| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第12-21页 |
| ·动物疾病模型 | 第12-14页 |
| ·动物疾病模型的概况 | 第12页 |
| ·制作动物疾病模型的方法 | 第12-13页 |
| ·猪动物模型的种类 | 第13页 |
| ·动物疾病模型的应用 | 第13-14页 |
| ·Von Hippel-Lindau 疾病 | 第14-19页 |
| ·VHL 基因的结构 | 第15页 |
| ·VHL 基因的功能 | 第15-17页 |
| ·VHL 疾病的临床学症状 | 第17-18页 |
| ·VHL 疾病在小鼠中的研究 | 第18-19页 |
| ·RNA 干扰 | 第19-21页 |
| ·RNAi 的作用机制 | 第19页 |
| ·RNAi 技术的应用 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-31页 |
| ·材料 | 第21-23页 |
| ·组织材料 | 第21页 |
| ·试剂的配制 | 第21-22页 |
| ·主要仪器 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-31页 |
| ·RNA 的提取和检测 | 第23页 |
| ·RNA 反转 | 第23-24页 |
| ·PCR 引物 | 第24页 |
| ·PCR 反应及 RACE 扩增 | 第24-25页 |
| ·纯化扩增产物 | 第25页 |
| ·连接产物的转化与筛选 | 第25-26页 |
| ·重组质粒的提取 | 第26-27页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第27页 |
| ·质粒大提 | 第27-28页 |
| ·猪 VHL 基因干扰片段的设计 | 第28页 |
| ·猪克隆胚胎的构建 | 第28-29页 |
| ·特异性启动子的扩增 | 第29-30页 |
| ·实验数据分析 | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-43页 |
| ·猪 VHL 基因的克隆及序列分析 | 第31-33页 |
| ·猪 VHL 基因的克隆 | 第31-33页 |
| ·猪 VHL 基因的序列分析 | 第33页 |
| ·猪 VHL 基因在各组织中的表达分析 | 第33-35页 |
| ·VHL 基因的干扰片段在猪 iPS 细胞中的筛选 | 第35-36页 |
| ·iPS 细胞中 VHL 基因拷贝数的检测 | 第35页 |
| ·干扰载体转染 iPS 检测干扰效率 | 第35-36页 |
| ·VHL 基因的干扰对克隆胚胎发育的影响 | 第36-38页 |
| ·特异性启动子介导的逆转录病毒干扰载体 | 第38-40页 |
| ·肾小管上皮细胞特异性启动子的扩增 | 第38页 |
| ·Pax6 基因启动子的扩增 | 第38-39页 |
| ·PMXS-KSP/Pax6-miR30F-shRNA- miR30R 载体的构建 | 第39-40页 |
| ·特异性启动子介导的 pGenesil-1 干扰载体 | 第40-41页 |
| ·启动子活性的验证 | 第41-43页 |
| 4 讨论 | 第43-46页 |
| ·猪 VHL 基因的克隆与序列分析 | 第43页 |
| ·VHL 相关疾病 | 第43-44页 |
| ·VHL 基因干扰片段的筛选及特异性干扰 | 第44页 |
| ·VHL 基因敲低对早期胚胎发育的影响 | 第44-46页 |
| 5 结论 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第54页 |
