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高致病性PRRSV毒株的分离及PRRSVRT-LAMP检测方法的分析

目录第1-6页
CONTENTS第6-8页
摘要第8-9页
Abstract第9-10页
1 前言第10-18页
   ·PRRSV 生物学特征第10-14页
     ·PRRSV 基因组结构第11-14页
   ·PRRSV 遗传变异第14-15页
     ·结构蛋白编码区的变异第14-15页
     ·非结构蛋白编码区的变异第15页
   ·环介导等温扩增(LAMP)第15-18页
     ·LAMP 原理第15-16页
     ·LAMP 方法特点第16页
     ·LAMP 的应用第16-18页
2 材料与方法第18-26页
   ·材料第18-19页
     ·菌株与载体第18页
     ·病料来源第18页
     ·细胞系与病毒第18页
     ·主要试剂第18页
     ·主要仪器设备第18-19页
   ·实验方法第19-26页
     ·猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离与鉴定第19-21页
     ·PRRSV GP5,M,N 和 NSP2 基因的克隆及序列分析第21-24页
     ·猪繁殖与呼吸综合征病毒的 RT-LAMP 检测方法的建立第24-26页
       ·引物设计第24页
       ·扩增模版的制备第24页
       ·RT-LAMP 反应体系第24页
       ·RT-LAMP 反应条件的优化第24-25页
       ·RT-LAMP 特异性检测第25页
       ·RT-LAMP,RT-PCR 和 real-time PCR 敏感性的比较第25页
       ·临床样品的检测第25-26页
3 结果第26-42页
   ·PRRSV 的分离鉴定第26-29页
     ·病料中 PRRSV 的鉴定第26页
     ·病毒的分离第26-27页
     ·间接免疫荧光鉴定结果第27-28页
     ·病毒的 RT-PCR 鉴定第28-29页
   ·PRRSV NSP2 和 ORF567 基因的克隆及序列分析第29-37页
     ·PRRSV NSP2 基因片段的扩增结果第29-30页
     ·NSP2 片段连接 T 载体后质粒的鉴定第30页
     ·PRRSV ORR567 基因的扩增结果第30-31页
     ·PRRSV ORF567 片段连接 T 载体后质粒的鉴定第31-32页
     ·PRRSV JILINTN1 和 JILINTN2 株的序列分析第32-37页
   ·PRRSV RT-LAMP 检测方法的建立第37-42页
     ·RT-LAMP 扩增产物的检测结果第37页
     ·RT-LAMP 反应体系的优化第37页
     ·敏感性测定结果第37-38页
     ·特异性检测结果第38-41页
     ·临床样本分析第41-42页
4 讨论第42-44页
   ·病毒的分离培养第42页
   ·病毒主要基因的克隆与序列分析第42-43页
   ·LAMP第43-44页
5 结论第44-45页
致谢第45-46页
参考文献第46-52页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第52页

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