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中华蜜蜂两种嗅觉相关蛋白的基因克隆与功能研究

致谢第1-7页
摘要第7-9页
Abstract第9-12页
目次第12-15页
图清单第15-16页
表清单第16-17页
1 绪论第17-28页
   ·蜜蜂的生物学特性及其触角感器第17-21页
     ·蜜蜂的生物学特性第17-19页
     ·蜜蜂触角感器的形态与功能第19-21页
   ·嗅觉识别的过程中相关蛋白质的研究第21-25页
     ·气味结合蛋白的研究进展第22-23页
     ·嗅觉受体蛋白的研究进展第23-25页
   ·研究的内容与意义第25-26页
     ·研究背景第25页
     ·研究目标与研究的内容第25-26页
     ·研究的目的与意义第26页
   ·研究技术路线第26-28页
2 中蜂气味结合蛋白 OBP11 与 Orco 嗅觉受体基因的克隆与序列分析第28-42页
   ·材料与方法第28-31页
     ·实验材料与试剂第28-29页
     ·中蜂触角总 RNA 的提取及反转录第29页
     ·基因克隆引物的设计与合成第29-30页
     ·基因的克隆、鉴定及序列测定第30-31页
     ·基因序列的分析第31页
   ·结果与分析第31-41页
     ·中蜂 AcerOBP11 基因的克隆与基因序列分析第31-37页
     ·中蜂 AcerOrco 基因的克隆与基因序列分析第37-41页
   ·讨论第41-42页
3 中蜂气味结合蛋白 OBP11 与 Orco 嗅觉受体基因的表达谱分析第42-52页
   ·材料与方法第42-44页
     ·实验材料与试剂第42页
     ·中蜂总 RNA 的提取与反转录第42-43页
     ·荧光定量引物的设计第43页
     ·中蜂内参基因β-actin 的克隆第43-44页
     ·Real-time PCR 反应第44页
   ·结果与分析第44-50页
     ·中蜂总 RNA 质量鉴定第44-45页
     ·中蜂内参基因β-actin 的克隆结果第45-47页
     ·中蜂 OBP11 基因的相对表达情况分析第47-49页
     ·中蜂 Orco 基因的相对表达情况分析第49-50页
   ·讨论第50-52页
4 中蜂气味结合蛋白 OBP11 的原核表达、蛋白纯化及结合特性分析第52-66页
   ·材料与方法第52-56页
     ·实验材料与试剂第52-53页
     ·中蜂 OBP11 的原核表达载体构建与鉴定第53-54页
     ·中蜂 OBP11 重组蛋白的诱导表达与分析第54页
     ·中蜂 OBP11 重组蛋白的分离纯化与复性第54-55页
     ·中蜂 OBP11 与气味物质的结合特性分析第55-56页
   ·结果与分析第56-64页
     ·中蜂 OBP11 的原核表达载体的鉴定第56-57页
     ·中蜂 OBP11 重组蛋白诱导形式分析第57-59页
     ·中蜂 OBP11 重组蛋白的纯化第59-61页
     ·中蜂 OBP11 重组蛋白的复性第61页
     ·中蜂 OBP11 的结合特性分析第61-64页
   ·讨论第64-66页
5 中蜂气味结合蛋白 OBP11 与 Orco 嗅觉受体的免疫荧光定位第66-74页
   ·材料与方法第66-69页
     ·实验材料与试剂第66-67页
     ·抗 AcerOBP11 与抗 AcerOrco 多抗血清的制备及效价测定第67-68页
     ·中蜂 AcerOBP11 与 AcerOrco 的免疫荧光定位第68-69页
   ·结果与分析第69-72页
     ·中蜂 AcerOBP11 在采集蜂触角上的免疫定位第69页
     ·中蜂 AcerOrco 在采集蜂触角上的免疫定位第69-71页
     ·中蜂 AcerOBP11 与 AcerOrco 在采集蜂触角上的共定位第71-72页
   ·讨论第72-74页
6 结论第74-77页
   ·研究总结第74-76页
     ·中蜂 AcerOBP11 与 AcerOrco 基因的克隆与序列分析第74页
     ·中蜂 AcerOBP11 与 AcerOrco 基因的表达谱分析第74-75页
     ·中蜂 AcerOBP11 的原核表达、蛋白纯化及结合特性分析第75页
     ·中蜂 AcerOBP11 与 AcerOrco 的免疫荧光定位第75-76页
   ·课题展望第76-77页
参考文献第77-84页
附录第84-86页
作者简历第86-87页

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