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布鲁氏菌强弱毒株诱导巨噬细胞凋亡机制初步研究

中文摘要第1-11页
Abstract第11-13页
前言第13-15页
第一章 文献综述 布鲁氏菌在巨噬细胞致病机制的初步研究第15-29页
 1、布鲁氏菌生物学特性第15-16页
 2、布鲁氏菌的致病机制第16-29页
   ·布鲁氏菌毒力因子第16-18页
   ·布鲁氏菌的调理与非调理生活方式第18-21页
   ·布鲁氏菌与自噬第21-22页
   ·布鲁氏菌与凋亡第22-29页
第二章 实验研究第29-59页
 实验一 布鲁氏菌强毒株16M、疫苗株M5-90感染RAW264.7凋亡模型的建立第29-37页
  摘要第29-30页
  1 材料与方法第30-32页
   ·菌株与质粒第30页
   ·主要试剂第30页
   ·主要仪器第30页
   ·试验方法第30-32页
     ·巨噬细胞RAW264.7的培养第30页
     ·布鲁氏菌强毒株16M、疫苗株M5-90菌株培养及鉴定第30-31页
     ·布鲁氏菌强毒株16M、疫苗株M5-90不同时间不同感染复数感染巨噬细胞RAW264.7凋亡率第31-32页
  2 结果第32-34页
   ·巨噬细胞的培养第32页
   ·布鲁氏菌株PCR鉴定第32-33页
   ·布鲁氏菌强毒株16M、疫苗株M5-90诱导巨噬细胞RAW264.7凋亡模型的建立第33-34页
   ·不同时间布鲁氏菌胞内CFU计数第34页
  3. 讨论第34-36页
   ·布鲁氏菌与巨噬细胞第34-35页
   ·布鲁氏菌感染模型第35-36页
   ·布鲁氏菌强毒株16M与疫苗株M5-90的比较第36页
  4 结论第36-37页
 实验二 Caspae3、8、9对布鲁氏菌诱导RAW264.7凋亡的影响第37-45页
  摘要第37-38页
  1 材料与方法第38-39页
   ·菌株和细胞第38页
   ·主要试剂第38页
   ·主要仪器第38页
   ·方法第38-39页
     ·布鲁氏菌强疫苗株诱导巨噬细胞凋亡率第38-39页
     ·感染细胞caspase3、8、9表达量检测第39页
     ·caspase3、8、9对凋亡的影响第39页
     ·统计学分析第39页
  2 结果第39-43页
   ·布鲁氏菌强毒株16M、疫苗株M5-90诱导巨噬细胞凋亡率第39-41页
   ·M5-90感染RAW264.7巨噬细胞24h后Caspase3、8、9的表达量第41-42页
   ·抑制Caspase3、8、9后细胞感染24h凋亡率第42-43页
  3 讨论第43-44页
  4 结论第44-45页
 实验三 布鲁氏菌强毒株16M、疫苗株M5-90诱导巨噬细胞凋亡线粒体途径相关因子的表达比较第45-59页
  摘要第45-46页
  1 材料与方法第46-50页
   ·细菌和细胞第46页
   ·主要试剂第46页
   ·主要仪器第46页
   ·方法第46-50页
     ·细胞培养第46页
     ·ELISA检测布鲁氏菌强疫苗株感染巨噬细胞后TNF-a、cytc的表达变化第46-47页
     ·实时定量PCR检测AIF、Bcl-2、Bax、Apaf-1、Bcl-xl的表达变化第47-50页
  2 结果第50-56页
   ·TNF-a和Cytc标准曲线的制作第50-51页
   ·强疫苗株感染巨噬细胞后细胞内TNF-a和Cytc表达量第51-52页
   ·实时定量PCR检测AIF、Bcl-2、Bax、Apaf-1、Bcl-xl的变化第52-55页
   ·激光共聚焦检测Cytc共定位情况第55-56页
  3 讨论第56-58页
   ·布鲁氏菌与凋亡第56-57页
   ·布鲁氏菌与线粒体途径相关凋亡因子第57-58页
  4 结论第58-59页
全文总结第59-61页
参考文献第61-69页
致谢第69-70页
导师评阅表第70页

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