摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
第1章 前言 | 第11-18页 |
·肺癌肿瘤标志物 | 第11-14页 |
·CEA | 第11-12页 |
·NSE | 第12页 |
·CYFRA21-1 | 第12-13页 |
·SCCAg | 第13页 |
·proGRP | 第13-14页 |
·联合诊断 | 第14页 |
·噬菌体展示 | 第14-17页 |
·噬菌体展示系统 | 第14-16页 |
·噬菌体展示文库 | 第16-17页 |
·研究目的及意义 | 第17-18页 |
第2章 含 6×His 标签 T7Select10-3b 载体的构建 | 第18-30页 |
·材料 | 第18-19页 |
·实验材料及试剂 | 第18页 |
·主要试剂配制 | 第18-19页 |
·主要实验仪器 | 第19页 |
·方法 | 第19-26页 |
·T7Select10-3b 噬菌体 DNA 的提取 | 第19-21页 |
·T7 噬菌体载体臂的制备 | 第21-22页 |
·含 6×His 插入标签的制备 | 第22-24页 |
·重组子的构建 | 第24-25页 |
·重组子的筛选 | 第25-26页 |
·结果 | 第26-29页 |
·T7 载体双酶切 | 第26-27页 |
·含 His 标签插入片段的 PCR 扩增 | 第27-28页 |
·重组子的筛选鉴定 | 第28-29页 |
·讨论 | 第29-30页 |
第3章 新型载体的构建及 His 标签表达鉴定 | 第30-36页 |
·材料 | 第30-31页 |
·实验材料及试剂 | 第30页 |
·培养基及缓冲液的配制 | 第30页 |
·主要实验仪器 | 第30-31页 |
·方法 | 第31-32页 |
·新型 T7Select10-3b 载体的构建 | 第31-32页 |
·His 标签的表达验证 | 第32页 |
·结果 | 第32-34页 |
·新型载体的筛选鉴定 | 第32-33页 |
·His 标签的表达验证 | 第33-34页 |
·讨论 | 第34-36页 |
第4章 肺癌 T7cDNA 文库的构建 | 第36-48页 |
·材料 | 第36-37页 |
·实验材料及试剂 | 第36页 |
·主要试剂配制 | 第36-37页 |
·主要实验仪器 | 第37页 |
·方法 | 第37-44页 |
·总 RNA 的提取及 mRNA 分离纯化 | 第37-39页 |
·双链 cDNA 的合成 | 第39-40页 |
·末端修饰 | 第40-42页 |
·cDNA 大小片段的分离 | 第42页 |
·载体臂的制备 | 第42页 |
·文库的构建及质量鉴定 | 第42-44页 |
·结果 | 第44-46页 |
·肺癌总 RNA 的提取及 mRNA 的分离 | 第44-45页 |
·cDNA 文库质量鉴定 | 第45-46页 |
·讨论 | 第46-48页 |
第5章 肺癌 cDNA 文库的 ORF 筛选 | 第48-52页 |
·材料 | 第48-49页 |
·实验材料及试剂 | 第48页 |
·培养基及缓冲液的配制 | 第48页 |
·主要实验仪器 | 第48-49页 |
·方法 | 第49-50页 |
·镍柱亲和筛选 | 第49页 |
·文库的筛选验证 | 第49-50页 |
·结果 | 第50页 |
·讨论 | 第50-52页 |
结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第59页 |