中文摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
前言 | 第13-15页 |
第一章 文献综述 布鲁氏菌在巨噬细胞致病机制的初步研究 | 第15-29页 |
1、布鲁氏菌生物学特性 | 第15-16页 |
2、布鲁氏菌的致病机制 | 第16-29页 |
·布鲁氏菌毒力因子 | 第16-18页 |
·布鲁氏菌的调理与非调理生活方式 | 第18-21页 |
·布鲁氏菌与自噬 | 第21-22页 |
·布鲁氏菌与凋亡 | 第22-29页 |
第二章 实验研究 | 第29-59页 |
实验一 布鲁氏菌强毒株16M、疫苗株M5-90感染RAW264.7凋亡模型的建立 | 第29-37页 |
摘要 | 第29-30页 |
1 材料与方法 | 第30-32页 |
·菌株与质粒 | 第30页 |
·主要试剂 | 第30页 |
·主要仪器 | 第30页 |
·试验方法 | 第30-32页 |
·巨噬细胞RAW264.7的培养 | 第30页 |
·布鲁氏菌强毒株16M、疫苗株M5-90菌株培养及鉴定 | 第30-31页 |
·布鲁氏菌强毒株16M、疫苗株M5-90不同时间不同感染复数感染巨噬细胞RAW264.7凋亡率 | 第31-32页 |
2 结果 | 第32-34页 |
·巨噬细胞的培养 | 第32页 |
·布鲁氏菌株PCR鉴定 | 第32-33页 |
·布鲁氏菌强毒株16M、疫苗株M5-90诱导巨噬细胞RAW264.7凋亡模型的建立 | 第33-34页 |
·不同时间布鲁氏菌胞内CFU计数 | 第34页 |
3. 讨论 | 第34-36页 |
·布鲁氏菌与巨噬细胞 | 第34-35页 |
·布鲁氏菌感染模型 | 第35-36页 |
·布鲁氏菌强毒株16M与疫苗株M5-90的比较 | 第36页 |
4 结论 | 第36-37页 |
实验二 Caspae3、8、9对布鲁氏菌诱导RAW264.7凋亡的影响 | 第37-45页 |
摘要 | 第37-38页 |
1 材料与方法 | 第38-39页 |
·菌株和细胞 | 第38页 |
·主要试剂 | 第38页 |
·主要仪器 | 第38页 |
·方法 | 第38-39页 |
·布鲁氏菌强疫苗株诱导巨噬细胞凋亡率 | 第38-39页 |
·感染细胞caspase3、8、9表达量检测 | 第39页 |
·caspase3、8、9对凋亡的影响 | 第39页 |
·统计学分析 | 第39页 |
2 结果 | 第39-43页 |
·布鲁氏菌强毒株16M、疫苗株M5-90诱导巨噬细胞凋亡率 | 第39-41页 |
·M5-90感染RAW264.7巨噬细胞24h后Caspase3、8、9的表达量 | 第41-42页 |
·抑制Caspase3、8、9后细胞感染24h凋亡率 | 第42-43页 |
3 讨论 | 第43-44页 |
4 结论 | 第44-45页 |
实验三 布鲁氏菌强毒株16M、疫苗株M5-90诱导巨噬细胞凋亡线粒体途径相关因子的表达比较 | 第45-59页 |
摘要 | 第45-46页 |
1 材料与方法 | 第46-50页 |
·细菌和细胞 | 第46页 |
·主要试剂 | 第46页 |
·主要仪器 | 第46页 |
·方法 | 第46-50页 |
·细胞培养 | 第46页 |
·ELISA检测布鲁氏菌强疫苗株感染巨噬细胞后TNF-a、cytc的表达变化 | 第46-47页 |
·实时定量PCR检测AIF、Bcl-2、Bax、Apaf-1、Bcl-xl的表达变化 | 第47-50页 |
2 结果 | 第50-56页 |
·TNF-a和Cytc标准曲线的制作 | 第50-51页 |
·强疫苗株感染巨噬细胞后细胞内TNF-a和Cytc表达量 | 第51-52页 |
·实时定量PCR检测AIF、Bcl-2、Bax、Apaf-1、Bcl-xl的变化 | 第52-55页 |
·激光共聚焦检测Cytc共定位情况 | 第55-56页 |
3 讨论 | 第56-58页 |
·布鲁氏菌与凋亡 | 第56-57页 |
·布鲁氏菌与线粒体途径相关凋亡因子 | 第57-58页 |
4 结论 | 第58-59页 |
全文总结 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
导师评阅表 | 第70页 |