| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 符号及缩略语说明 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| ·猪病常用核酸诊断技术简介 | 第13-16页 |
| ·聚合酶链反应技术 | 第14页 |
| ·实时荧光定量PCR技术 | 第14-15页 |
| ·环介导等温扩增技术 | 第15-16页 |
| ·猪主要DNA病毒及其实验室检测方法简介 | 第16-22页 |
| ·猪细小病毒简介与实验室检测方法研究进展 | 第16-18页 |
| ·猪伪狂犬病毒简介与实验室检测方法研究进展 | 第18-20页 |
| ·猪圆环病毒2型简介与实验室检测方法研究进展 | 第20-22页 |
| ·研究的目的与意义 | 第22-23页 |
| 第二章 PPV、PRV及PCV-2单项及三重二温式PCR检测方法的建立和初步应用 | 第23-39页 |
| ·材料与方法 | 第23-29页 |
| ·病毒、菌株和载体 | 第23页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第23-24页 |
| ·引物设计与合成 | 第24-25页 |
| ·核酸的提取及目的DNA片段的克隆和测序 | 第25-27页 |
| ·PPV、PRV和PCV-2单项二温式PCR方法的建立 | 第27页 |
| ·PPV、PRV和PCV-2三重二温式PCR反应体系及反应条件的优化 | 第27-28页 |
| ·三重二温式PCR反应敏感性试验 | 第28-29页 |
| ·三重二温式PCR反应特异性试验 | 第29页 |
| ·三重二温式PCR的重复性试验 | 第29页 |
| ·单项及三重二温式PCR方法临床病料验证 | 第29页 |
| ·结果 | 第29-37页 |
| ·PPV、PRV和PCV-2目的基因片段扩增 | 第29-30页 |
| ·PPV、PRV和PCV-2单项二温式PCR方法的建立 | 第30-31页 |
| ·三重二温式PCR反应体系及反应条件的优化结果 | 第31-35页 |
| ·三重二温式PCR反应敏感性试验结果 | 第35-36页 |
| ·三重二温式PCR反应特异性试验结果 | 第36页 |
| ·三重二温式PCR反应重复性试验结果 | 第36-37页 |
| ·PPV、PRV及PCV-2单项及三重二温式PCR检测临床病料结果 | 第37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| 第三章 PPV、PRV和PCV-2 TaqMan~(?)法单项及三重FQ-PCR检测方法的建立和初步应用 | 第39-49页 |
| ·材料与方法 | 第39-42页 |
| ·实时荧光定量PCR引物和探针的设计 | 第39-40页 |
| ·核酸的提取、目的DNA片段的克隆测序及重组质粒的制备提取 | 第40页 |
| ·Taqman~(?)法单项实时荧光定量PCR检测方法的建立 | 第40页 |
| ·三重实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立 | 第40-41页 |
| ·TaqMan~(?)法单项和三重荧光定量PCR临床疑似病料检测 | 第41-42页 |
| ·结果 | 第42-47页 |
| ·目的片段的PCR扩增 | 第42页 |
| ·重组质粒的制备和浓度测定 | 第42页 |
| ·Taqman~(?)法单项实时荧光定量PCR检测方法的建立 | 第42-44页 |
| ·Taqman~(?)法三重实时荧光定量PCR检测方法及标准曲线的建立 | 第44-46页 |
| ·临床病料检测结果 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 第四章 PCV-2 LAMP检测方法的建立 | 第49-59页 |
| ·材料与方法 | 第49-51页 |
| ·病毒与菌株 | 第49页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第49-50页 |
| ·引物设计与合成 | 第50页 |
| ·基因组DNA和RNA的提取与定量 | 第50页 |
| ·PCV-2 LAMP检测方法的建立 | 第50-51页 |
| ·敏感性试验及结果可视化试验 | 第51页 |
| ·特异性试验 | 第51页 |
| ·扩增产物酶切验证试验 | 第51页 |
| ·临床阳性病料验证试验 | 第51页 |
| ·结果 | 第51-57页 |
| ·LAMP反应体系和反应条件优化结果 | 第51-55页 |
| ·敏感性试验及可视化试验结果 | 第55-56页 |
| ·特异性试验结果 | 第56页 |
| ·扩增产物酶切试验结果 | 第56-57页 |
| ·临床病料验证结果 | 第57页 |
| ·讨论 | 第57-59页 |
| 第五章 全文结论 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 致谢 | 第67-69页 |
| 在读硕士学位期间发表的论文 | 第69页 |
