摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-9页 |
符号说明 | 第9-10页 |
1 前言 | 第10-26页 |
·可移动基因组简介 | 第10-21页 |
·基因组岛的进化 | 第10-12页 |
·基因组岛的功能 | 第12-19页 |
·基因组岛的生活环境 | 第19页 |
·鉴定基因组岛的方法 | 第19-20页 |
·定向克隆基因组岛的方法 | 第20-21页 |
·肺炎克雷伯菌 | 第21-22页 |
·肺炎克雷伯菌的基本特征 | 第21页 |
·肺炎克雷伯菌的流行病学研究 | 第21页 |
·克雷伯菌的致病因子 | 第21-22页 |
·铜绿假单胞菌 | 第22-23页 |
·铜绿假单胞菌的基本特征 | 第22页 |
·铜绿假单胞菌的基因组特征 | 第22-23页 |
·铜绿假单胞菌的致病性 | 第23页 |
·本研究的立题依据及采取的技术路线 | 第23-26页 |
2 材料与方法 | 第26-40页 |
·实验材料 | 第26-30页 |
·菌株和质粒 | 第26-29页 |
·培养基和化学试剂 | 第29页 |
·本实验所用的酶及主要试剂 | 第29-30页 |
·实验方法 | 第30-37页 |
·生物信息学分析 | 第30-31页 |
·菌种培养及保藏 | 第31页 |
·DNA的提取及操作 | 第31-35页 |
·在大肠杆菌中导入外源DNA | 第35页 |
·酵母醋酸锂转化法 | 第35-36页 |
·酵母菌落原位PCR | 第36页 |
·tRIP PCR的反应体系及反应条件 | 第36-37页 |
·Long-Range PCR的反应体系及反应条件 | 第37页 |
·实验中使用的引物 | 第37页 |
·测序工作 | 第37-40页 |
3 结果与讨论 | 第40-67页 |
·耐药性条件致病菌肺炎克雷伯菌的基因组岛分析 | 第40-59页 |
·已测序的肺炎克雷伯菌基因组岛的识别及tRIP PCR引物设计 | 第40-44页 |
·16S rRNA PCR分析 | 第44页 |
·tRIP PCR及Long-Range PCR分析 | 第44-46页 |
·tmRNA基因插入热点基因组岛的研究 | 第46-51页 |
·SGSP PCR结果及分析 | 第51-52页 |
·其它肠杆菌中tmRNA基因位点基因组岛的分布情况 | 第52-55页 |
·构建55_phe基因位点酵母捕捉载体定向克隆基因组岛 | 第55-57页 |
·肺炎克雷伯菌基因池的构建 | 第57-59页 |
·耐药性条件致病菌铜绿假单胞菌的基因组岛分析 | 第59-67页 |
·铜绿假单胞菌基因组岛的搜寻 | 第59-60页 |
·整合型质粒pHS87b | 第60-61页 |
·铜绿假单胞菌HS87中两个天然质粒的发现及验证 | 第61-62页 |
·序列和注释 | 第62页 |
·氨基糖苷6’-N-乙酰转移酶基因表达菌株的构建和验证 | 第62-64页 |
·毒素/抗毒素系统 | 第64-67页 |
4 结论 | 第67-68页 |
5 展望 | 第68-69页 |
6 参考文献 | 第69-78页 |
7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第78-79页 |
8 致谢 | 第79-80页 |
附录 | 第80-89页 |