氨酸的抗氧化作用 | 第29-30页 |
| ·瓜氨酸的抗氧化作用 | 第30页 |
| ·精氨酸(Arg)的抗氧化作用 | 第30页 |
| ·一氧化氮(NO)的抗氧化作用 | 第30-31页 |
| ·脯氨酸(Pro)的抗氧化作用 | 第31页 |
| 8. 存在的问题 | 第31-33页 |
| ·关于谷氨酰胺在鱼类血液中的代谢产物未见研究报道 | 第31页 |
| ·谷氨酰胺及其代谢产物对鱼类红细胞凋亡的影响未见研究报道 | 第31-32页 |
| ·谷氨酰胺及其代谢产物对鱼类红细胞凋亡作用机制未见报道 | 第32-33页 |
| 第二章 本研究的目的和意义 | 第33-34页 |
| 1. 研究目的 | 第33页 |
| 2. 研究意义 | 第33-34页 |
| 第三章 试验研究 | 第34-111页 |
| 试验一 GLN对幼建鲤血液生化指标和红细胞功能的影响 | 第34-48页 |
| 1. 前言 | 第34页 |
| 2. 材料与方法 | 第34-40页 |
| ·试验鱼选择及试验处理 | 第34页 |
| ·试验原料及试验日粮 | 第34-36页 |
| ·试验条件及饲养管理 | 第36页 |
| ·观测指标 | 第36-39页 |
| ·临床观察 | 第36页 |
| ·成活率和生长性能指标 | 第36-37页 |
| ·体成分及养分沉积率 | 第37页 |
| ·肝胰脏和肠道生长发育指标 | 第37-38页 |
| ·抗氧化指标的测定 | 第38页 |
| ·红细胞生化指标测定 | 第38-39页 |
| ·血浆中游离氨基酸含量测定 | 第39页 |
| ·数据处理与统计分析 | 第39-40页 |
| 3. 结果 | 第40-46页 |
| ·成活率、生长性能、体成分和养分沉积 | 第40-41页 |
| ·肝胰脏和肠道生长发育指标 | 第41-42页 |
| ·抗氧化功能指标 | 第42-44页 |
| ·血浆、肝胰脏和肠道丙二醛含量 | 第42-43页 |
| ·血浆、肝胰脏和肠道蛋白质羰基含量 | 第43页 |
| ·血浆、肝胰脏和肠道GSH含量 | 第43-44页 |
| ·红细胞生化指标 | 第44-45页 |
| ·血浆中游离氨基酸含量 | 第45-46页 |
| 4. 讨论 | 第46-47页 |
| ·Gln促进幼建鲤生长和抗氧化能力 | 第46页 |
| ·Gln影响了幼建鲤血液生化指标 | 第46页 |
| ·Gln对幼建鲤血液氨基酸含量的影响 | 第46-47页 |
| 5. 小结 | 第47-48页 |
| 试验二 ·OH诱导鲤鱼红细胞凋亡模型的建立 | 第48-59页 |
| 1. 前言 | 第48页 |
| 2. 材料与方法 | 第48-51页 |
| ·试验设计 | 第48-49页 |
| ·试验材料 | 第49页 |
| ·仪器 | 第49页 |
| ·试剂 | 第49页 |
| ·试验方法 | 第49-50页 |
| ·细胞分离 | 第49页 |
| ·凋亡诱导 | 第49-50页 |
| ·观测指标 | 第50-51页 |
| ·吉姆萨染色法后细胞形态观察和计数 | 第50页 |
| ·细胞培养液·OH浓度的测定 | 第50页 |
| ·红细胞溶血率的测定 | 第50页 |
| ·红细胞凋亡率的测定 | 第50-51页 |
| ·细胞凋亡DNA梯状条带的测定 | 第51页 |
| ·数据处理与统计分析 | 第51页 |
| 3. 试验结果 | 第51-56页 |
| ·吉姆萨染色法后细胞形态观察和计数 | 第51-53页 |
| ·培养液中·OH浓度 | 第53-54页 |
| ·红细胞溶血率和FITC-V染色测得的红细胞凋亡率 | 第54-55页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳测得的DNA梯状带 | 第55-56页 |
| 4. 讨论 | 第56-58页 |
| ·FeSO_4/H_2O_2使培养液·OH浓度增加 | 第56页 |
| ··OH诱导鲤鱼红细胞溶血和凋亡 | 第56-57页 |
| ··OH诱导鲤鱼红细胞的DNA片段化 | 第57页 |
| ··OH诱导鲤鱼红细胞的坏死和微核 | 第57页 |
| ··OH诱导鲤鱼红细胞凋亡模型的建立 | 第57-58页 |
| 5. 小结 | 第58-59页 |
| 试验三 ·OH诱导鲤鱼红细胞凋亡途径的初步探索 | 第59-73页 |
| 1. 前言 | 第59页 |
| 2. 材料与方法 | 第59-62页 |
| ·试验设计 | 第59-60页 |
| ·试验材料 | 第60-61页 |
| ·仪器 | 第60页 |
| ·试剂 | 第60-61页 |
| ·试验方法 | 第61页 |
| ·红细胞分离 | 第61页 |
| ·红细胞成熟度的分段分离 | 第61页 |
| ·凋亡诱导 | 第61页 |
| ·观测指标 | 第61-62页 |
| ·细胞观察 | 第61页 |
| ·细胞内ROS的测定 | 第61页 |
| ·细胞内Ca~(2+)浓度的测定 | 第61-62页 |
| ·红细胞caspase-3活性的测定 | 第62页 |
| ·红细胞calpain活性的测定 | 第62页 |
| ·红细胞凋亡率的测定 | 第62页 |
| ·数据处理和统计分析 | 第62页 |
| 3. 结果 | 第62-70页 |
| ·不同成熟度细胞的细胞周期 | 第62-63页 |
| ··OH诱导的不同成熟度细胞FITC-V标记 | 第63-65页 |
| ··OH诱导的不同成熟度细胞内ROS浓度 | 第65-66页 |
| ··OH诱导的不同成熟度细胞caspase-3活性 | 第66-68页 |
| ··OH诱导的不同成熟度细胞内Ca~(2+)浓度 | 第68-69页 |
| ··OH诱导的不同成熟度细胞calpain活性 | 第69-70页 |
| 4. 讨论 | 第70-72页 |
| ·不同成熟度细胞的细胞周期 | 第70页 |
| ··OH诱导的不同成熟度细胞FITC-V标记 | 第70-71页 |
| ··OH诱导的不同成熟度细胞Caspase-3活性 | 第71页 |
| ··OH诱导的不同成熟度细胞内ROS浓度 | 第71页 |
| ··OH诱导的不同成熟度细胞内Ca~(2+)浓度 | 第71-72页 |
| ··OH诱导的不同成熟度细胞内calpain活性 | 第72页 |
| 5. 小结 | 第72-73页 |
| 试验四 GLN、ALA、CIT和PRO对·OH诱导鲤鱼红细胞凋亡的保护作用 | 第73-96页 |
| 1. 前言 | 第73页 |
| 2. 材料与方法 | 第73-77页 |
| ·试验设计方案 | 第73-74页 |
| ·试验材料 | 第74页 |
| ·仪器 | 第74页 |
| ·试剂 | 第74页 |
| ·试验方法 | 第74-75页 |
| ·红细胞的分离 | 第74-75页 |
| ·细胞保护 | 第75页 |
| ·指标测定 | 第75-77页 |
| ·细胞观察 | 第75页 |
| ·红细胞溶血率的测定 | 第75页 |
| ·红细胞FITC-V绑定的测定 | 第75页 |
| ·红细胞前向散射的测定 | 第75-76页 |
| ·细胞凋亡DNA梯状条带的测定 | 第76页 |
| ·红细胞微核率的测定 | 第76页 |
| ·抗氧化指标的测定 | 第76-77页 |
| ·细胞血红蛋白含量的测定 | 第77页 |
| ·数据处理与统计分析 | 第77页 |
| 3. 结果 | 第77-91页 |
| ·Gln及其代谢产物对·OH诱导红细胞溶血的影响 | 第77-78页 |
| ·Gln及其代谢产物对·OH诱导下红细胞ROS产生的影响 | 第78-79页 |
| ·Gin及其代谢产物对·OH诱导红细胞脂和蛋白氧化的影响 | 第79-81页 |
| ·Gin及其代谢产物对·OH诱导红细胞Hb氧化的影响 | 第81-82页 |
| ·Gln及其代谢产物对·OH诱导下红细胞抗氧化酶活性的影响 | 第82-86页 |
| ·Gln及其代谢产物对·OH诱导下红细胞抵抗·OH能力的影响 | 第86页 |
| ·Gln及其代谢产物对·OH诱导下红细胞GSH含量的影响 | 第86-87页 |
| ·Gln及其代谢产物对·OH诱导下红细胞FITC-V绑定的影响 | 第87-89页 |
| ·Gln及其代谢产物对·OH诱导下红细胞前向散射的影响 | 第89-90页 |
| ·Gln及其代谢产物对·OH诱导下红细胞DNA的片段化的影响 | 第90页 |
| ·Gln及其代谢产物对·OH诱导红细胞发生微核的影响 | 第90-91页 |
| 4. 讨论 | 第91-95页 |
| ·Gln及其代谢产物对·OH诱导红细胞凋亡和微核的影响 | 第91-92页 |
| ·Gln及其代谢产物对·OH诱导红细胞氧化损伤的影响 | 第92-93页 |
| ·Gln及其代谢产物对·OH诱导红细胞抗氧化剂的影响 | 第93-94页 |
| ·Ala、Cit和Pro三者的结合对·OH诱导的鲤鱼红细胞的保护作用 | 第94-95页 |
| 5. 小结 | 第95-96页 |
| 试验五 GLN、ALA、CIT和PRO对·OH诱导鲤鱼红细胞凋亡途径的影响 | 第96-111页 |
| 1. 前言 | 第96页 |
| 2. 材料与方法 | 第96-99页 |
| ·试验设计 | 第96-97页 |
| ·试验材料 | 第97页 |
| ·试验方法 | 第97-98页 |
| ·红细胞的分离 | 第97页 |
| ·细胞保护试验 | 第97-98页 |
| ·观测指标 | 第98-99页 |
| ·细胞内ROS的测定 | 第98页 |
| ·细胞内Ca~(2+)浓度的测定 | 第98页 |
| ·红细胞caspase-3活性的测定 | 第98页 |
| ·红细胞calpain活性的测定 | 第98页 |
| ·红细胞凋亡率的测定 | 第98页 |
| ·FITC-V、PI和TUNEL标记染色拍照 | 第98页 |
| ·细胞膜蛋白SDS-PAGE | 第98页 |
| ·血红蛋白吸收光谱的测定 | 第98-99页 |
| ·数据处理与统计分析 | 第99页 |
| 3. 结果 | 第99-108页 |
| ·Gln及其代谢产物对·OH诱导下红细胞内ROS的影响 | 第99-100页 |
| ·Gln及其代谢产物对·OH诱导下红细胞内Ca~(2+)浓度的影响 | 第100-101页 |
| ·Gln及其代谢产物对·OH诱导下红细胞Caspase-3活性的影响 | 第101页 |
| ·Gln及其代谢产物对·OH诱导下红细胞Calpain活性的影响 | 第101-102页 |
| ·Gln及其代谢产物对·OH诱导下红细胞FITC-V绑定的影响 | 第102-103页 |
| ·Gln及其代谢产物对·OH诱导下红细胞TUNEL标记的影响 | 第103-105页 |
| ·Gln及其代谢产物对·OH诱导下红细胞膜蛋白氧化的影响 | 第105-106页 |
| ·Gln及其代谢产物对·OH诱导下红细胞Hb氧化的影响 | 第106-108页 |
| 4. 讨论 | 第108-110页 |
| ·Gln及其代谢产物对·OH诱导鲤鱼红细胞凋亡因子的活化的抑制作用 | 第108页 |
| ·Gln及其代谢产物对·OH诱导鲤鱼红细胞ROS增加的抑制作用 | 第108-109页 |
| ·Gln及其代谢产物对·OH诱导鲤鱼红细胞骨架蛋白氧化的抑制作用 | 第109页 |
| ·Gln及其代谢产物对·OH诱导鱼红细胞Hb吸收光谱改变的抑制作用 | 第109-110页 |
| 5. 小结 | 第110-111页 |
| 第四章 全文总结与结论、创新点及有待进一步研究的问题 | 第111-113页 |
| 1. 全文总结与结论 | 第111页 |
| 2. 本研究的创新点 | 第111-112页 |
| 3. 有待进一步研究的问题 | 第112-113页 |
| 参考文献 | 第113-130页 |
| 致谢 | 第130-131页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第131页 |
