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含多聚组氨酸标签的肺癌T7噬菌体cDNA文库的构建及ORF筛选

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第1章 前言第11-18页
   ·肺癌肿瘤标志物第11-14页
     ·CEA第11-12页
     ·NSE第12页
     ·CYFRA21-1第12-13页
     ·SCCAg第13页
     ·proGRP第13-14页
     ·联合诊断第14页
   ·噬菌体展示第14-17页
     ·噬菌体展示系统第14-16页
     ·噬菌体展示文库第16-17页
   ·研究目的及意义第17-18页
第2章 含 6×His 标签 T7Select10-3b 载体的构建第18-30页
   ·材料第18-19页
     ·实验材料及试剂第18页
     ·主要试剂配制第18-19页
     ·主要实验仪器第19页
   ·方法第19-26页
     ·T7Select10-3b 噬菌体 DNA 的提取第19-21页
     ·T7 噬菌体载体臂的制备第21-22页
     ·含 6×His 插入标签的制备第22-24页
     ·重组子的构建第24-25页
     ·重组子的筛选第25-26页
   ·结果第26-29页
     ·T7 载体双酶切第26-27页
     ·含 His 标签插入片段的 PCR 扩增第27-28页
     ·重组子的筛选鉴定第28-29页
   ·讨论第29-30页
第3章 新型载体的构建及 His 标签表达鉴定第30-36页
   ·材料第30-31页
     ·实验材料及试剂第30页
     ·培养基及缓冲液的配制第30页
     ·主要实验仪器第30-31页
   ·方法第31-32页
     ·新型 T7Select10-3b 载体的构建第31-32页
     ·His 标签的表达验证第32页
   ·结果第32-34页
     ·新型载体的筛选鉴定第32-33页
     ·His 标签的表达验证第33-34页
   ·讨论第34-36页
第4章 肺癌 T7cDNA 文库的构建第36-48页
   ·材料第36-37页
     ·实验材料及试剂第36页
     ·主要试剂配制第36-37页
     ·主要实验仪器第37页
   ·方法第37-44页
     ·总 RNA 的提取及 mRNA 分离纯化第37-39页
     ·双链 cDNA 的合成第39-40页
     ·末端修饰第40-42页
     ·cDNA 大小片段的分离第42页
     ·载体臂的制备第42页
     ·文库的构建及质量鉴定第42-44页
   ·结果第44-46页
     ·肺癌总 RNA 的提取及 mRNA 的分离第44-45页
     ·cDNA 文库质量鉴定第45-46页
   ·讨论第46-48页
第5章 肺癌 cDNA 文库的 ORF 筛选第48-52页
   ·材料第48-49页
     ·实验材料及试剂第48页
     ·培养基及缓冲液的配制第48页
     ·主要实验仪器第48-49页
   ·方法第49-50页
     ·镍柱亲和筛选第49页
     ·文库的筛选验证第49-50页
   ·结果第50页
   ·讨论第50-52页
结论第52-53页
参考文献第53-58页
致谢第58-59页
攻读学位期间取得的研究成果第59页

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